活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒 红色荧光 货号22901-AAT Bioquest荧光染料

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活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒 红色荧光

活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒 红色荧光

活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒 红色荧光     货号22901 货号 22901 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 2604
Ex (nm) 520 Em (nm) 605
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

活性氧(ROS)是氧正常代谢的天然副产物,在细胞信号传导中起重要作用。但是,在与氧化应激相关的状态下,ROS水平会急剧增加。 ROS的积累会严重破坏细胞结构。氧化应激在心血管疾病,糖尿病,骨质疏松症,中风,炎性疾病,许多神经退行性疾病和癌症中的作用已得到公认。 ROS测量将有助于确定氧化应激如何调节各种细胞内途径。 Amplite 荧光ROS检测试剂盒使用我们独特的ROS指示剂来定量活细胞中的ROS。 Amplite ROS Red具有细胞渗透性。与ROS反应时会产生红色荧光。该试剂盒是一种优化的“混合和读取”测定形式。 Amplite 荧光ROS测定试剂盒提供了一种灵敏的一步荧光测定法,可在1-2小时的孵育中检测活细胞中的细胞内ROS。该测定可以以方便的96孔或384孔板形式进行,无需分离步骤即可轻松实现自动化。使用荧光酶标仪或荧光显微镜可以轻松读取其信号。它可用于定量ROS活性或筛选ROS抑制剂。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒。

活性氧(ROS)篇:包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

 

适用仪器


荧光显微镜  
激发: 520nm
发射: 605nm
推荐孔板: 黑色透明
滤波片: Texas Red滤波片组
荧光酶标仪  
激发: 520nm
发射: 605nm
cutoff: 590nm
推荐孔板: 黑色透明
读取模式: 底读模式

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 在生长培养基中准备细胞
  2. 加入Amplite ROS Red工作溶液(对于96孔板为100 µL /孔,对于384孔板为25 µL /孔)
  3. 在37°C下孵育细胞1小时
  4. 用测试化合物处理细胞以诱导ROS
  5. 在Ex / Em = 520/605 nm(截止= 590 nm)或安装Ex / Em = 520/605 nm滤光片的荧光显微镜下检测荧光增加(底部读取模式)

 

溶液配制

储备溶液配制

1. Amplite ROS Red储备液(500X):将40 µL DMSO(组分C)添加到Amplite ROS Red(组分A)的小瓶中,并充分混合以制成500X Amplite ROS Red储备液。 避光。 注意:20 µL 500X Amplite ROS Red储备液足以用于1个板。 注意:如果将试管紧密密封并避免光照,可以将未使用的部分等分并在<-20°C下保存超过一个月。 避免重复冻融循环。

 

工作溶液配制

将20 µL 500X Amplite ROS Red储备溶液添加到10 mL的测定缓冲液(组分B)中,并充分混合以制成Amplite ROS Red工作溶液。 注意:此Amplite ROS Red工作溶液在室温下至少可稳定2小时。

 

实验步骤

1.将100 µL /孔(96孔板)或25 µL /孔(384孔板)的Amplite ROS Red工作溶液添加到细胞板中。

2.将细胞在5%CO2、37°C的培养箱中孵育一小时。

3.在所需的缓冲液(例如PBS或HHBS)中,用20µL 11X测试化合物(96孔板)或10 µL 6X测试化合物(384孔板)处理细胞。 对于对照孔(未处理的细胞),添加相应量的化合物缓冲液。

4.要诱导ROS,请在室温下或在5%CO2、37°C的培养箱中孵育细胞板至少15分钟(对于用1 mM H2O2处理的Hela细胞为30分钟)。

5.在Ex / Em = 520/605 nm(截止= 590 nm)处使用荧光酶标仪(底部读取模式)检测荧光的增加,或在Ex / Em = 520/605 nm滤光片组(Texas Red)下使用荧光显微镜观察细胞)。

 

参考文献

Anti-proliferation effect of blue light-emitting diodes against antibiotic-resistant Helicobacter pylori
Authors: Ma, Jianwei and Hiratsuka, Takahiro and Etoh, Tsuyoshi and Akada, Junko and Fujishima, Hajime and Shiraishi, Norio and Yamaoka, Yoshio and Inomata, Masafumi
Journal: Journal of Gastroenterology and Hepatology (2017)

Notoginsenoside R1 attenuates high glucose-induced endothelial damage in rat retinal capillary endothelial cells by modulating the intracellular redox state
Authors: Fan, Chunlan and Qiao, Yuan and Tang, Minke
Journal: Drug Design, Development and Therapy (2017): 3343

Good hydration and cell-biological performances of superparamagnetic calcium phosphate cement with concentration-dependent osteogenesis and angiogenesis induced by ferric iron
Authors: Zhang, J and Shi, HS and Liu, JQ and Yu, T and Shen, ZH and Ye, JD
Journal: Journal of Materials Chemistry B (2015): 8782–8795

Topiramate Protects Pericytes from Glucotoxicity: Role for Mitochondrial CA VA in Cerebromicrovascular Disease in Diabetes
Authors: Patrick, Ping and Price, Tulin O and Diogo, Ana L and Sheibani, Nader and Banks, William A and Shah, Gul N
Journal: Journal of endocrinology and diabetes (2015)

Down-regulated peroxisome proliferator-activated receptor γ (PPARγ) in lung epithelial cells promotes a PPARγ agonist-reversible proinflammatory phenotype in chronic obstructive pulmonary disease (COPD)
Authors: Lakshmi, Sowmya P and Reddy, Aravind T and Zhang, Yingze and Sciurba, Frank C and Mallampalli, Rama K and Duncan, Steven R and Reddy, Raju C
Journal: Journal of Biological Chemistry (2014): 6383–6393

Superoxide dismutase as a target of clioquinol-induced neurotoxicity
Authors: Kawamura, Kazuyuki and Kuroda, Yukiko and Sogo, Masako and Fujimoto, Miki and Inui, Toshio and Mitsui, Takao
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2014): 181–185

Xanthine oxidase inhibition by febuxostat attenuates experimental atherosclerosis in mice
Authors: Nomura, Johji and Busso, Nathalie and Ives, Annette and Matsui, Chieko and Tsujimoto, Syunsuke and Shirakura, Takashi and Tamura, Mizuho and Kobayashi, Tsunefumi and So, Alex and er and Yamanaka, Yoshihiro
Journal: Scientific reports (2014): 4554

High glucose-induced mitochondrial respiration and reactive oxygen species in mouse cerebral pericytes is reversed by pharmacological inhibition of mitochondrial carbonic anhydrases: implications for cerebral microvascular disease in diabetes
Authors: Shah, Gul N and Morofuji, Yoichi and Banks, William A and Price, Tulin O
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2013): 354–358

Automatic flow injection based methodologies for determination of scavenging capacity against biologically relevant reactive species of oxygen and nitrogen
Authors: Magalhaes LM, Lucio M, Segundo MA, Reis S, Lima JL.
Journal: Talanta (2009): 1219

Diabetes and the impairment of reproductive function: possible role of mitochondria and reactive oxygen species
Authors: Amaral S, Oliveira PJ, Ramalho-Santos J.
Journal: Curr Diabetes Rev (2008): 46

说明书
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活性氧 ROS Brite HPF 货号16051-AAT Bioquest荧光染料

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活性氧 ROS Brite HPF

活性氧 ROS Brite HPF

活性氧 ROS Brite HPF    货号16051 货号 16051 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 1944
Ex (nm) 498 Em (nm) 517
分子量 424.40 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

ROS Brite 活性氧荧光探针HPF是美国AAT Bioquest研发的检测活性氧的荧光探针,活性氧(ROS)是含氧的化学反应性分子(如超氧化物,羟基,单线态氧和过氧化物)。由于存在不成对的价电子,ROS具有高反应性。 ROS形成氧的正常代谢的天然副产物,并且在细胞信号传导和体内平衡中具有重要作用。然而,在环境压力(例如,UV或热暴露)期间,ROS水平可显着增加。这可能导致细胞结构的显着损害。累积地,这被称为氧化应激。 ROS也由外源性源如电离辐射产生。在氧化应激条件下,ROS产生显着增加,导致随后膜脂,蛋白质和核酸的改变。这些生物分子的氧化损伤与衰老以及各种病理事件有关,包括动脉粥样硬化,致癌作用,缺血性再灌注损伤和神经退行性疾病。细胞渗透性ROS Brite™APF和HPF试剂是非荧光的并且在与羟基自由基或过氧亚硝酸根阴离子反应时产生亮绿色荧光(激发/发射= 490 / 515nm),APF也将与次氯酸根阴离子(OCl-)反应。此外,APF和HPF在过氧化物酶存在下也与过氧化氢反应。可以使用荧光成像,高内容成像,微孔板荧光测定法或流式细胞术测量所得荧光。 APF和HPF显示出对光诱导氧化的相对高的抗性。 APF和HPF在与羟基或过氧亚硝酸根阴离子反应之前是非荧光的。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的ROS检测探针。

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活性氧(ROS)篇:包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

 

适用仪器


流式细胞仪  
激发: 488nm激光
发射: 530/30nm滤波片
通道: FITC通道
荧光显微镜  
激发: FITC滤波片
发射: FITC滤波片
推荐孔板: 黑色透明孔板
荧光酶标仪  
激发: 490nm
发射: 525nm
cutoff: 515nm
推荐孔板: 黑色孔板

产品说明书

ROS Brite 染料的分析方案

该方案仅提供指南,实际应根据您的具体需求进行修改。在制备ROS Brite 工作溶液之前,根据需要处理细胞。

 

1)在DMSO中制备10至20mM ROS Brite APF(或HPF)储备溶液。通过将DMSO储备溶液稀释到含有20mM Hepes缓冲液(HHBS)的Hanks溶液中,制备1至10μM的工作溶液。

2)根据需要处理细胞(例如,用50-100nM血管紧张素II处理RASM细胞3-5小时)。

3)用ROS Brite APF(或HPF)(1-10μM,步骤#1)在37℃孵育细胞20-60分钟。

4)用HHBS缓冲液替换染料加载溶液。

5)用适当的荧光仪器在Ex / Em = 490 / 525mm(截止= 515nM)下用底部读取模式分析细胞(例如,用于荧光显微镜的FITC滤光片,用于流式细胞仪的FL1滤光片)。

注意:BSA和酚红会影响荧光,应谨慎使用。 APF和HPF均可用于溶液测定或细胞内测量。

 

参考文献

Developmental toxicity evaluation of three hexabromocyclododecane diastereoisomers on zebrafish embryos
Authors: Du M, Zhang D, Yan C, Zhang X.
Journal: Aquat Toxicol (2012): 1

MAPK inhibitors and siRNAs differentially affect cell death and ROS levels in arsenic trioxide-treated human pulmonary fibroblast cells
Authors: Park WH.
Journal: Oncol Rep (2012): 1611

MG132, a proteasome inhibitor, induces human pulmonary fibroblast cell death via increasing ROS levels and GSH depletion
Authors: Park WH, Kim SH.
Journal: Oncol Rep (2012): 1284

beta-Lapachone induces heart morphogenetic and functional defects by promoting the death of erythrocytes and the endocardium in zebrafish embryos
Authors: Wu YT, Lin CY, Tsai MY, Chen YH, Lu YF, Huang CJ, Cheng CM, Hwang SP.
Journal: J Biomed Sci (2011): 70

Enhancement of gallic acid-induced human pulmonary fibroblast cell death by N-acetyl cysteine and L-buthionine sulfoximine
Authors: You BR, Park WH.
Journal: Hum Exp Toxicol (2011): 992

Gallic acid-induced lung cancer cell death is accompanied by ROS increase and glutathione depletion
Authors: You BR, Kim SZ, Kim SH, Park WH.
Journal: Mol Cell Biochem (2011): 295

MAPK inhibitors differentially affect gallic acid-induced human pulmonary fibroblast cell growth inhibition
Authors: Park WH.
Journal: Mol Med Report (2011): 193

Mitogen-activated protein kinase inhibitors differently affect the growth inhibition and death of a proteasome inhibitor, MG132-treated human pulmonary fibroblast cells
Authors: Park WH.
Journal: Hum Exp Toxicol (2011): 1945

Proteasome inhibition by MG132 induces growth inhibition and death of human pulmonary fibroblast cells in a caspase-independent manner
Authors: You BR, Park WH.
Journal: Oncol Rep (2011): 1705

Effects of arsenic trioxide on cell death, reactive oxygen species and glutathione levels in different cell types
Authors: Han YH, Moon HJ, You BR, Kim SZ, Kim SH, Park WH.
Journal: Int J Mol Med (2010): 121

 

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产品名称 货号
ROS Brite 活性氧荧光探针570 Cat#16000
ROS Brite 活性氧荧光探针700 体内成像优化 Cat#16004
ROS Brite 活性氧荧光探针APF Cat#16050

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活性氧 ROS Brite DHCF 货号16053-AAT Bioquest荧光染料

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活性氧 ROS Brite DHCF

活性氧 ROS Brite DHCF

活性氧 ROS Brite DHCF    货号16053 货号 16053 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 2604
Ex (nm) 560 Em (nm) 575
分子量 701.50 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

ROS Brite 活性氧荧光探针DHCF是美国AAT Bioquest生产的用于检测活性氧的荧光探针,活性氧(ROS)是含氧的化学反应性分子(如超氧化物,羟基,单线态氧和过氧化物)。由于存在不成对的价电子,ROS具有高反应性。 ROS形成氧的正常代谢的天然副产物,并且在细胞信号传导和体内平衡中具有重要作用。然而,在环境压力(例如,UV或热暴露)期间,ROS水平可显着增加。这可能导致细胞结构的显着损害。累积地,这被称为氧化应激。 ROS也由外源性源如电离辐射产生。在氧化应激条件下,ROS产生显着增加,导致随后膜脂,蛋白质和核酸的改变。这些生物分子的氧化损伤与衰老以及各种病理事件有关,包括动脉粥样硬化,致癌作用,缺血性再灌注损伤和神经退行性疾病。 ROS Brite 试剂是一系列新型荧光探针,用于测量细胞中的氧化应激。透过细胞的ROS Brite 试剂是非荧光的,在ROS氧化后产生明亮的荧光。可以使用荧光成像,高内涵成像,微孔板荧光测定法或流式细胞术测量所得荧光。 ROS Brite 570,670和700试剂对羟基自由基和过氧化物均具有良好的选择性。 ROS Brite 700针对体内成像进行了优化。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的ROS Brite 活性氧荧光探针DHCF。 

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活性氧(ROS)篇:包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

产品说明书

ROS Brite染料的分析方案

该说明书仅提供指南,应根据您的具体需求进行修改。 在制备ROS Brite™工作溶液之前,根据需要处理细胞或动物。

 

1)在DMSO中制备10至20mM ROS Brite储备溶液。 通过将DMSO储备溶液稀释到含有20mM Hepes缓冲液(HHBS)的Hanks溶液中,制备5至10μM的工作溶液。

2)根据需要处理细胞(例如,用50-100nM血管紧张素II处理RASM细胞3-5小时)。

3)用ROS Brite(5-10μM,步骤#1)在37℃孵育细胞15-30分钟。

注意:使用的ROS Brite浓度因细胞系不同而不同,需要进行不同浓度的测试才能获得最佳剂量。 对于Cat#16053,可以使用较低的浓度,例如0.5-5μM。

4)用HHBS缓冲液替换染料加载溶液。

5)用合适的荧光仪器(例如荧光显微镜,流式细胞仪或体内成像仪器)分析细胞。

 

参考文献

An oxidative stress mechanism of shikonin in human glioma cells
Authors: Yang JT, Li ZL, Wu JY, Lu FJ, Chen CH.
Journal: PLoS One (2014): e94180

Association rule mining of cellular responses induced by metal and metal oxide nanoparticles
Authors: Liu R, France B, George S, Rallo R, Zhang H, Xia T, Nel AE, Bradley K, Cohen Y.
Journal: Analyst (2014): 943

HPLC-based monitoring of products formed from hydroethidine-based fluorogenic probes–the ultimate approach for intra- and extracellular superoxide detection
Authors: Kalyanaraman B, Dranka BP, Hardy M, Michalski R, Zielonka J.
Journal: Biochim Biophys Acta (2014): 739

Low Amounts of Mitochondrial Reactive Oxygen Species Define Human Sperm Quality
Authors: Marques M, Sousa AP, Paiva A, Almeida-Santos T, Ramalho-Santos J.
Journal: Reproduction. (2014)

Muscadine grape skin extract reverts snail-mediated epithelial mesenchymal transition via superoxide species in human prostate cancer cells
Authors: Burton LJ, Barnett P, Smith B, Arnold RS, Hudson T, Kundu K, Murthy N, Odero-Marah VA.
Journal: BMC Complement Altern Med (2014): 97

Nonthermal plasma induces head and neck cancer cell death: the potential involvement of mitogen-activated protein kinase-dependent mitochondrial reactive oxygen species
Authors: Kang SU, Cho JH, Chang JW, Shin YS, Kim KI, Park JK, Yang SS, Lee JS, Moon E, Lee K, Kim CH.
Journal: Cell Death Dis (2014): e1056

Subneurotoxic copper(II)-induced NF-kappaB-dependent microglial activation is associated with mitochondrial ROS
Authors: Hu Z, Yu F, Gong P, Qiu Y, Zhou W, Cui Y, Li J, Chen H.
Journal: Toxicol Appl Pharmacol (2014): 95

The acute inhibitory effect of iodide excess on sodium/iodide symporter expression and activity involves the PI3K/Akt signaling pathway
Authors: Serrano-Nascimento C, da Silva Teixeira S, Nicola JP, Nachbar RT, Masini-Repiso AM, Nunes MT.
Journal: Endocrinology (2014): 1145

A role for mitochondrial oxidants in stress-induced premature senescence of human vascular smooth muscle cells
Authors: Mistry Y, Poolman T, Williams B, Herbert KE.
Journal: Redox Biol (2013): 411

Application of concave microwells to pancreatic tumor spheroids enabling anticancer drug evaluation in a clinically relevant drug resistance model
Authors: Yeon SE, No da Y, Lee SH, Nam SW, Oh IH, Lee J, Kuh HJ.
Journal: PLoS One (2013): e73345

 

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活性氧 ROS荧光探针 CDCF 货号235-AAT Bioquest荧光染料

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活性氧 ROS荧光探针 CDCF

活性氧 ROS荧光探针 CDCF

活性氧 ROS荧光探针 CDCF    货号235 货号 235 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 mg 价格 1272
Ex (nm) 505 Em (nm) 526
分子量 445.21 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:235

产品名称:活性氧ROS荧光探针 CDCF

CAS:111843-78-8

规格:100mg

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:445.21

外观:橘色固体

溶剂:DMSO

激发波长(nm):504

发射波长(nm):525

 

产品介绍

活性氧ROS荧光探针 CDCF是美国AAT Bioquest生产的用于检测活性氧的荧光探针。CDCF是5(6) – 羧基-2’,7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯和5(6) – 羧基-2’,7’的荧光产物。细胞渗透性5(6) – 羧基-2’,7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯(H2DCFDA)(也称为二氯荧光素二乙酸酯)是化学还原形式的荧光素,用作细胞中活性氧(ROS)的指示剂, 例如,检测中性粒细胞和巨噬细胞中活性氧中间体的产生。 在通过细胞内酯酶和氧化裂解乙酸酯基团后,非荧光H2DCFDA转化为高荧光CDCF。 5(6) – 羧基-2’,7′-二氯荧光素二乙酸酯染色用于研究多药耐药性蛋白[MRP和P-糖蛋白(Pgp)]。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的活性氧ROS荧光探针 CDCF。 

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参考文献

Altered hepatobiliary disposition of 5 (and 6)-carboxy-2′,7′-dichlorofluorescein in Abcg2 (Bcrp1) and Abcc2 (Mrp2) knockout mice
Authors: Nezasa K, Tian X, Zamek-Gliszczynski MJ, Patel NJ, Raub TJ, Brouwer KL.
Journal: Drug Metab Dispos (2006): 718

CTLA-4IG suppresses reactive oxygen species by preventing synovial adherent cell-induced inactivation of Rap1, a Ras family GTPASE mediator of oxidative stress in rheumatoid arthritis T cells
Authors: Remans PH, Wijbrandts CA, Sanders ME, Toes RE, Breedveld FC, Tak PP, van Laar JM, Reedquist KA.
Journal: Arthritis Rheum (2006): 3135

Effect of culture conditions on the expression and function of Bsep, Mrp2, and Mdr1a/b in sandwich-cultured rat hepatocytes
Authors: Turncliff RZ, Tian X, Brouwer KL.
Journal: Biochem Pharmacol (2006): 1520

Kinetic validation of the use of carboxydichlorofluorescein as a drug surrogate for MRP5-mediated transport
Authors: Pratt S, Chen V, Perry WI, 3rd, Starling JJ, Dantzig AH.
Journal: Eur J Pharm Sci (2006): 524

Listeria innocua and Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus employ different strategies to cope with acid stress
Authors: Shabala L, McMeekin T, Budde BB, Siegumfeldt H.
Journal: Int J Food Microbiol (2006): 1

Non-destructive micromethod for MRP1 functional assay in human lung tumor cells
Authors: Stehfest E, Torky A, Glahn F, Foth H.
Journal: Arch Toxicol (2006): 125

Role of oxidative stress in the apoptosis of hepatocellular carcinoma induced by combination of arsenic trioxide and ascorbic acid
Authors: Li JJ, Tang Q, Li Y, Hu BR, Ming ZY, Fu Q, Qian JQ, Xiang JZ.
Journal: Acta Pharmacol Sin (2006): 1078

A plasma membrane H+-ATPase is required for the formation of proanthocyanidins in the seed coat endothelium of Arabidopsis thaliana
Authors: Baxter IR, Young JC, Armstrong G, Foster N, Bogenschutz N, Cordova T, Peer WA, Hazen SP, Murphy AS, Harper JF.
Journal: Proc Natl Acad Sci U S A (2005): 2649

Expression and activity of multidrug resistance protein 1 in a murine thymoma cell line
Authors: Echevarria-Lima J, Kyle-Cezar F, DF PL, Capella L, Capella MA, Rumjanek VM.
Journal: Immunology (2005): 468

Homocysteinic acid causes oxidative stress in lymphocytes by potentiating toxic effect of NMDA
Authors: Boldyrev AA.
Journal: Bull Exp Biol Med (2005): 33

说明书
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活性氧 MitoROS 线粒体ROS 580 货号16052-AAT Bioquest荧光染料

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活性氧 MitoROS 线粒体ROS 580

活性氧 MitoROS 线粒体ROS 580

活性氧 MitoROS 线粒体ROS 580    货号16052 货号 16052 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 500 Tests 价格 2604
Ex (nm) 500 Em (nm) 582
分子量 N/A 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

MitoROS 线粒体活性氧荧光探针580是美国AAT Bioquest生产的用于检测线粒体活性氧的荧光探针,活性氧(ROS)是含氧的化学反应性分子。实例包括超氧化物,羟基,单线态氧和过氧化物。由于存在不成对的价电子,ROS具有高反应性。 ROS形成氧的正常代谢的天然副产物,并且在细胞信号传导和体内平衡中具有重要作用。然而,在环境压力(例如,UV或热暴露)期间,ROS水平可显着增加。这可能导致细胞结构的显着损害。累积地,这被称为氧化应激。 MitoROS 580是一种超氧化物敏感染料,在加载到活细胞后定位于线粒体。超氧化物氧化MitoROS 580会产生红色荧光。 MitoROS 580可用荧光显微镜或荧光流式细胞仪监测线粒体中的超氧化物。 MitoROS 580试剂渗透活细胞,选择性地靶向线粒体。它被超氧化物迅速氧化。它不太可能被其他活性氧(ROS)和活性氮物质(RNS)氧化。氧化产物在细胞中高度荧光。 MitoROS 580为研究各种病理中的氧化应激提供了有价值的工具。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的MitoROS 线粒体活性氧荧光探针580。 

活性氧(ROS)篇:包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

产品说明书

使用MitoROS 580分析方案

该协议仅提供指南,应根据您的具体需求进行修改。在制作MitoROS 580工作溶液之前,根据需要处理细胞。

 

溶液配制

1)MitoROS 580 原液 (1000X)配制

将 13 µL DMSO 添加到 MitoROS 580 小瓶中并充分混合。注意:未使用的原液可以储存在 -20 oC,避光保存。

2)MitoROS 580 工作溶液(2X)配制

用 20 mM Hepes 缓冲液 (HHBS) 将 DMSO 原液稀释到 Hanks 溶液中,制成 2X 工作溶液。注意:2X MitoROS 580 工作液不稳定,请及时使用。

 

操作步骤

1.细胞培养

2.将细胞(例如 96 孔板中的 100 µL/孔)与等体积的 2X MitoROS 580 工作溶液在 37°C 下孵育 10-30 分钟,避光。 注意:MitoROS 580 的最终细胞浓度不应超过 1 X。浓度超过 1 X 会产生细胞毒性效应,包括线粒体形态改变和荧光重新分布到细胞核和细胞质中。 注意:不同细胞对 MitoROS 580 的反应不同,请相应调整工作浓度。

3.轻轻清洗细胞 3 次,并用 HHBS 缓冲液替换。

4.使用适当的荧光仪器 (例如, 荧光显微镜、流式细胞仪) 观察细胞。(Ex/Em = 510/580 nm)

 

参考文献

Intracellular Fenton Reaction based on Mitochondria-Targeted Copper (Ⅱ)-Peptide Complex for Induced Apoptosis
Authors: Xia Li, Sijia Hao, Ailing Han, Yayu Yang, Guozhen Fang, Jifeng Liu, Shuo Wang
Journal: Journal of Materials Chemistry B (2019)

The contribution of oxidative stress to platelet senescence during storage
Authors: Li Wang, Rufeng Xie, Zhijia Fan, Jie Yang, Wei Liang, Qiang Wu, Mei X Wu, Zhicheng Wang, Yuan Lu
Journal: Transfusion (2019)

Carbon monoxide poisoning–induced delayed encephalopathy accompanies decreased in microglial cell numbers: distinctive pathophysiological features from hypoxemia–induced brain damage
Authors: Keisuke Sekiya, Tasuku Nishihara, Naoki Abe, Amane Konishi, Hideyuki Nandate, Taisuke Hamada, Keizo Ikemune, Yasushi Takasaki, Junya Tanaka, Migiwa Asano
Journal: Brain research (2018)

说明书
活性氧 MitoROS 线粒体ROS 580.pdf