活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒 适合于流式细胞仪

	货号	22904	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	100 Tests	价格	3924
	Ex (nm)	490	Em (nm)	520
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

活性氧（ROS）是氧正常代谢的天然副产物，在细胞信号传导中起重要作用。但是，在与氧化应激相关的状态下，ROS水平会急剧增加。 ROS的积累会严重破坏细胞结构。氧化应激在心血管疾病，糖尿病，骨质疏松症，中风，炎性疾病，许多神经退行性疾病和癌症中的作用已得到公认。 ROS检测将有助于确定氧化应激如何调节各种细胞内途径。 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒使用我们独特的Amplite ROS Green荧光定量活细胞中的ROS，Amplite ROS Green具有细胞渗透性。与ROS反应时会生成绿色荧光。 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒提供了一种灵敏的一步荧光测定法，可在培养一小时后检测活细胞中的细胞内ROS。该试剂盒针对流式细胞仪应用进行了优化，其信号可以通过Ex / Em = 490/520 nm（FL1通道）进行检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒。 

活性氧（ROS）篇：包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

产品说明书

活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒 深红色荧光

	货号	22903	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 Tests	价格	2604
	Ex (nm)	658	Em (nm)	675
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测ROS的试剂盒，活性氧（ROS）是氧正常代谢的天然副产物，在细胞信号传导中起重要作用。ROS的积累会严重破坏细胞结构。氧化应激在心血管疾病，糖尿病，骨质疏松症，中风，炎性疾病，许多神经退行性疾病和癌症中的作用已得到公认。ROS测量将有助于确定氧化应激如何调节各种细胞内途径。Cell Meter 荧光细胞内总ROS活性测定试剂盒使用我们专有的ROS Brite 670探针来定量活细胞中的ROS。与ROS反应后，可渗透细胞且无荧光的ROS Brite 670表现出很强的荧光信号。ROS Brite 670探针位于细胞质中。ROS Brite 670探针的荧光信号可以通过荧光显微镜，高含量成像，荧光酶标仪或流式细胞仪进行测量。Cell Meter 荧光细胞内总ROS活性测定试剂盒提供了一种灵敏的一步荧光测定法，可在孵育1小时内检测活细胞中的细胞内ROS（尤其是超氧化物和羟基自由基）。可以使用荧光酶标仪或带有Cy5滤光片的荧光显微镜以方便的96孔或384孔板进行检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒。 

活性氧（ROS）篇：包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

产品说明书

样品实验方案

简要概述

适用于荧光酶标仪、荧光显微镜

1.在生长培养基中制备细胞
2.用测试化合物处理细胞以诱导ROS
3.添加ROS Brite 670工作溶液（100μL/孔用于96孔板或25μL/孔用于384孔板）
4.将细胞在37℃下染色30-60分钟
5.在Ex / Em = 650/675 nm（截止= 665 nm）或使用TRITC滤光片组的荧光显微镜下检测荧光（底部读取模式）

适用于流式细胞仪

1.在生长培养基中制备细胞
2.用测试化合物处理细胞以诱导ROS
3.将ROS Brite 670与细胞一起孵育30-60分钟
4.使用具有FL4通道的流式细胞仪监测荧光强度

溶液配制

1.储备溶液配制

        除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1. ROS Brite 670原液（500X）：
将40μLDMSO（组分C）加入到ROS Brite 670（组分A）的小瓶中并充分混合以制备500X ROS Brite 670储备溶液。 避光。 注意：20μL的500X ROS Brite 670原液足以容纳1个平板。对于流式细胞仪，为方便起见，可将5倍ROS Brite 670储备液稀释5倍至DMSO中。为了存放，请将管子紧紧密封。

2.工作溶液配制

        将20μL500XROS Brite 670储备溶液加入10 mL分析缓冲液（组分B）中，充分混合，制成ROS Brite 670工作溶液。 注意：此ROS Brite 670工作溶液在室温下稳定至少2小时。有关细胞样品制备的指南，请点击查看。

操作步骤

（适用于荧光酶标仪、荧光显微镜）

1.用10μL10X测试化合物（96孔板）或5μL5X测试化合物（384孔板）在所需缓冲液（如PBS或HHBS）中处理细胞。对于对照孔（未处理的细胞），加入相应量的化合物缓冲液。

2.为了诱导ROS，将细胞板在室温下或在5％CO₂,37℃培养箱中孵育一段时间（例如：用100μM叔丁基过氧化氢（TBHP）处理Hela细胞30分钟）。

3.向细胞板中加入100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的ROS Brite 670工作溶液。

4.将细胞在5％CO₂,37℃培养箱中孵育30分钟至60分钟。

5.使用荧光酶标仪（底部读取模式）在Ex / Em = 650 / 675nm（截止值= 665nm）检测荧光增加，或使用具有TRITC滤光片组的荧光显微镜观察细胞。

（适用于流式细胞仪）

1.以5×10⁵至1×10⁶个细胞/ mL的密度制备细胞。 注意：应根据个体评估每个细胞系，以确定诱导细胞凋亡的最佳细胞密度。

2.用所需缓冲液（如PBS或HHBS）处理细胞。 对于对照孔（未处理的细胞），加入相应量的化合物缓冲液。

3.为诱导ROS，将细胞板在室温或5％CO₂,37°C培养箱中孵育至少30分钟（用100μM叔丁基过氧化氢（TBHP）处理的Hela细胞30分钟）。

4.将1μL/ mL细胞的500X ROS Brite 670储备溶液或5μL/ mL细胞的100X ROS Brite 670储备溶液加入细胞培养基中。

5.将细胞在5％CO₂,37℃培养箱中孵育30至60分钟。

6.使用具有FL4通道的流式细胞仪检测荧光强度。

数据分析

参考文献

Anti-proliferation effect of blue light-emitting diodes against antibiotic-resistant Helicobacter pylori
Authors: Jianwei Ma, Takahiro Hiratsuka, Tsuyoshi Etoh, Junko Akada, Hajime Fujishima, Norio Shiraishi, Yoshio Yamaoka, Masafumi Inomata
Journal: Journal of Gastroenterology and Hepatology (2017)

Notoginsenoside R1 attenuates high glucose-induced endothelial damage in rat retinal capillary endothelial cells by modulating the intracellular redox state
Authors: Chunlan Fan, Yuan Qiao, Minke Tang
Journal: Drug Design, Development and Therapy (2017): 3343

Good hydration and cell-biological performances of superparamagnetic calcium phosphate cement with concentration-dependent osteogenesis and angiogenesis induced by ferric iron
Authors: J Zhang, HS Shi, JQ Liu, T Yu, ZH Shen, JD Ye
Journal: Journal of Materials Chemistry B (2015): 8782–8795

Topiramate Protects Pericytes from Glucotoxicity: Role for Mitochondrial CA VA in Cerebromicrovascular Disease in Diabetes
Authors: Ping Patrick, Tulin O Price, Ana L Diogo, Nader Sheibani, William A Banks, Gul N Shah
Journal: Journal of endocrinology and diabetes (2015)

Down-regulated peroxisome proliferator-activated receptor γ (PPARγ) in lung epithelial cells promotes a PPARγ agonist-reversible proinflammatory phenotype in chronic obstructive pulmonary disease (COPD)
Authors: Sowmya P Lakshmi, Aravind T Reddy, Yingze Zhang, Frank C Sciurba, Rama K Mallampalli, Steven R Duncan, Raju C Reddy
Journal: Journal of Biological Chemistry (2014): 6383–6393

Superoxide dismutase as a target of clioquinol-induced neurotoxicity
Authors: Kazuyuki Kawamura, Yukiko Kuroda, Masako Sogo, Miki Fujimoto, Toshio Inui, Takao Mitsui
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2014): 181–185

Xanthine oxidase inhibition by febuxostat attenuates experimental atherosclerosis in mice
Authors: Johji Nomura, Nathalie Busso, Annette Ives, Chieko Matsui, Syunsuke Tsujimoto, Takashi Shirakura, Mizuho Tamura, Tsunefumi Kobayashi, Alexander So, Yoshihiro Yamanaka
Journal: Scientific reports (2014): 4554

High glucose-induced mitochondrial respiration and reactive oxygen species in mouse cerebral pericytes is reversed by pharmacological inhibition of mitochondrial carbonic anhydrases: implications for cerebral microvascular disease in diabetes
Authors: Gul N Shah, Yoichi Morofuji, William A Banks, Tulin O Price
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2013): 354–358

Measure intracellular reactive oxygen species using far-red fluorescence
Authors: Hoang Ha
Journal: Unknown

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活性氧 ROS Brite 670

	货号	16002	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	1 mg	价格	2604
	Ex (nm)	651	Em (nm)	670
	分子量	758.85	溶剂	DMSO
	产品详细介绍

简要概述

ROS Brite 活性氧荧光探针670是美国AAT Bioquest生产的用于检测ROS的试剂，活性氧(ROS)是以化学方法反应的包含活性氧原子的化合物。例如：超氧化物、含有羟基自由基、单线态氧和过氧化物的衍生物。 ROS具有很高的活性，因为存在未配对的价电子层单电子。 ROS是生物氧代谢自然形成的副产物，它在细胞信号传递和体内平衡方面扮演着重要角色。然而在一些环境情况下（如紫外线照射或者高温环境下），ROS水平将大幅度增加。这可能导致细胞结构的重大伤害，日积月累,这被称为氧化应激。外部来源也生成ROS ，如电磁辐射。在氧化应激条件下，活性氧产量大幅度增加， 导致细胞膜脂、蛋白质和核酸的逐渐破坏。这些生物分子的氧化性损伤是与衰老和各种疾病紧密相关，例如动脉粥样硬化、致癌性肿瘤、缺血性贫血、神经衰退性疾病。 ROS Brite 670试剂是用以测量细胞内氧化应激水平的新型荧光分子探针，可以被常用的荧光显微镜高分辨率、微型板块荧光测量 或者流式细胞仪成像。细胞渗透性  ROS Brite 670试剂是没有荧光的，在与活性氧反应产生明亮的近红外荧光 。因此该试剂可以用常用的荧光显微镜高分辨率、微型板块荧光测量 或者流式细胞仪成像通过测量荧光信号来测量细胞内氧化应激水平。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的ROS Brite 活性氧荧光探针670。 

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活性氧（ROS）篇：包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

产品说明书

样品操作及实验分析

1）在DMSO中准备10至20 mM ROS Brite 储备溶液。 通过用20 mM Hepes缓冲液（HHBS）将DMSO储备溶液稀释到Hanks溶液中，制成5至10 µM的工作溶液。

2）根据需要处理细胞（例如，使用50-100 nM血管紧张素II处理RASM细胞3-5小时）。

3）将细胞与ROS Brite （5-10 µM，来自步骤＃1）在37ºC下孵育15 -30分钟。

注意：所使用的ROS Brite 的浓度随细胞系的不同而不同，需要测试不同的浓度才能获得最佳剂量。 对于cat＃16053，可能使用的浓度较低，例如0.5-5 uM。

4）用HHBS缓冲液代替染料加载溶液。

5）用适当的荧光仪器（例如荧光显微镜，流式细胞仪或体内成像仪器）分析细胞。

参考文献

Thiol-Mediated Synthesis of Hyaluronic Acid-Epigallocatechin-3-O-Gallate Conjugates for the Formation of Injectable Hydrogels with Free Radical Scavenging Property and Degradation Resistance
Authors: Chixuan Liu, Ki Hyun Bae, Atsushi Yamashita, Joo Eun Chung, Motoichi Kurisawa
Journal: Biomacromolecules (2017)

Transient receptor potential melastatin 8 ion channel in macrophages modulates colitis through a balance-shift in TNF-alpha and interleukin-10 production
Authors: M Khalil, A Babes, R Lakra, S Försch, PW Reeh, S Wirtz, C Becker, MF Neurath, MA Engel
Journal: Mucosal immunology (2016)

VEGFR2 signaling prevents colorectal cancer cell senescence to promote tumorigenesis in mice with colitis
Authors: Sebastian Foersch, Tobias Sperka, Christina Lindner, Astrid Taut, Karl L Rudolph, Georg Breier, Frank Boxberger, Tilman T Rau, Arndt Hartmann, Michael Stürzl
Journal: Gastroenterology (2015): 177–189

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