Amplite 比色法丙二醇(MDA)定量试剂盒 货号10070-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Amplite 比色法丙二醇(MDA)定量试剂盒

Amplite 比色法丙二醇(MDA)定量试剂盒

Amplite 比色法丙二醇(MDA)定量试剂盒    货号10070 货号 10070 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 4584
Ex (nm) 695 Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 比色法丙二醇(MDA)定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的荧光染料。丙二醛(MDA)是脂质过氧化的天然副产物,被广泛用作确定氧化应激和自由基形成的关键指标。 历史上,MDA的测量依赖于与硫代巴比妥酸(TBA)的反应,得到可以在532nm下比色测量或在Ex / Em = 530nm / 550nm下荧光测定的化合物。 但该测定不是MDA特异性的,也是在90-100℃的酸性条件下进行的。 已经有许多商业ELISA试剂盒,这使得它更加昂贵和繁琐。 Amplite 比色丙二醛(MDA)定量试剂盒提供了最快速,最方便的MDA测量方法,无需TBARS加热步骤。 MDA Blue 与MDA反应生成蓝色产物,用吸光度酶标仪在695nm处测量。 该测定法对MDA非常快速且特异,几乎不受其他醛的干扰。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 比色法丙二醇(MDA)定量试剂盒。 

 

适用仪器


光吸收酶标仪  
吸收: 695nm
推荐孔板: 透明底板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备测试样品和连续稀释的MDA标准品(50μL)
2.添加MDA Blue 原液(10μL)
3.在室温下孵育10-30分钟
4.加入反应溶液(40μL)
5.监测OD增加至695nm

 

溶液制备

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1. MDA标准溶液(100 mM):
将100μLDdH2O加入MDA标准小瓶(组分C)中以制备100mM MDA储备溶液。

 

2.标准溶液

2.1MDA标准
将4μL100mMMDA标准品加入996μL稀释缓冲液(组分B)中,得到400μMMDA溶液(MDA7)。 然后在稀释缓冲液中进行1:2连续稀释,得到连续稀释的MDA标准品(MDA6-MDA1)。

  

样品分析

表1. 96孔透明底微孔板中MDA标准品和测试样品的布局。 MDA = MDA标准品(MDA1-MDA7,6.25至400μM),BL =空白对照,TS =测试样品。

BL BL TS TS
MDA1 MDA1
MDA2 MDA2
MDA3 MDA3    
MDA4 MDA4    
MDA5 MDA5    
MDA6 MDA6    
MDA7 MDA7    

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
MDA1-MDA7 50ul 连续稀释(6.25至400μM)
BL 50ul 稀释缓冲液(组分B)
TS 50ul 测试样品

1.根据表1和2中提供的布局制备MDA标准品(MDA),空白对照品(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25μL试剂代替50μL。

2.将10μLMDABlue (组分A)溶液加入MDA标准品,空白对照和测试样品的每个孔中。 对于384孔板,每孔使用5μLMDABlue 溶液。

3.将反应混合物在室温下孵育10-30分钟。

4.加入40μL反应溶液(组分D),使总测定体积为100μL/孔。 对于384孔板,使用20μL反应溶液,总测定体积为50μL/孔。

5.将最终反应混合物在室温下孵育30-60分钟。

6.用吸光度板读数器监测吸光度增加,在OD为695~700nm时进行路径校正校正。

 

参考文献

Assessment of lipid peroxidation by measuring malondialdehyde (MDA) and relatives in biological samples: Analytical and biological challenges.
Authors: Tsikas D.
Journal: Anal Biochem (2016)

Development, validation and biomedical applications of stable-isotope dilution GC-MS and GC-MS/MS techniques for circulating malondialdehyde (MDA) after pentafluorobenzyl bromide derivatization: MDA as a biomarker of oxidative stress and its relation to 15(S)-8-iso-prostaglandin F2alpha and nitric oxide (NO)
Authors: Tsikas D, Rothmann S, Schneider JY, Suchy MT, Trettin A, Modun D, Stuke N, Maassen N, Frolich JC.
Journal: J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci (2016): 95

Formation of Malondialdehyde, 4-Hydroxynonenal, and 4-Hydroxyhexenal during in Vitro Digestion of Cooked Beef, Pork, Chicken, and Salmon
Authors: Steppeler C, Haugen JE, Rodbotten R, Kirkhus B.
Journal: J Agric Food Chem (2016): 487

Plasma malondialdehyde as biomarker of lipid peroxidation: effects of acute exercise
Authors: Spirlandeli AL, Deminice R, Jordao AA.
Journal: Int J Sports Med (2014): 14

A specific, accurate, and sensitive measure of total plasma malondialdehyde by HPLC
Authors: Moselhy HF, Reid RG, Yousef S, Boyle SP.
Journal: J Lipid Res (2013): 852

Antioxidant properties of Krebs cycle intermediates against malonate pro-oxidant activity in vitro: a comparative study using the colorimetric method and HPLC analysis to determine malondialdehyde in rat brain homogenates
Authors: Puntel RL, Roos DH, Grotto D, Garcia SC, Nogueira CW, Rocha JB.
Journal: Life Sci (2007): 51

Malondialdehyde as biomarker of oxidative damage to lipids caused by smoking
Authors: Lykkesfeldt J.
Journal: Clin Chim Acta (2007): 50

Rapid quantification of malondialdehyde in plasma by high performance liquid chromatography-visible detection
Authors: Grotto D, Santa Maria LD, Boeira S, Valentini J, Charao MF, Moro AM, Nascimento PC, Pomblum VJ, Garcia SC.
Journal: J Pharm Biomed Anal (2007): 619

[Glaucoma and oxidative stress. Determination of malondialdehyde–a product of lipid peroxidation]
Authors: Faschinger C, Schmut O, Wachswender C, Mossbock G.
Journal: Ophthalmologe (2006): 953

Salivary thiobarbituric acid reacting substances and malondialdehyde–their relationship to reported smoking and to parodontal status described by the papillary bleeding index
Authors: Celec P, Hodosy J, Celecova V, Vodrazka J, Cervenka T, Halcak L, Bozek P, Kopani M, Kudela M.
Journal: Dis Markers (2005): 133

 

相关产品

产品名称 货号
Amplite 荧光法法丙二醇(MDA)定量试剂盒 Cat#10071
Amplite 乙醇定量试剂盒 Cat#40001
Amplite 胆固醇定量试剂盒 Cat#40006

说明书
Amplite 比色法丙二醇(MDA)定量试剂盒.pdf

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Amplite 荧光法法丙二醇(MDA)定量试剂盒

Amplite 荧光法法丙二醇(MDA)定量试剂盒

Amplite 荧光法法丙二醇(MDA)定量试剂盒    货号10071 货号 10071 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 4584
Ex (nm) 365 Em (nm) 435
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 荧光法法丙二醇(MDA)定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的荧光染料。丙二醛(MDA)和4-羟基壬烯醛(4-HNE)是脂质过氧化的天然副产物。 作为脂质过氧化最受欢迎和最可靠的生物标志物,MDA已被广泛用于确定临床情况下的氧化应激多年。 因此,MDA的量化对于评估病理生理过程中的氧化应激是必不可少的。 Amplite 荧光丙二醛(MDA)定量试剂盒提供了一种快速方便的方法来测量MDA,无需加热步骤,而这些步骤是其他供应商提供的商业MDA检测试剂盒所必需的。 Monoaldelite Blue本身几乎不发荧光,但在与MDA反应时会产生强烈的蓝色荧光。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 荧光法法丙二醇(MDA)定量试剂盒。 

 

适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 365nm
发射: 435nm
cutoff: 420nm
推荐孔板: 黑色底板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备并添加MDA标准品或测试样品(50μL)
2.准备并添加MDA工作溶液(50μL)
3.在室温下孵育10至30分钟
4.加入反应溶液(25μL)
5.在室温下孵育30至60分钟
6.监测Ex / Em = 365 / 435nm处的荧光强度

 

溶液制备

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1 MDA标准溶液(100 mM):
将100μLddH2 O加入到MDA标准品(组分C)的小瓶中以制备100mM MDA标准溶液。

1.2 Monoaldelite Blue原液(250X):
将20μLDMSO(组分E)加入一小瓶Monoaldelite Blue(组分A)中以制备Monoaldelite Blue原液。 注意:这种Monoaldelite Blue原液足以容纳一个96孔板。 它不稳定,请及时使用。

 

2.标准溶液

2.1MDA标准
将10μL的100mM MDA标准溶液加入990μL的测定缓冲液(组分B)中以产生1000μM的MDA标准溶液(MDA7)。 取1000μMMDA标准溶液(MDA7)并进行1:3连续稀释,得到连续稀释的MDA标准品(MDA6-MDA1)和分析缓冲液(组分B)。

 

3.工作溶液

Monoaldelite 蓝色:
将20μL250XMonoaldelite Blue储备溶液加入5 mL分析缓冲液(组分B)中并充分混合。

 

样品分析

表1.实心黑色96孔微孔板中MDA标准品和测试样品的布局。 MDA = MDA标准品(MDA1-MDA7,1.37至1000μM),BL =空白对照,TS =测试样品。

BL BL TS TS
MDA1 MDA1
MDA2 MDA2
MDA3 MDA3    
MDA4 MDA4    
MDA5 MDA5    
MDA6 MDA6    
MDA7 MDA7    

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
MDA1-MDA7 50ul 连续稀释液(1.37至1000μM)
BL 50ul 分析缓冲液(组分B)
TS 50ul 测试样本

1.根据表1和2中提供的布局添加MDA标准品(MDA),空白对照(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25μL试剂代替50μL。

2.向MDA标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入50μLMDA工作溶液,使总测定体积为100μL/孔。 对于384孔板,在每个孔中加入25μLMDA工作溶液,总体积为50μL/孔。

3.在室温下孵育反应10-30分钟。

4.向每个孔中加入25μL反应溶液(组分D),使总测定体积为125μL/孔。 对于384孔板,在每个孔中加入12.5μL反应溶液(组分D),总体积为62.5μL/孔。

5.在室温下孵育反应30-60分钟。

6.用Ex / Em = 365 / 435nm(截止= 420nm)的荧光板读数器监测荧光增加。

 

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产品名称 货号
Amplite 比色法丙二醇(MDA)定量试剂盒 Cat#10070
Amplite 乙醇定量试剂盒 Cat#40001
Amplite 胆固醇定量试剂盒 Cat#40006

说明书
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Amplite 荧光法法丙二醇(MDA)定量试剂盒 货号10071-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Amplite 荧光法法丙二醇(MDA)定量试剂盒

Amplite 荧光法法丙二醇(MDA)定量试剂盒

Amplite 荧光法法丙二醇(MDA)定量试剂盒    货号10071 货号 10071 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 4584
Ex (nm) 365 Em (nm) 435
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 荧光法法丙二醇(MDA)定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的荧光染料。丙二醛(MDA)和4-羟基壬烯醛(4-HNE)是脂质过氧化的天然副产物。 作为脂质过氧化最受欢迎和最可靠的生物标志物,MDA已被广泛用于确定临床情况下的氧化应激多年。 因此,MDA的量化对于评估病理生理过程中的氧化应激是必不可少的。 Amplite 荧光丙二醛(MDA)定量试剂盒提供了一种快速方便的方法来测量MDA,无需加热步骤,而这些步骤是其他供应商提供的商业MDA检测试剂盒所必需的。 Monoaldelite Blue本身几乎不发荧光,但在与MDA反应时会产生强烈的蓝色荧光。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 荧光法法丙二醇(MDA)定量试剂盒。 

 

适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 365nm
发射: 435nm
cutoff: 420nm
推荐孔板: 黑色底板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备并添加MDA标准品或测试样品(50μL)
2.准备并添加MDA工作溶液(50μL)
3.在室温下孵育10至30分钟
4.加入反应溶液(25μL)
5.在室温下孵育30至60分钟
6.监测Ex / Em = 365 / 435nm处的荧光强度

 

溶液制备

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1 MDA标准溶液(100 mM):
将100μLddH2 O加入到MDA标准品(组分C)的小瓶中以制备100mM MDA标准溶液。

1.2 Monoaldelite Blue原液(250X):
将20μLDMSO(组分E)加入一小瓶Monoaldelite Blue(组分A)中以制备Monoaldelite Blue原液。 注意:这种Monoaldelite Blue原液足以容纳一个96孔板。 它不稳定,请及时使用。

 

2.标准溶液

2.1MDA标准
将10μL的100mM MDA标准溶液加入990μL的测定缓冲液(组分B)中以产生1000μM的MDA标准溶液(MDA7)。 取1000μMMDA标准溶液(MDA7)并进行1:3连续稀释,得到连续稀释的MDA标准品(MDA6-MDA1)和分析缓冲液(组分B)。

 

3.工作溶液

Monoaldelite 蓝色:
将20μL250XMonoaldelite Blue储备溶液加入5 mL分析缓冲液(组分B)中并充分混合。

 

样品分析

表1.实心黑色96孔微孔板中MDA标准品和测试样品的布局。 MDA = MDA标准品(MDA1-MDA7,1.37至1000μM),BL =空白对照,TS =测试样品。

BL BL TS TS
MDA1 MDA1
MDA2 MDA2
MDA3 MDA3    
MDA4 MDA4    
MDA5 MDA5    
MDA6 MDA6    
MDA7 MDA7    

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
MDA1-MDA7 50ul 连续稀释液(1.37至1000μM)
BL 50ul 分析缓冲液(组分B)
TS 50ul 测试样本

1.根据表1和2中提供的布局添加MDA标准品(MDA),空白对照(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25μL试剂代替50μL。

2.向MDA标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入50μLMDA工作溶液,使总测定体积为100μL/孔。 对于384孔板,在每个孔中加入25μLMDA工作溶液,总体积为50μL/孔。

3.在室温下孵育反应10-30分钟。

4.向每个孔中加入25μL反应溶液(组分D),使总测定体积为125μL/孔。 对于384孔板,在每个孔中加入12.5μL反应溶液(组分D),总体积为62.5μL/孔。

5.在室温下孵育反应30-60分钟。

6.用Ex / Em = 365 / 435nm(截止= 420nm)的荧光板读数器监测荧光增加。

 

相关产品

产品名称 货号
Amplite 比色法丙二醇(MDA)定量试剂盒 Cat#10070
Amplite 乙醇定量试剂盒 Cat#40001
Amplite 胆固醇定量试剂盒 Cat#40006

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Amplite 比色法丙二醇(MDA)定量试剂盒 货号10070-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Amplite 比色法丙二醇(MDA)定量试剂盒

Amplite 比色法丙二醇(MDA)定量试剂盒

Amplite 比色法丙二醇(MDA)定量试剂盒    货号10070 货号 10070 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 4584
Ex (nm) 695 Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 比色法丙二醇(MDA)定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的荧光染料。丙二醛(MDA)是脂质过氧化的天然副产物,被广泛用作确定氧化应激和自由基形成的关键指标。 历史上,MDA的测量依赖于与硫代巴比妥酸(TBA)的反应,得到可以在532nm下比色测量或在Ex / Em = 530nm / 550nm下荧光测定的化合物。 但该测定不是MDA特异性的,也是在90-100℃的酸性条件下进行的。 已经有许多商业ELISA试剂盒,这使得它更加昂贵和繁琐。 Amplite 比色丙二醛(MDA)定量试剂盒提供了最快速,最方便的MDA测量方法,无需TBARS加热步骤。 MDA Blue 与MDA反应生成蓝色产物,用吸光度酶标仪在695nm处测量。 该测定法对MDA非常快速且特异,几乎不受其他醛的干扰。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 比色法丙二醇(MDA)定量试剂盒。 

 

适用仪器


光吸收酶标仪  
吸收: 695nm
推荐孔板: 透明底板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备测试样品和连续稀释的MDA标准品(50μL)
2.添加MDA Blue 原液(10μL)
3.在室温下孵育10-30分钟
4.加入反应溶液(40μL)
5.监测OD增加至695nm

 

溶液制备

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1. MDA标准溶液(100 mM):
将100μLDdH2O加入MDA标准小瓶(组分C)中以制备100mM MDA储备溶液。

 

2.标准溶液

2.1MDA标准
将4μL100mMMDA标准品加入996μL稀释缓冲液(组分B)中,得到400μMMDA溶液(MDA7)。 然后在稀释缓冲液中进行1:2连续稀释,得到连续稀释的MDA标准品(MDA6-MDA1)。

  

样品分析

表1. 96孔透明底微孔板中MDA标准品和测试样品的布局。 MDA = MDA标准品(MDA1-MDA7,6.25至400μM),BL =空白对照,TS =测试样品。

BL BL TS TS
MDA1 MDA1
MDA2 MDA2
MDA3 MDA3    
MDA4 MDA4    
MDA5 MDA5    
MDA6 MDA6    
MDA7 MDA7    

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
MDA1-MDA7 50ul 连续稀释(6.25至400μM)
BL 50ul 稀释缓冲液(组分B)
TS 50ul 测试样品

1.根据表1和2中提供的布局制备MDA标准品(MDA),空白对照品(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25μL试剂代替50μL。

2.将10μLMDABlue (组分A)溶液加入MDA标准品,空白对照和测试样品的每个孔中。 对于384孔板,每孔使用5μLMDABlue 溶液。

3.将反应混合物在室温下孵育10-30分钟。

4.加入40μL反应溶液(组分D),使总测定体积为100μL/孔。 对于384孔板,使用20μL反应溶液,总测定体积为50μL/孔。

5.将最终反应混合物在室温下孵育30-60分钟。

6.用吸光度板读数器监测吸光度增加,在OD为695~700nm时进行路径校正校正。

 

参考文献

Assessment of lipid peroxidation by measuring malondialdehyde (MDA) and relatives in biological samples: Analytical and biological challenges.
Authors: Tsikas D.
Journal: Anal Biochem (2016)

Development, validation and biomedical applications of stable-isotope dilution GC-MS and GC-MS/MS techniques for circulating malondialdehyde (MDA) after pentafluorobenzyl bromide derivatization: MDA as a biomarker of oxidative stress and its relation to 15(S)-8-iso-prostaglandin F2alpha and nitric oxide (NO)
Authors: Tsikas D, Rothmann S, Schneider JY, Suchy MT, Trettin A, Modun D, Stuke N, Maassen N, Frolich JC.
Journal: J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci (2016): 95

Formation of Malondialdehyde, 4-Hydroxynonenal, and 4-Hydroxyhexenal during in Vitro Digestion of Cooked Beef, Pork, Chicken, and Salmon
Authors: Steppeler C, Haugen JE, Rodbotten R, Kirkhus B.
Journal: J Agric Food Chem (2016): 487

Plasma malondialdehyde as biomarker of lipid peroxidation: effects of acute exercise
Authors: Spirlandeli AL, Deminice R, Jordao AA.
Journal: Int J Sports Med (2014): 14

A specific, accurate, and sensitive measure of total plasma malondialdehyde by HPLC
Authors: Moselhy HF, Reid RG, Yousef S, Boyle SP.
Journal: J Lipid Res (2013): 852

Antioxidant properties of Krebs cycle intermediates against malonate pro-oxidant activity in vitro: a comparative study using the colorimetric method and HPLC analysis to determine malondialdehyde in rat brain homogenates
Authors: Puntel RL, Roos DH, Grotto D, Garcia SC, Nogueira CW, Rocha JB.
Journal: Life Sci (2007): 51

Malondialdehyde as biomarker of oxidative damage to lipids caused by smoking
Authors: Lykkesfeldt J.
Journal: Clin Chim Acta (2007): 50

Rapid quantification of malondialdehyde in plasma by high performance liquid chromatography-visible detection
Authors: Grotto D, Santa Maria LD, Boeira S, Valentini J, Charao MF, Moro AM, Nascimento PC, Pomblum VJ, Garcia SC.
Journal: J Pharm Biomed Anal (2007): 619

[Glaucoma and oxidative stress. Determination of malondialdehyde–a product of lipid peroxidation]
Authors: Faschinger C, Schmut O, Wachswender C, Mossbock G.
Journal: Ophthalmologe (2006): 953

Salivary thiobarbituric acid reacting substances and malondialdehyde–their relationship to reported smoking and to parodontal status described by the papillary bleeding index
Authors: Celec P, Hodosy J, Celecova V, Vodrazka J, Cervenka T, Halcak L, Bozek P, Kopani M, Kudela M.
Journal: Dis Markers (2005): 133

 

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Amplite 荧光法法丙二醇(MDA)定量试剂盒 Cat#10071
Amplite 乙醇定量试剂盒 Cat#40001
Amplite 胆固醇定量试剂盒 Cat#40006

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Cell Meter 比色法细胞内脂质氧化损伤(MDA)检测试剂盒 货号15991-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Meter 比色法细胞内脂质氧化损伤(MDA)检测试剂盒

Cell Meter 比色法细胞内脂质氧化损伤(MDA)检测试剂盒

Cell Meter 比色法细胞内脂质氧化损伤(MDA)检测试剂盒    货号15991 货号 15991 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 tests 价格 5244
Ex (nm) 695 Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter 比色法细胞内脂质氧化损伤(MDA)检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测MDA的试剂盒,脂质过氧化物的特征在于不饱和脂肪酸,磷脂,糖脂,胆固醇酯和胆固醇的氧化降解。丙二醛(MDA)是脂质过氧化最常用的生物标志物之一。 MDA的测量历史上依赖于与硫代巴比妥酸(TBA)的反应以产生可以在532nm处比色测量的产物或在Ex / Em = 530550nm处以荧光法测量的产物。但是,TBA分析具有相当多的限制。(1)该反应对MDA没有特异性。(2)TBA-MDA反应需要在酸性条件下进行。(3)测定需要在高温下进行,一般在90-100ºC。由于这些限制,商业的基于TBA的MDA测定非常繁琐。这种Cell Meter 比色脂质过氧化(MDA)定量试剂盒提供了最快速,最方便的方法来测量MDA而不需要TBARS加热步骤。 MDA Blue 与MDA反应产生蓝色产物,用吸光度酶标仪在695 nm测量。该测定非常快速并且对MDA具有特异性,而与其他醛的干扰很小。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter 比色法细胞内脂质氧化损伤(MDA)检测试剂盒。 

 

适用仪器


光吸收酶标仪  
吸收: 695nm
推荐孔板: 透明底板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备并添加MDA标准和/或测试样品(50 µL)
2.准备并添加MDA Blue (10 µL)
3.在室温下孵育10-30分钟
4.加入反应溶液(40 µL)
5.监测OD在695 nm处的增加

 

溶液配制

1.储存溶液配制

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。避免重复冻融循环。
MDA标准储备液(100 mM):
将100 µL ddH2O加入MDA标准品(组分C)中,并充分混合。 注意:未使用的MDA储备溶液应以-20℃的形式等次储存。

 

2.标准溶液配制

MDA标准
将4μLMDA标准溶液(100 mM)添加到996μL稀释缓冲液(组分B)中以获得MDA标准溶液(400μM)。

 

样品操作及实验分析

表1.在透明的底部96孔微孔板中MDA标准品和测试样品的布局。 MDA = MDA标准(MDA1-MDA7); BL =空白对照; TS =测试样品。

BL BL TS TS
MDA1 MDA1
MDA2 MDA2
MDA3 MDA3    
MDA4 MDA4    
MDA5 MDA5    
MDA6 MDA6    
MDA7 MDA7    

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
MDA1-MDA7 50ul 连续稀释
BL 50ul 稀释缓冲液(组分B)
TS 50ul 测试样品

MDA测定

1.加入50 µL MDA标准品,空白对照和测试样品以清除底部96孔微孔板(如表1和表2所示)。

2.将10 µL /孔的MDA Blue (组分A)添加到MDA标准品,空白对照和测试样品的每个孔中。 注意:对于384孔板,将25 µL样品,5 µL MDA Blue 溶液添加到每个孔中。 注意:请分装成一次性使用的组分A,并在-20ºC下闲置存放,并避免光照。

3.避光保存,室温下孵育反应10-30分钟。

4.加入40 µL反应溶液(组分D)使总测定体积为100 µL /孔。 注意:对于384孔板,请添加20 µL反应溶液(组分D),使总测定体积为50 µL /孔。

5.使用吸光度板读数器监控吸光度,并在695〜700 nm的OD处进行路径检查校正。

 

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说明书
Cell Meter 比色法细胞内脂质氧化损伤(MDA)检测试剂盒.pdf