胱天蛋白酶Caspase抑制剂Z-LETD-FMK 货号13307-AAT Bioquest荧光染料

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胱天蛋白酶Caspase抑制剂Z-LETD-FMK

胱天蛋白酶Caspase抑制剂Z-LETD-FMK

胱天蛋白酶Caspase抑制剂Z-LETD-FMK    货号13307 货号 13307 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 1200
Ex (nm) Em (nm)
分子量 654.69 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

Z-LETD-FMK是一种细胞渗透性不可逆的caspase蛋白酶8抑制剂,与caspase-8的催化位点结合,在诱导凋亡中起重要作用。Z-LETD-FMK与caspase-8的结合抑制了该蛋白酶的活性,使其能够抑制与caspase-8激活相关的凋亡事件。为了抑制细胞凋亡,应在诱导细胞凋亡的同时添加Z-LETD-FMK。FMK衍生的肽可作为有效的不可逆抑制剂,而不会增加细胞毒性作用。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Z-LETD-FMK。 

产品说明书

样品实验方案

以下是我们推荐的方案,仅提供指导。具体实验应根据您的特定需求进行修改。

 

溶液配制

储备溶液配制

Z-LETD-FMK储备溶液配制:在Z-LETD-FMK中添加适量的DMSO,制成2-5 mM Z-LETD-FMK储备液。注意:将未使用的Z-LETD-FMK储备溶液分装在-20°C下。

 

操作步骤

  1. 根据需要处理样品以诱导凋亡。
  2. 添加Z-LETD-FMK。
    注意:我们建议使用最终浓度为10-100 µM的Z-LETD-FMK抑制胱天蛋白酶,例如对caspase-8抑制50 µM。
    注意:孵育的最佳时间和浓度需要通过实验确定。
  3. 根据需要对样品染色。
  4. 用适当的仪器检测荧光强度。 

 

图示

 

 

胱天蛋白酶Caspase抑制剂Z-LETD-FMK    货号13307

图1.用caspase 8抑制剂Z-LETD-FMK(Cat#13307)抑制Jurkat细胞中caspase 8活性。当天,将Jurkat细胞以200,000个细胞/ 90 µL /孔的密度接种在Costar黑色96孔板中。用1 µM星形孢菌素处理细胞5小时。加入Z-LETD-FMK并与星形孢菌素共孵育。用Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒(Cat#22816)检测caspase-8活性。用Flexstation 3荧光酶标仪(Molecular Devices)在Ex / Em = 540 / 620nm(截止= 610nm)下测量荧光强度。

 

 

参考文献

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Authors: Wang, Yan-Dong and Su, Yong-Jing and Li, Jian-Ying and Yao, Xiang-Chao and Liang, Guang-Jiang
Journal: International journal of clinical and experimental medicine (2015): 10723-30

A polysaccharide from Sanguisorbae radix induces caspase-dependent apoptosis in human leukemia HL-60 cells.
Authors: Wu, Zhigang and Sun, Honghui and Li, Jingzhong and Ma, Chijiao and Zhao, Siqiao and Guo, Zheng and Lin, Yao and Lin, Yaping and Liu, Li
Journal: International journal of biological macromolecules (2014): 615-20

Use of fluorochrome-labeled inhibitors of caspases to detect neuronal apoptosis in the whole-mounted lamprey brain after spinal cord injury.
Authors: Barreiro-Iglesias, Antón and Shifman, Michael I
Journal: Enzyme research (2012): 835731

Caspase-8 and p38MAPK in DATS-induced apoptosis of human CNE2 cells.
Authors: Ji, C and Ren, F and Xu, M
Journal: Brazilian journal of medical and biological research = Revista brasileira de pesquisas medicas e biologicas (2010): 821-7

[Synergistic effects and mechanisms of combined tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand and chemotherapeutic drugs or radiotherapy in killing laryngeal squamous carcinoma cells in vitro].
Authors: Zhang, Ming and Zhou, Liang
Journal: Zhonghua er bi yan hou tou jing wai ke za zhi = Chinese journal of otorhinolaryngology head and neck surgery (2009): 565-70

Emodin azide methyl anthraquinone derivative triggers mitochondrial-dependent cell apoptosis involving in caspase-8-mediated Bid cleavage.
Authors: Yan, Yanyan and Su, Xiaodong and Liang, Yongju and Zhang, Jianye and Shi, Chengjun and Lu, Yu and Gu, Lianquan and Fu, Liwu
Journal: Molecular cancer therapeutics (2008): 1688-97

Caspase-9 takes part in programmed cell death in developing mouse kidney.
Authors: Araki, Takashi and Hayashi, Matsuhiko and Nakanishi, Keiko and Morishima, Nobuhiro and Saruta, Takao
Journal: Nephron. Experimental nephrology (2003): e117-24

Induction of apoptosis in human leukemia cells by the CDK1 inhibitor CGP74514A.
Authors: Dai, Yun and Dent, Paul and Grant, Steven
Journal: Cell cycle (Georgetown, Tex.): 143-52

说明书
胱天蛋白酶Caspase抑制剂Z-LETD-FMK.pdf

荧光底物FAM-LETD-FMK 货号13416-AAT Bioquest荧光染料

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荧光底物FAM-LETD-FMK

荧光底物FAM-LETD-FMK

荧光底物FAM-LETD-FMK    货号13416 货号 13416 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 ug 价格 3264
Ex (nm) 493 Em (nm) 517
分子量 850.81 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

荧光底物FAM-LETD-FMK是美国AAT Bioquest生产的荧光底物,caspase 的激活在细胞凋亡中起着核心作用。 FAM-LETD-FMK 为灵敏检测活细胞中活化的 caspase-8 提供了一种方便的方法。 它是细胞可渗透的、无毒的,并且不可逆地与凋亡细胞中激活的 caspase-8 结合。 FAM 标签允许通过荧光显微镜、流式细胞术或荧光读板器直接检测凋亡细胞中活化的半胱天冬酶。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的荧光底物FAM-LETD-FMK。

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产品说明书

样品实验方案

以下说明书仅提供指南,实际应根据您的具体需求进行修改。

1.使用AMC,AFC,pNA,R110和ProRed底物的一般溶液Caspase测定

1.1在DMSO中制备10mM储备溶液。

1.2制备2X半胱天冬酶底物(50μM)测定溶液,如下所示:

50 L基质原液

100L DTT(1M)

400L EDTA(100 mM)

10mL Tris缓冲液(20mM),pH = 7.4

1.3将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤1.2)混合,并在室温下孵育溶液至少1小时。

1.4使用荧光酶标仪检测荧光,或使用吸光度酶标仪检测吸光度。

 

2.细胞Caspase检测使用细胞渗透FMK半胱天冬酶探针

2.1在DMSO中制备2-5mM储备溶液。

2.2根据需要对细胞进行处理。

2.3通过用20mM Hepes缓冲液(HHBS)稀释Hanks中的DMSO储备溶液(来自步骤2.1),制备2X可渗透的半胱天冬酶底物(20μM)测定溶液。

2.4用2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤2.3)混合等体积的处理细胞,并将细胞在37℃,5%CO 2培养箱中孵育至少1小时。

2.5用HHBS洗涤细胞至少一次。

2.6用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

3.细胞Caspase检测使用细胞渗透性FMK Caspase探针(仅适用于#13470-13476)

3.1通过向小瓶中加入50μLDMSO制备250X储备溶液。

3.2根据需要对细胞进行处理。

3.3将250 X DMSO储备溶液(来自步骤3.1)以1:250的比例(例如2 uL至500 uL细胞)添加到细胞溶液中,并将细胞在37°C,5%CO 2培养箱中孵育1 小时。

3.4用HHBS洗涤细胞至少一次。

3.5用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

参考文献

Activation of caspase-like activity and poly (ADP-ribose) polymerase degradation during sporulation in Aspergillus nidulans
Authors: Thrane C, Kaufmann U, Stummann BM, Olsson S.
Journal: Fungal Genet Biol (2004): 361

[Antitumor mechanism of 3-bromopropionylamino benzoylurea on leukemia and lymphoma]
Authors: Li JN, Song DQ, Jiang JD.
Journal: Yao Xue Xue Bao (2004): 491

Caspase-dependent and independent cell death in rat hepatoma 5123tc cells
Authors: Pandey S, Smith B, Walker PR, Sikorska M.
Journal: Apoptosis (2000): 265

C-myc antisense oligodeoxynucleotides can induce apoptosis and down-regulate Fas expression in rheumatoid synoviocytes
Authors: Hashiramoto A, Sano H, Maekawa T, Kawahito Y, Kimura S, Kusaka Y, Wilder RL, Kato H, Kondo M, Nakajima H.
Journal: Arthritis Rheum (1999): 954

说明书
荧光底物FAM-LETD-FMK.pdf