荧光信号增强液 FluoroQuest

	货号	20006	存储条件	在零下15度以下保存
	规格	5 mL	价格	1272
	Ex (nm)		Em (nm)
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

荧光信号增强液 FluoroQuest 是美国AAT Bioquest生产的荧光信号增强液，当蛋白质与荧光有机染料偶联时，染料分子的荧光发射通常会降低，有时会降低50-70％。这种猝灭现象已经有数十年的历史了，但是，目前尚没有简单，实用的方法来控制与蛋白质结合的染料的荧光，特别是对于与免疫球蛋白结合的染料的荧光。我们提供此FluoroQuest 荧光信号增强解决方案，该解决方案在细胞成像和流量分析中可将荧光强度提高至2.5倍。这种实验方案提供了一种有效的方法来提高检测免疫学，组织化学和细胞生物学中使用的荧光有机标记的灵敏度。

产品说明书

样品实验方案

1.将细胞接种在滑动室或无菌玻璃盖玻片上，并根据需要处理细胞
2.进行甲醛固定。在室温下用PBS中的3.0–4.0％甲醛孵育细胞10–30分钟。
3.用PBS清洗固定的细胞2–3次。
可选：将PBS中的0.1％Triton X-100加入固定细胞中3至5分钟以增加通透性。用PBS冲洗细胞2-3次。
4.用封闭剂（例如在PBS中的5％BSA）封闭30分钟。
5.按照特定产品的数据表中的建议，在稀释缓冲液中稀释一抗。覆盖足够的稀释抗体以覆盖盖玻片上的细胞或腔室玻片的每个腔室。
6.用PBS清洗2-3次。
7.使用前，在室温下加热FluoroQuest™荧光信号增强溶液。
8.稀释荧光第二抗体在FluoroQuest™荧光信号在室温下增强溶液中，然后染色细胞1小时。对于大多数应用，IgG偶联物的二抗一般范围在0.1-10 µg / mL之间。保持盖玻片覆盖或在潮湿的室内避免蒸发。
9.用PBS洗涤细胞3次。
注意：在此步骤可以用荧光核染色剂或鬼笔环肽进行其他染色。
10.将每个盖玻片倒入带有安装介质的清洁幻灯片上，最好是带有抗褪色防腐剂的幻灯片。如果需要，用透明的抛光剂密封边缘。
11.在显微镜下用正确的滤光片对细胞成像。将幻灯片存放在4°C的黑暗处。

参考文献

On the mechanism of Trolox as antiblinking and antibleaching reagent
Authors: Cordes T, Vogelsang J, Tinnefeld P.
Journal: J Am Chem Soc (2009): 5018

Relationship between DAPI-fluorescence fading and nuclear DNA content: An alternative method to DNA quantification
Authors: Gallardo-Escarate C, Alvarez-Borrego J, Von Brand E, Dupre E, Del Rio-Portilla MA.
Journal: Biol Res (2007): 29

Strategies to improve photostabilities in ultrasensitive fluorescence spectroscopy
Authors: Widengren J, Chmyrov A, Eggeling C, Lofdahl PA, Seidel CA.
Journal: J Phys Chem A (2007): 429

The reliability of long-term storage of direct immunofluorescent staining slides at room temperature
Authors: Dikicioglu E, Meteoglu I, Okyay P, Culhaci N, Kacar F.
Journal: J Cutan Pathol (2003): 430

Comparative genomic hybridization technique
Authors: El-Rifai WE, Knuutila S.
Journal: Methods Mol Med (2001): 25

Antifading agents for confocal fluorescence microscopy
Authors: Berrios M, Conlon KA, Colflesh DE.
Journal: Methods Enzymol (1999): 55

Comparison of fixation protocols for adherent cultured cells applied to a GFP fusion protein of the epidermal growth factor receptor
Authors: Brock R, Hamelers IH, Jovin TM.
Journal: Cytometry (1999): 353

Fast-in situ hybridization and immunoenzymatic color pigment detection of mouse bone marrow micronucleus
Authors: Kolanko CJ, Pyle MD, Loats H, Parton J, Blakely WF, Nath J.
Journal: Biotech Histochem (1999): 111

Evaluation of five green fluorescence-emitting streptavidin-conjugated fluorochromes for use in immunofluorescence microscopy
Authors: Benchaib M, Delorme R, Pluvinage M, Bryon PA, Souchier C.
Journal: Histochem Cell Biol (1996): 253

Immunofluorescent artifacts due to the pH of antifading mounting media
Authors: Swartz DJ, Santi PA.
Journal: Biotechniques (1996): 398

FluoroQuest抗淬灭试剂盒II 适合微孔板成像

	货号	20003	存储条件	在2-8度冷藏保存, 避免光照
	规格	1 kit	价格	1272
	Ex (nm)		Em (nm)
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

FluoroQuest 抗淬灭试剂盒II 适合微孔板成像 是美国AAT Bioquest生产的抗淬灭试剂盒，当暴露于激发光下时，染料的荧光强度由于其光氧化作用或其他光反应而降低。几乎没有完全能够抵抗光漂白的荧光染料。通常，当在强激发光下反复扫描切片时，在视觉评估或照相完成之前，染料可能会丢失大量的荧光信号。例如，荧光素（例如FITC标记的抗体）的光漂白已成为荧光显微镜中的主要问题。在严重的情况下（例如藻蛋白标记的生物共轭物），由于极高的光漂白速率，甚至无法拍摄高分辨率的荧光图像。 Fluoroquest 防褪色试剂盒可降低染料的光漂白率，从而延长研究人员的观察时间。该试剂盒包含所有可轻松应用于成像实验的基本组件。它们都是预混合的即用型产品。

产品说明书

样品实验方案

简要概述

准备样品（微孔板孔）
从板上清除液体
加入100 µL /孔的防褪色溶液
在显微镜下检查标本

储备溶液配制

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.防褪色原液：
将整个小瓶的测定缓冲液（组分B）添加到小瓶的防褪色试剂（组分A）中。 注意：溶液变成棕色时仍然可以使用，但溶液为黑色时则可以丢弃。

点击查看细胞制备方案

样品操作

1.清除96孔板中多余的液体。

2.向每个选定的孔中添加100 µL防褪色溶液。

3.应用防褪色溶液后，样品可以立即成像。

4.将板在黑暗中于4°C保存，以达到最佳的样品寿命。

参考文献

On the mechanism of Trolox as antiblinking and antibleaching reagent
Authors: Cordes T, Vogelsang J, Tinnefeld P.
Journal: J Am Chem Soc (2009): 5018

Relationship between DAPI-fluorescence fading and nuclear DNA content: An alternative method to DNA quantification
Authors: Gallardo-Escarate C, Alvarez-Borrego J, Von Brand E, Dupre E, Del Rio-Portilla MA.
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Authors: Widengren J, Chmyrov A, Eggeling C, Lofdahl PA, Seidel CA.
Journal: J Phys Chem A (2007): 429

The reliability of long-term storage of direct immunofluorescent staining slides at room temperature
Authors: Dikicioglu E, Meteoglu I, Okyay P, Culhaci N, Kacar F.
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Authors: El-Rifai WE, Knuutila S.
Journal: Methods Mol Med (2001): 25

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Authors: Berrios M, Conlon KA, Colflesh DE.
Journal: Methods Enzymol (1999): 55

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Journal: Cytometry (1999): 353

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Authors: Kolanko CJ, Pyle MD, Loats H, Parton J, Blakely WF, Nath J.
Journal: Biotech Histochem (1999): 111

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Authors: Benchaib M, Delorme R, Pluvinage M, Bryon PA, Souchier C.
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产品说明书

样品实验方案

1.将细胞接种在滑动室或无菌玻璃盖玻片上，并根据需要处理细胞
2.进行甲醛固定。在室温下用PBS中的3.0–4.0％甲醛孵育细胞10–30分钟。
3.用PBS清洗固定的细胞2–3次。
可选：将PBS中的0.1％Triton X-100加入固定细胞中3至5分钟以增加通透性。用PBS冲洗细胞2-3次。
4.用封闭剂（例如在PBS中的5％BSA）封闭30分钟。
5.按照特定产品的数据表中的建议，在稀释缓冲液中稀释一抗。覆盖足够的稀释抗体以覆盖盖玻片上的细胞或腔室玻片的每个腔室。
6.用PBS清洗2-3次。
7.使用前，在室温下加热FluoroQuest™荧光信号增强溶液。
8.稀释荧光第二抗体在FluoroQuest™荧光信号在室温下增强溶液中，然后染色细胞1小时。对于大多数应用，IgG偶联物的二抗一般范围在0.1-10 µg / mL之间。保持盖玻片覆盖或在潮湿的室内避免蒸发。
9.用PBS洗涤细胞3次。
注意：在此步骤可以用荧光核染色剂或鬼笔环肽进行其他染色。
10.将每个盖玻片倒入带有安装介质的清洁幻灯片上，最好是带有抗褪色防腐剂的幻灯片。如果需要，用透明的抛光剂密封边缘。
11.在显微镜下用正确的滤光片对细胞成像。将幻灯片存放在4°C的黑暗处。

参考文献

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Relationship between DAPI-fluorescence fading and nuclear DNA content: An alternative method to DNA quantification
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Authors: Widengren J, Chmyrov A, Eggeling C, Lofdahl PA, Seidel CA.
Journal: J Phys Chem A (2007): 429

The reliability of long-term storage of direct immunofluorescent staining slides at room temperature
Authors: Dikicioglu E, Meteoglu I, Okyay P, Culhaci N, Kacar F.
Journal: J Cutan Pathol (2003): 430

Comparative genomic hybridization technique
Authors: El-Rifai WE, Knuutila S.
Journal: Methods Mol Med (2001): 25

Antifading agents for confocal fluorescence microscopy
Authors: Berrios M, Conlon KA, Colflesh DE.
Journal: Methods Enzymol (1999): 55

Comparison of fixation protocols for adherent cultured cells applied to a GFP fusion protein of the epidermal growth factor receptor
Authors: Brock R, Hamelers IH, Jovin TM.
Journal: Cytometry (1999): 353

Fast-in situ hybridization and immunoenzymatic color pigment detection of mouse bone marrow micronucleus
Authors: Kolanko CJ, Pyle MD, Loats H, Parton J, Blakely WF, Nath J.
Journal: Biotech Histochem (1999): 111

Evaluation of five green fluorescence-emitting streptavidin-conjugated fluorochromes for use in immunofluorescence microscopy
Authors: Benchaib M, Delorme R, Pluvinage M, Bryon PA, Souchier C.
Journal: Histochem Cell Biol (1996): 253

Immunofluorescent artifacts due to the pH of antifading mounting media
Authors: Swartz DJ, Santi PA.
Journal: Biotechniques (1996): 398