Cyber Green 20X水溶液PCR定量 货号17591-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cyber Green 20X水溶液PCR定量

Cyber Green 20X水溶液PCR定量

Cyber Green 20X水溶液PCR定量     货号17591 货号 17591 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 5×1 ml 价格 2604
Ex (nm) 498 Em (nm) 522
分子量 N/A 溶剂 Water
产品详细介绍

简要概述

Cyber Green 染料是美国AAT Bioquest生产的一种绿色荧光核酸染料,具有使染料可用于多种应用的功能,包括qPCR,熔解曲线分析,嗜热解旋酶依赖性扩增(tHDA)的实时监测,常规溶液DNA定量和结晶染料的激发和发射光谱与荧光素(FAM)或SYBR®GreenI的激发和发射光谱非常接近,使染料与配备488 nm氩激光器或任何可见光激发波长的仪器兼容。 Green 染料在热和水解方面都非常稳定,在日常处理过程中提供了便利。染料本身基本上是非荧光的,但在与dsDNA结合后变得高度荧光.Cyber Green 染料的独特性质使其在定量实时PCR(qPCR)应用中特别有用。与广泛使用的SYBR Green I相比,Cyber Green 对PCR的抑制作用较小,不太可能引起非特异性扩增。因此,Cyber Green 可以比SYBR Green我高得多的染料浓度使用,从而产生更强大的PCR信号。更重要的是,定量PCR允许的较高的CYber Green 浓度消除了“染料再分布”问题,这可能在PCR后DNA融解曲线分析期间与SYBR Green一起发生。

Cyber Green 20X水溶液专为qPCR使用而配制。可以使用现有的SYBR Green I或FAM光学设置在任何商业实时PCR循环仪上监测PCR反应。下面提供的qPCR协议用于使用常规非热启动Taq的PCR。使用热启动Taq可能需要在离子强度和pH方面对PCR缓冲液组成进行一些调整,以最好地利用Cyber Green 。例如,化学修饰的Taq,例如AmpliTaq Gold,可能更喜欢低低浓度的氯化钾或不含KCl的和较高的的Tris浓度(高达50mM的)。此外,经常加入水溶性溶剂如DMSO或甘油以稳定主混合物。可能需要根据所用的酶优化这些组分和pH值。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cyber Green 核酸凝胶染料。 

点击查看光谱

产品说明书

染色方案

建议将以下方案用于非热启动Taq酶。

1.设置PCR反应如下:

5μL不含Mg+2的10倍的聚合酶缓冲液

2.5μL50mMMgCl2

每种5mM的2mM dNTP

2.5μL20XCyber Green

1-5单位的Taq DNA聚合酶

每种引物0.1-1μM(最终浓度)

双蒸水至终体积为50μL。

 

2.在热循环荧光计上进行实时PCR,并在退火或延伸步骤记录荧光信号。

注意:使用ABI序列检测系统时,请确保在WELL INSPECTOR选项卡下为被动参考选择NONE。

 

参考文献

Plasmalemma permeability and necrotic cell death phenotypes after intracerebral hemorrhage in mice
Authors: Zhu X, Tao L, Tejima-Mandeville E, Qiu J, Park J, Garber K, Ericsson M, Lo EH, Whalen MJ.
Journal: Stroke (2012): 524

Intra-organ Biodistribution of Gold Nanoparticles Using Intrinsic Two-photon Induced Photoluminescence
Authors: Park J, Estrada A, Schwartz JA, Diagaradjane P, Krishnan S, Dunn AK, Tunnell JW.
Journal: Lasers Surg Med (2010): 630

Screening by imaging: scaling up single-DNA-molecule analysis with a novel parabolic VA-TIRF reflector and noise-reduction techniques
Authors: van ‘t Hoff M, Reuter M, Dryden DT, Oheim M.
Journal: Phys Chem Chem Phys (2009): 7713

Novel anatomic structures in the brain and spinal cord of rabbit that may belong to the Bonghan system of potential acupuncture meridians
Authors: Lee BC, Kim S, Soh KS.
Journal: J Acupunct Meridian Stud (2008): 29

Triplet fraction buildup effect of the DNA-YOYO complex studied with fluorescence correlation spectroscopy
Authors: Shimizu M, Sasaki S, Kinjo M.
Journal: Anal Biochem (2007): 87

DNA length evaluation using cyanine dye and fluorescence correlation spectroscopy
Authors: Shimizu M, Sasaki S, Tsuruoka M.
Journal: Biomacromolecules (2005): 2703

Implementation of accurate and fast DNA cytometry by confocal microscopy in 3D
Authors: Ploeger LS, Huisman A, van der Gugten J, van der Giezen DM, Belien JA, Abbaker AY, Dullens HF, Grizzle W, Poulin NM, Meijer GA, van Diest PJ.
Journal: Cell Oncol (2005): 225

Green-light transilluminator for the detection without photodamage of proteins and DNA labeled with different fluorescent dyes
Authors: Alba FJ, Bermudez A, Daban JR.
Journal: Electrophoresis (2001): 399

Oxazole yellow homodimer YOYO-1-labeled DNA: a fluorescent complex that can be used to assess structural changes in DNA following formation and cellular delivery of cationic lipid DNA complexes
Authors: Wong M, Kong S, Dragowska WH, Bally MB.
Journal: Biochim Biophys Acta (2001): 61

Photophysical properties of fluorescent DNA-dyes bound to single- and double-stranded DNA in aqueous buffered solution
Authors: Cosa G, Focsaneanu KS, McLean JR, McNamee JP, Scaiano JC.
Journal: Photochem Photobiol (2001): 585

说明书
Cyber Green 20X水溶液PCR定量 .pdf

Cyber Gold核酸凝胶电泳染料 货号TJ1702-AAT Bioquest荧光染料

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Cyber Gold核酸凝胶电泳染料

Cyber Gold核酸凝胶电泳染料

货号 TJ1702 存储条件 建议在低于-15℃温度下冷冻保存
规格 500 ul 价格 1050
Ex (nm) 300 Em (nm) 539
分子量 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

Cyber Gold核酸凝胶染料远优于溴化乙锭或其它任何凝胶系统中使用的任何凝胶染料,包括琼脂凝胶和聚丙烯酰胺凝胶、天然凝胶、甲醛 凝胶、乙二醛凝胶和尿素凝胶等。它是最灵敏的dsDNA、ssDNA和RNA染料,可以使用标准的300 nm紫外透射仪观察结果,因此,您不使用昂贵的激光扫描仪也能获得很高的灵敏度。Cyber Gold核酸凝胶染料一旦结合核酸,荧光会增强1000倍以上,量子产率约为0.6。而EB仅为30倍,量子产量大约在0.15。因此,利用300 nm紫外透射仪和黑白成像,Cyber Gold检测凝胶中DNA和RNA的灵敏度比EB高5 到10倍以上。色如其名,可以观察到金色的条带。Cyber Gold染料可用于检测包括双链DNA,单链DNA和RNA,适用于琼脂糖凝胶电泳、变性梯度凝胶电泳(DGGE)、单链构象多态性(SSCP)研究,以 及其他常规的分析。

产品说明书

实验方案

1.电泳后染色

1.1按常规方法制备琼脂糖凝胶,胶中不能含任何其他染料。

1.2把保存于DMSO中的10000X  Cyber Gold 核酸凝胶电泳染料用TE或TBE 缓冲液 (PH 7.5-8)按1:10000稀释成1X Cyber Gold 核酸凝胶电泳染料(比如把10 μL Cyber Gold 用 TE or TBE 缓冲液稀释到100mL).

1.3染色: 用塑料容器装适量 1X Cyber Gold 染色液,染色液淹没凝胶即可。一般情况下,50mL染色液足以满足常规的小块凝胶,对于较大的凝胶,适量增加染色液用量,确保整块凝胶浸入液面下.

注意:染色容器不要使用玻璃器皿,因为染料会吸附在玻璃器皿的内壁,影响色效果。

1.4浸泡的凝胶室温下放置10到40分钟 (染色时间因凝胶浓度和厚度而定),用铝箔盖住容器或置于暗室避光,轻微摇动染色容器(50rpm),不需脱色处理。

1.5拍照时最好使用绿色滤光片。也可使用300 nm紫外照射透视仪或蓝光透射仪观察。通常爆光时间較其他的染料短。

 

2.Cyber Gold 脱色法

        Cyber Gold 脱色可以通過簡單的乙醇核酸沉淀法把Cyber Gold染料从DNA或RNA中分离出来。超过97%的Cyber Gold染料只需一次乙醇核酸沉淀即可被清除。如果在加上醋酸銨到乙醇核酸沉淀步骤里,那么超过99%的染料可被清除。

 

2.1在Cyber Gold核酸样品加入以下三种盐之一,样品的最终浓度为:200mM NaCl,300 mM乙酸鈉(pH值5.2)或2 M的乙酸銨。混合均匀。

2.2加入两个容量的冰镇无水乙醇,混合均勻。放置在0℃(冰浴)30分钟。

2.3離心至少15分鐘,转速为10,000-12,000g。

2.4除去上清液,用70%乙醇清洗核酸沉淀。

2.5再次离心沉淀核酸,让核酸沉淀在空气中自然干燥,並根据需要重新溶于所需溶济中。

Cyber Safe凝胶电泳染料 货号TJ1703-AAT Bioquest荧光染料

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Cyber Safe凝胶电泳染料

Cyber Safe凝胶电泳染料

货号 TJ1703 存储条件 建议在低于-15℃温度下冷冻保存
规格 500 ul 价格 450
Ex (nm) 280 Em (nm) 530
分子量 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

Cyber Safe DNA 凝胶电泳染料 是一种用于观测DNA琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶新一代染料,其使用特殊的合成工艺,与传统的溴乙锭(EB) 染料相比具有更高的灵敏度,且几乎没有致突变性,是最新的EB替代染。Cyber Safe凝胶电泳染料与DNA结合后,可使用紫外-可见分光光度计或激光光源的设备观测。此染料也可用于RNA 凝胶染色。Cyber Safe DNA凝胶电泳染料在280nm 和502nm有最大激发波长,与DNA结合后的最大发射波长是530nm。

产品说明书

实验方案

1.电泳后染色

1.1按常规方法制备琼脂糖凝胶,胶中不能含任何其他染料。

1.2把保存于DMSO中的10000X  Cyber Safe DNA凝胶电泳染料用TAE或TBE 缓冲液按1:10000稀释成1X Cyber Safe DNA 凝胶电泳染料(比如把10 μL Cyber Safe 用 TAE or TBE 缓冲液稀释到100mL).

1.3染色: 用塑料容器装适量 1X Cyber Safe 染色液,染色液淹没凝胶即可。一般情况下,50mL染色液足以满足常规的小块凝胶,对于较大的凝胶,适量增加染色液用量,确保整块凝胶浸入液面下.

注意:染色容器不要使用玻璃器皿,因为染料会吸附在玻璃器皿的内壁,影响色效果。

1.4浸泡的凝胶室温下放置30分钟 (染色时间因凝胶浓度和厚度而定),用铝箔盖住容器或置于暗室避光,轻微摇动染色容器(50rpm),不需脱色处理。

1.5在254 nm紫外照射透视下,与双链DNA结合的Cyber Safe呈现绿色荧光。拍照时最好使用绿色滤光片。也可使用300 nm紫外照射透视仪或蓝光透照仪观察。

 

2.电泳中染色 (仅适于琼脂糖凝胶电泳)

2.1直接用1X Cyber Safe DNA凝胶电泳染料(见1.2)与适量琼脂糖粉末配制凝胶。例如, 要配制25ml熔融的琼脂糖凝胶,可直接在 25ml 1X Cyber Safe中加入适量琼脂糖粉末,摇匀加热。

注意:预制含 Cyber Safe 的凝胶,与配制EB凝胶一样需微波炉加热,结合了Cyber Safe的DNA片段电泳时会比未结合染料的DNA片段走的稍慢,这也与EB染料的情况一样。

2.2电泳: 按常规操作, 电泳后不需要染色或脱色.

2.3在254 nm紫外照射透视下,与双链DNA接合的Cyber Safe呈现绿色荧光。拍照时最好使用绿色滤光片。也可使用300 nm紫外照射透视仪观察。

Cyber Green 10000X水溶液PCR定量 货号17592-AAT Bioquest荧光染料

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Cyber Green 10000X水溶液PCR定量

Cyber Green 10000X水溶液PCR定量

Cyber Green 10000X水溶液PCR定量     货号17592 货号 17592 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 ml 价格 12588
Ex (nm) 498 Em (nm) 522
分子量 N/A 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

Cyber Green 染料是美国AAT Bioquest生产的一种绿色荧光核酸染料,具有使染料可用于多种应用的功能,包括qPCR,熔解曲线分析,嗜热解旋酶依赖性扩增(tHDA)的实时监测,常规溶液DNA定量和结晶染料的激发和发射光谱与荧光素(FAM)或SYBR®GreenI的激发和发射光谱非常接近,使染料与配备488 nm氩激光器或任何可见光激发波长的仪器兼容。 Green 染料在热和水解方面都非常稳定,在日常处理过程中提供了便利。染料本身基本上是非荧光的,但在与dsDNA结合后变得高度荧光.Cyber Green 染料的独特性质使其在定量实时PCR(qPCR)应用中特别有用。与广泛使用的SYBR Green I相比,Cyber Green 对PCR的抑制作用较小,不太可能引起非特异性扩增。因此,Cyber Green 可以比SYBR Green我高得多的染料浓度使用,从而产生更强大的PCR信号。更重要的是,定量PCR允许的较高的CYber Green 浓度消除了“染料再分布”问题,这可能在PCR后DNA融解曲线分析期间与SYBR Green一起发生。

Cyber Green 20X水溶液专为qPCR使用而配制。可以使用现有的SYBR Green I或FAM光学设置在任何商业实时PCR循环仪上监测PCR反应。下面提供的qPCR协议用于使用常规非热启动Taq的PCR。使用热启动Taq可能需要在离子强度和pH方面对PCR缓冲液组成进行一些调整,以最好地利用Cyber Green 。例如,化学修饰的Taq,例如AmpliTaq Gold,可能更喜欢低低浓度的氯化钾或不含KCl的和较高的的Tris浓度(高达50mM的)。此外,经常加入水溶性溶剂如DMSO或甘油以稳定主混合物。可能需要根据所用的酶优化这些组分和pH值。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cyber Green 核酸凝胶染料。 

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染色方案

建议将以下方案用于非热启动Taq酶。

1.设置PCR反应如下:

5μL不含Mg+2的10倍的聚合酶缓冲液

2.5μL50mMMgCl2

每种5mM的2mM dNTP

2.5μL20XCyber Green

1-5单位的Taq DNA聚合酶

每种引物0.1-1μM(最终浓度)

双蒸水至终体积为50μL。

 

2.在热循环荧光计上进行实时PCR,并在退火或延伸步骤记录荧光信号。

注意:使用ABI序列检测系统时,请确保在WELL INSPECTOR选项卡下为被动参考选择NONE。

 

参考文献

Plasmalemma permeability and necrotic cell death phenotypes after intracerebral hemorrhage in mice
Authors: Zhu X, Tao L, Tejima-Mandeville E, Qiu J, Park J, Garber K, Ericsson M, Lo EH, Whalen MJ.
Journal: Stroke (2012): 524

Intra-organ Biodistribution of Gold Nanoparticles Using Intrinsic Two-photon Induced Photoluminescence
Authors: Park J, Estrada A, Schwartz JA, Diagaradjane P, Krishnan S, Dunn AK, Tunnell JW.
Journal: Lasers Surg Med (2010): 630

Screening by imaging: scaling up single-DNA-molecule analysis with a novel parabolic VA-TIRF reflector and noise-reduction techniques
Authors: van ‘t Hoff M, Reuter M, Dryden DT, Oheim M.
Journal: Phys Chem Chem Phys (2009): 7713

Novel anatomic structures in the brain and spinal cord of rabbit that may belong to the Bonghan system of potential acupuncture meridians
Authors: Lee BC, Kim S, Soh KS.
Journal: J Acupunct Meridian Stud (2008): 29

Triplet fraction buildup effect of the DNA-YOYO complex studied with fluorescence correlation spectroscopy
Authors: Shimizu M, Sasaki S, Kinjo M.
Journal: Anal Biochem (2007): 87

DNA length evaluation using cyanine dye and fluorescence correlation spectroscopy
Authors: Shimizu M, Sasaki S, Tsuruoka M.
Journal: Biomacromolecules (2005): 2703

Implementation of accurate and fast DNA cytometry by confocal microscopy in 3D
Authors: Ploeger LS, Huisman A, van der Gugten J, van der Giezen DM, Belien JA, Abbaker AY, Dullens HF, Grizzle W, Poulin NM, Meijer GA, van Diest PJ.
Journal: Cell Oncol (2005): 225

Green-light transilluminator for the detection without photodamage of proteins and DNA labeled with different fluorescent dyes
Authors: Alba FJ, Bermudez A, Daban JR.
Journal: Electrophoresis (2001): 399

Oxazole yellow homodimer YOYO-1-labeled DNA: a fluorescent complex that can be used to assess structural changes in DNA following formation and cellular delivery of cationic lipid DNA complexes
Authors: Wong M, Kong S, Dragowska WH, Bally MB.
Journal: Biochim Biophys Acta (2001): 61

Photophysical properties of fluorescent DNA-dyes bound to single- and double-stranded DNA in aqueous buffered solution
Authors: Cosa G, Focsaneanu KS, McLean JR, McNamee JP, Scaiano JC.
Journal: Photochem Photobiol (2001): 585

说明书
Cyber Green 10000X水溶液PCR定量 .pdf

Cyber Gold核酸凝胶电泳染料 货号TJ1702-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cyber Gold核酸凝胶电泳染料

Cyber Gold核酸凝胶电泳染料

货号 TJ1702 存储条件 建议在低于-15℃温度下冷冻保存
规格 500 ul 价格 1050
Ex (nm) 300 Em (nm) 539
分子量 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

Cyber Gold核酸凝胶染料远优于溴化乙锭或其它任何凝胶系统中使用的任何凝胶染料,包括琼脂凝胶和聚丙烯酰胺凝胶、天然凝胶、甲醛 凝胶、乙二醛凝胶和尿素凝胶等。它是最灵敏的dsDNA、ssDNA和RNA染料,可以使用标准的300 nm紫外透射仪观察结果,因此,您不使用昂贵的激光扫描仪也能获得很高的灵敏度。Cyber Gold核酸凝胶染料一旦结合核酸,荧光会增强1000倍以上,量子产率约为0.6。而EB仅为30倍,量子产量大约在0.15。因此,利用300 nm紫外透射仪和黑白成像,Cyber Gold检测凝胶中DNA和RNA的灵敏度比EB高5 到10倍以上。色如其名,可以观察到金色的条带。Cyber Gold染料可用于检测包括双链DNA,单链DNA和RNA,适用于琼脂糖凝胶电泳、变性梯度凝胶电泳(DGGE)、单链构象多态性(SSCP)研究,以 及其他常规的分析。

产品说明书

实验方案

1.电泳后染色

1.1按常规方法制备琼脂糖凝胶,胶中不能含任何其他染料。

1.2把保存于DMSO中的10000X  Cyber Gold 核酸凝胶电泳染料用TE或TBE 缓冲液 (PH 7.5-8)按1:10000稀释成1X Cyber Gold 核酸凝胶电泳染料(比如把10 μL Cyber Gold 用 TE or TBE 缓冲液稀释到100mL).

1.3染色: 用塑料容器装适量 1X Cyber Gold 染色液,染色液淹没凝胶即可。一般情况下,50mL染色液足以满足常规的小块凝胶,对于较大的凝胶,适量增加染色液用量,确保整块凝胶浸入液面下.

注意:染色容器不要使用玻璃器皿,因为染料会吸附在玻璃器皿的内壁,影响色效果。

1.4浸泡的凝胶室温下放置10到40分钟 (染色时间因凝胶浓度和厚度而定),用铝箔盖住容器或置于暗室避光,轻微摇动染色容器(50rpm),不需脱色处理。

1.5拍照时最好使用绿色滤光片。也可使用300 nm紫外照射透视仪或蓝光透射仪观察。通常爆光时间較其他的染料短。

 

2.Cyber Gold 脱色法

        Cyber Gold 脱色可以通過簡單的乙醇核酸沉淀法把Cyber Gold染料从DNA或RNA中分离出来。超过97%的Cyber Gold染料只需一次乙醇核酸沉淀即可被清除。如果在加上醋酸銨到乙醇核酸沉淀步骤里,那么超过99%的染料可被清除。

 

2.1在Cyber Gold核酸样品加入以下三种盐之一,样品的最终浓度为:200mM NaCl,300 mM乙酸鈉(pH值5.2)或2 M的乙酸銨。混合均匀。

2.2加入两个容量的冰镇无水乙醇,混合均勻。放置在0℃(冰浴)30分钟。

2.3離心至少15分鐘,转速为10,000-12,000g。

2.4除去上清液,用70%乙醇清洗核酸沉淀。

2.5再次离心沉淀核酸,让核酸沉淀在空气中自然干燥,並根据需要重新溶于所需溶济中。