Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 红色荧光 货号22816-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 红色荧光

Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 红色荧光

Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 红色荧光     货号22816 货号 22816 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 2604
Ex (nm) 532 Em (nm) 619
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于细胞凋亡检测的试剂盒,Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具,包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些高效的检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 蓝色荧光 是通过测量Caspase 8的活性而用于细胞凋亡检测的。Caspase 8 是一种Caspase蛋白,CASP8基因所编码。在神经元变性疾病中,例如亨廷顿综合症,caspase 8扮演着重要角色。Caspase 8已被证明具有底物选择性,其肽基序为Ile-Glu-Thr-Asp (IETD)。该试剂盒使用(Ac-IETD)2- ProRed 作为荧光指示器来检测caspas-8的活性。通过caspas-8的切割 ProRed 肽产生强蓝色荧光(eX/eM = 530/620 NM)。这种特性使得试剂盒能适合于DAPI滤光器。本试剂盒提供所有必需组分和最佳操作流程。该实验结果稳定,快速且适应高通量筛选。它不仅能够定量凋亡细胞中caspas-8的活性还能筛选caspas-8的抑制剂。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒。 

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适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 540nm
发射: 620nm
cutoff: 610nm
推荐孔板: 黑色透明
读取模式: 顶或底读模式

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物(100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板)制备细胞
2.加入等体积的Caspase 8工作溶液(100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板)
3.在室温下孵育1小时
4.在Ex / Em = 535/620 nm(截止= 610 nm)监测荧光强度(顶部或底部读取模式)

 

储存溶液配制

        除非另有说明,否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1. Ac-IETD-ProRed 原液(200X):
将65μLDMSO加入到Ac-IETD-ProRed (组分A)的小瓶中并充分混合以制备200X Ac-IETD-ProRed 储备溶液。避光。

 

工作溶液配制

将50μL的200X Ac-IETD-ProRed 储备溶液加入10mL的分析缓冲液(组分B)中并充分混合以制备Caspase 8工作溶液。 避光。 注意:Caspase 8工作液不稳定,请及时使用。有关细胞样品制备的指南,请点击查看

 

操作步骤

1.通过将10μL/孔的10X测试化合物(96孔板)或5μL/孔的5X测试化合物(384孔板)加入PBS或所需缓冲液中来处理细胞。对于空白孔(没有细胞的培养基),加入相同量的化合物缓冲液。

2.将细胞板在37℃,5%CO2培养箱中孵育所需的一段时间(对于用星形孢菌素处理的Jurkat细胞3-4小时)以诱导细胞凋亡。

3.加入100μL/孔/ 96孔或25μL/孔/ 384孔板的Caspase 8工作溶液。

4.将板在室温下孵育至少1小时,避光。注意:如果需要,在室温下加入Caspase 8工作溶液10分钟前,向选定的样品中加入1μL的1 mM Ac-IETD-CHO caspase 8抑制剂,以确认对caspase 8样活性的抑制作用。

5.在Ex / Em = 535 / 620nm(截止= 610nm)下用荧光酶标仪(顶部或底部读取模式)监测荧光强度。注意:有时,如果使用底部读取模式,底部读数可提供更好的信号与背景比,离心细胞板(特别是非粘附细胞)在800 rpm下2分钟。

 

数据分析

Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 红色荧光     货号22816

图1.使用Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒检测Jurkat细胞中的Caspase 8活性 红色荧光 。 在Costar黑壁/透明底96孔板中以相同的一天以200,000个细胞/90μL/孔接种Jurkat细胞。 用或不用1μM星形孢菌素处理细胞5小时。 加入半胱天冬酶8工作溶液(100μL/孔)并在室温下温育1小时。 使用FlexStation荧光酶标仪(Molecular Devices)在Ex / Em = 540 / 620nm(截止值= 610nm)下测量荧光强度。

 

参考文献

Angiopoietins Modulate Survival, Migration, and the Components of the Ang-Tie2 Pathway of Chronic Lymphocytic Leukaemia (CLL) Cells In Vitro
Authors: Luis Mario Aguirre Palma, Hanna Flamme, Iris Gerke, Karl-Anton Kreuzer
Journal: Cancer Microenvironment (2016): 13–26

Hypoxia regulates TRAIL sensitivity of colorectal cancer cells through mitochondrial autophagy.
Authors: Gertrud Knoll, Sebastian Bittner, Maria Kurz, Jonathan Jantsch, Martin Ehrenschwender
Journal: Oncotarget (2016)

microRNA-186 inhibits cell proliferation and induces apoptosis in human esophageal squamous cell carcinoma by targeting SKP2
Authors: Wei He, Jianfang Feng, Yan Zhang, Yuanyuan Wang, Wenqiao Zang, Guoqiang Zhao
Journal: Laboratory Investigation (2016): 317–324

Promotion of osteointegration under diabetic conditions by tantalum coating-based surface modification on 3-dimensional printed porous titanium implants
Authors: Lin Wang, Xiaofan Hu, Xiangyu Ma, Zhensheng Ma, Yang Zhang, Yizhao Lu, Xiang Li, Wei Lei, Yafei Feng
Journal: Colloids and Surfaces B: Biointerfaces (2016): 440–452

Role of delta-like ligand-4 in chemoresistance against docetaxel in MCF-7 cells
Authors: Q Wang, Y Shi, HJ Butler, J Xue, G Wang, P Duan, H Zheng
Journal: Human & Experimental Toxicology (2016): 0960327116650006

Glucose promotes cell proliferation, glucose uptake and invasion in endometrial cancer cells via AMPK/mTOR/S6 and MAPK signaling
Authors: Jianjun Han, Lu Zhang, Hui Guo, Weiya Z Wysham, Dario R Roque, Adam K Willson, Xiugui Sheng, Chunxiao Zhou, Victoria L Bae-Jump
Journal: Gynecologic oncology (2015): 668–675

IL-7 abrogates the immunosuppressive function of human double-negative T cells by activating Akt/mTOR signaling
Authors: Andrea Allgäuer, Elisabeth Schreiner, Fulvia Ferrazzi, Arif B Ekici, Armin Gerbitz, Andreas Mackensen, Simon Völkl
Journal: The Journal of Immunology (2015): 3139–3148

Insulin improves osteogenesis of titanium implants under diabetic conditions by inhibiting reactive oxygen species overproduction via the PI3K-Akt pathway
Authors: Lin Wang, Xiong Zhao, Bo-yuan Wei, Yi Liu, Xiang-yu Ma, Jian Wang, Peng-chong Cao, Yang Zhang, Ya-bo Yan, Wei Lei
Journal: Biochimie (2015): 85–93

LGL1 modulates proliferation, apoptosis, and migration of human fetal lung fibroblasts
Authors: Hui Zhang, Neil B Sweezey, Feige Kaplan
Journal: American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology (2015): L391–L402

t-BHQ Provides Protection against Lead Neurotoxicity via Nrf2/HO-1 Pathway
Authors: Fang Ye, Xiaoyi Li, Lili Li, Jing Yuan, Jun Chen
Journal: Oxidative medicine and cellular longevity (2015)

 

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产品名称 货号
Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 蓝色荧光 Cat#22812
Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 绿色荧光 Cat#22798
Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒 绿色荧光 Cat#22799

说明书
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Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 红色荧光     货号22816 货号 22816 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 2604
Ex (nm) 532 Em (nm) 619
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于细胞凋亡检测的试剂盒,Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具,包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些高效的检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 蓝色荧光 是通过测量Caspase 8的活性而用于细胞凋亡检测的。Caspase 8 是一种Caspase蛋白,CASP8基因所编码。在神经元变性疾病中,例如亨廷顿综合症,caspase 8扮演着重要角色。Caspase 8已被证明具有底物选择性,其肽基序为Ile-Glu-Thr-Asp (IETD)。该试剂盒使用(Ac-IETD)2- ProRed 作为荧光指示器来检测caspas-8的活性。通过caspas-8的切割 ProRed 肽产生强蓝色荧光(eX/eM = 530/620 NM)。这种特性使得试剂盒能适合于DAPI滤光器。本试剂盒提供所有必需组分和最佳操作流程。该实验结果稳定,快速且适应高通量筛选。它不仅能够定量凋亡细胞中caspas-8的活性还能筛选caspas-8的抑制剂。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒。 

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适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 540nm
发射: 620nm
cutoff: 610nm
推荐孔板: 黑色透明
读取模式: 顶或底读模式

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物(100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板)制备细胞
2.加入等体积的Caspase 8工作溶液(100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板)
3.在室温下孵育1小时
4.在Ex / Em = 535/620 nm(截止= 610 nm)监测荧光强度(顶部或底部读取模式)

 

储存溶液配制

        除非另有说明,否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1. Ac-IETD-ProRed 原液(200X):
将65μLDMSO加入到Ac-IETD-ProRed (组分A)的小瓶中并充分混合以制备200X Ac-IETD-ProRed 储备溶液。避光。

 

工作溶液配制

将50μL的200X Ac-IETD-ProRed 储备溶液加入10mL的分析缓冲液(组分B)中并充分混合以制备Caspase 8工作溶液。 避光。 注意:Caspase 8工作液不稳定,请及时使用。有关细胞样品制备的指南,请点击查看

 

操作步骤

1.通过将10μL/孔的10X测试化合物(96孔板)或5μL/孔的5X测试化合物(384孔板)加入PBS或所需缓冲液中来处理细胞。对于空白孔(没有细胞的培养基),加入相同量的化合物缓冲液。

2.将细胞板在37℃,5%CO2培养箱中孵育所需的一段时间(对于用星形孢菌素处理的Jurkat细胞3-4小时)以诱导细胞凋亡。

3.加入100μL/孔/ 96孔或25μL/孔/ 384孔板的Caspase 8工作溶液。

4.将板在室温下孵育至少1小时,避光。注意:如果需要,在室温下加入Caspase 8工作溶液10分钟前,向选定的样品中加入1μL的1 mM Ac-IETD-CHO caspase 8抑制剂,以确认对caspase 8样活性的抑制作用。

5.在Ex / Em = 535 / 620nm(截止= 610nm)下用荧光酶标仪(顶部或底部读取模式)监测荧光强度。注意:有时,如果使用底部读取模式,底部读数可提供更好的信号与背景比,离心细胞板(特别是非粘附细胞)在800 rpm下2分钟。

 

数据分析

Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 红色荧光     货号22816

图1.使用Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒检测Jurkat细胞中的Caspase 8活性 红色荧光 。 在Costar黑壁/透明底96孔板中以相同的一天以200,000个细胞/90μL/孔接种Jurkat细胞。 用或不用1μM星形孢菌素处理细胞5小时。 加入半胱天冬酶8工作溶液(100μL/孔)并在室温下温育1小时。 使用FlexStation荧光酶标仪(Molecular Devices)在Ex / Em = 540 / 620nm(截止值= 610nm)下测量荧光强度。

 

参考文献

Angiopoietins Modulate Survival, Migration, and the Components of the Ang-Tie2 Pathway of Chronic Lymphocytic Leukaemia (CLL) Cells In Vitro
Authors: Luis Mario Aguirre Palma, Hanna Flamme, Iris Gerke, Karl-Anton Kreuzer
Journal: Cancer Microenvironment (2016): 13–26

Hypoxia regulates TRAIL sensitivity of colorectal cancer cells through mitochondrial autophagy.
Authors: Gertrud Knoll, Sebastian Bittner, Maria Kurz, Jonathan Jantsch, Martin Ehrenschwender
Journal: Oncotarget (2016)

microRNA-186 inhibits cell proliferation and induces apoptosis in human esophageal squamous cell carcinoma by targeting SKP2
Authors: Wei He, Jianfang Feng, Yan Zhang, Yuanyuan Wang, Wenqiao Zang, Guoqiang Zhao
Journal: Laboratory Investigation (2016): 317–324

Promotion of osteointegration under diabetic conditions by tantalum coating-based surface modification on 3-dimensional printed porous titanium implants
Authors: Lin Wang, Xiaofan Hu, Xiangyu Ma, Zhensheng Ma, Yang Zhang, Yizhao Lu, Xiang Li, Wei Lei, Yafei Feng
Journal: Colloids and Surfaces B: Biointerfaces (2016): 440–452

Role of delta-like ligand-4 in chemoresistance against docetaxel in MCF-7 cells
Authors: Q Wang, Y Shi, HJ Butler, J Xue, G Wang, P Duan, H Zheng
Journal: Human & Experimental Toxicology (2016): 0960327116650006

Glucose promotes cell proliferation, glucose uptake and invasion in endometrial cancer cells via AMPK/mTOR/S6 and MAPK signaling
Authors: Jianjun Han, Lu Zhang, Hui Guo, Weiya Z Wysham, Dario R Roque, Adam K Willson, Xiugui Sheng, Chunxiao Zhou, Victoria L Bae-Jump
Journal: Gynecologic oncology (2015): 668–675

IL-7 abrogates the immunosuppressive function of human double-negative T cells by activating Akt/mTOR signaling
Authors: Andrea Allgäuer, Elisabeth Schreiner, Fulvia Ferrazzi, Arif B Ekici, Armin Gerbitz, Andreas Mackensen, Simon Völkl
Journal: The Journal of Immunology (2015): 3139–3148

Insulin improves osteogenesis of titanium implants under diabetic conditions by inhibiting reactive oxygen species overproduction via the PI3K-Akt pathway
Authors: Lin Wang, Xiong Zhao, Bo-yuan Wei, Yi Liu, Xiang-yu Ma, Jian Wang, Peng-chong Cao, Yang Zhang, Ya-bo Yan, Wei Lei
Journal: Biochimie (2015): 85–93

LGL1 modulates proliferation, apoptosis, and migration of human fetal lung fibroblasts
Authors: Hui Zhang, Neil B Sweezey, Feige Kaplan
Journal: American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology (2015): L391–L402

t-BHQ Provides Protection against Lead Neurotoxicity via Nrf2/HO-1 Pathway
Authors: Fang Ye, Xiaoyi Li, Lili Li, Jing Yuan, Jun Chen
Journal: Oxidative medicine and cellular longevity (2015)

 

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Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 蓝色荧光 Cat#22812
Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 绿色荧光 Cat#22798
Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒 绿色荧光 Cat#22799

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Cell Meter Caspase 8活性细胞结合检测试剂盒 红色荧光 货号20116-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Meter Caspase 8活性细胞结合检测试剂盒 红色荧光

Cell Meter Caspase 8活性细胞结合检测试剂盒 红色荧光

Cell Meter Caspase 8活性细胞结合检测试剂盒 红色荧光    货号20116 货号 20116 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 25 Tests 价格 4368
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:20116

产品名称:Cell Meter Caspase 8活性细胞结合检测试剂盒 红色荧光

规格:25 Tests

储存条件:保存在冰箱-15℃干燥

保质期:12个月

 

试剂盒成分

成分A:iFluor 647-LETD-FMK 1 vial
成分B:洗涤缓冲液 1瓶(100ml)
成分C:500X Nuclear Green DCS1 1 vial(100 µL)
成分D:500X Hoechst 1 vial(100 µL)

 

适用仪器


流式细胞仪  
激发: 640 nm激光
发射: 660/20 nm滤波片
滤波片: APC滤波片组
荧光显微镜  
激发: Cy5滤波片
发射: Cy5滤波片
推荐孔板: 黑色透明
荧光酶标仪  
激发: 640nm
发射: 680nm
cutoff: 665nm
推荐孔板: 黑色透明
读取模式: 底读模式

 

产品介绍

我们的Cell Meter 活细胞胱天蛋白酶活性测定试剂盒基于胱天蛋白酶的荧光FMK抑制剂。这些抑制剂是细胞可渗透的和无细胞毒性的。一旦进入细胞,胱天蛋白酶抑制剂就与活性胱天蛋白酶共价结合。此Cell Meter Caspase 8活性细胞结合检测试剂盒旨在通过测量活细胞中的caspase 8活化来检测细胞凋亡。它用于定量凋亡细胞中激活的caspase 8活性,或用于筛选caspase 8抑制剂。iFluor 647-LETD-FMK,红色标记试剂,可通过荧光显微镜,流式细胞仪或荧光酶标仪直接检测凋亡细胞中活化的胱天蛋白酶8。该试剂盒提供所有必需成分,并具有优化的测定方案。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter Caspase 8活性细胞结合检测试剂盒。 

 

图示

 

 

 

Cell Meter Caspase 8活性细胞结合检测试剂盒 红色荧光    货号20116

图1.在Jurkat细胞中使用Cell Meter 活细胞Caspase 8检测试剂盒对活性caspase 8进行流式细胞分析。细胞用1μM星形孢菌素处理5小时(绿色),而未处理的细胞用作对照(红色)。星形孢菌素反应被显示为蓝色的Z-VAD-FMK(胱天蛋白酶抑制剂)抑制。将细胞与iFluor 647-LETD-FMK在室温下孵育1小时。使用带有660/20 nm滤光片(APC通道)的NovoCyte流式细胞仪测量荧光强度。

 

 

参考文献

A matter of life and death for caspase 8.
Authors: Willson, Joseph
Journal: Nature reviews. Molecular cell biology (2020): 63

Cancer Cells Employ Nuclear Caspase-8 to Overcome the p53-Dependent G2/M Checkpoint through Cleavage of USP28.
Authors: Müller, Ines and Strozyk, Elwira and Schindler, Sebastian and Beissert, Stefan and Oo, Htoo Zarni and Sauter, Thomas and Lucarelli, Philippe and Raeth, Sebastian and Hausser, Angelika and Al Nakouzi, Nader and Fazli, Ladan and Gleave, Martin E and Liu, He and Simon, Hans-Uwe and Walczak, Henning and Green, Douglas R and Bartek, Jiri and Daugaard, Mads and Kulms, Dagmar
Journal: Molecular cell (2020): 970-984.e7

Caspase-8 Induces Lysosome-Associated Cell Death in Cancer Cells.
Authors: Zhong, Benfu and Liu, Miao and Bai, Changsen and Ruan, Yuxia and Wang, Yuanyuan and Qiu, Li and Hong, Yang and Wang, Xin and Li, Lifang and Li, Binghui
Journal: Molecular therapy : the journal of the American Society of Gene Therapy (2020)

Caspase-8: The double-edged sword.
Authors: Mandal, Ranadip and Barrón, Joan Compte and Kostova, Izabela and Becker, Sven and Strebhardt, Klaus
Journal: Biochimica et biophysica acta. Reviews on cancer (2020): 188357

Chrm3 protects against acinar cell necrosis by stabilizing caspase-8 expression in severe acute pancreatitis mice model.
Authors: Huang, Ning and Murtaza, Ghulam and Wang, Lujing and Luan, Jing and Wang, Xinlei and Sun, Yumiao and Wu, Xing and Tao, Yuxi and Shi, Shuoxi and Cao, Peihua and Qiao, Yu and Han, Dong and Kou, Jiayuan and Ma, Ning and Gao, Xu
Journal: Journal of cellular biochemistry (2020): 2618-2631

Cigarette smoke inhibits the NLRP3 inflammasome and leads to caspase-1 activation via the TLR4-TRIF-caspase-8 axis in human macrophages.
Authors: Buscetta, Marco and Di Vincenzo, Serena and Miele, Monica and Badami, Ester and Pace, Elisabetta and Cipollina, Chiara
Journal: FASEB journal : official publication of the Federation of American Societies for Experimental Biology (2020): 1819-1832

Dissecting DISC regulation via pharmacological targeting of caspase-8/c-FLIPL heterodimer.
Authors: Hillert, Laura K and Ivanisenko, Nikita V and Busse, Denise and Espe, Johannes and König, Corinna and Peltek, Sergey E and Kolchanov, Nikolai A and Ivanisenko, Vladimir A and Lavrik, Inna N
Journal: Cell death and differentiation (2020)

Edwardsiella piscicida type III protein EseJ suppresses apoptosis through down regulating type 1 fimbriae, which stimulate the cleavage of caspase-8.
Authors: He, Tian Tian and Zhou, Ying and Liu, Ying Li and Li, Duan You and Nie, Pin and Li, Ai Hua and Xie, Hai Xia
Journal: Cellular microbiology (2020): e13193

Expression levels of EPHB4, EFNB2 and caspase-8 are associated with clinicopathological features and progression of esophageal squamous cell cancer.
Authors: Ni, Qianzhi and Chen, Pingping and Zhu, Bing and Li, Jingjing and Xie, Dong and Ma, Xingyuan
Journal: Oncology letters (2020): 917-929

High-Concentrate Feeding to Dairy Cows Induces Apoptosis via the NOD1/Caspase-8 Pathway in Mammary Epithelial Cells.
Authors: Ul Aabdin, Zain and Cheng, Xiaoye and Dai, Hongyu and Wang, Yan and Sahito, Benazir and Roy, Animesh Chandra and Memon, Meena Arif and Shen, Xiangzhen
Journal: Genes (2020)

说明书
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Cell Navigator 细胞膜染色试剂盒 橙色荧光 货号22680-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Navigator 细胞膜染色试剂盒 橙色荧光

Cell Navigator 细胞膜染色试剂盒 橙色荧光

Cell Navigator 细胞膜染色试剂盒 橙色荧光     货号22680 货号 22680 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 500 Tests 价格 2604
Ex (nm) 555 Em (nm) 573
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Navigator 细胞膜染色试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于染色细胞膜的试剂盒,Cell Navigator 细胞膜染色试剂盒可快速,均匀地标记质膜,而没有凝集素表现出的细胞类型差异。它可以用作HCS(高含量筛选)的分割工具,以及对细胞质膜进行染色以用于标准荧光显微镜检查。试剂盒中使用的染色剂可以固定,但不能通透,因此不适用于还涉及通过抗体探测内部靶标的实验。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Navigator 细胞膜染色试剂盒。

点击查看光谱

 

适用仪器


荧光显微镜  
激发: TRITC滤波片
发射: TRITC滤波片
推荐孔板: 黑色透明

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.在生长培养基中准备细胞
2.将细胞与Cellpaint Orange工作溶液在37ºC下孵育10-20分钟
3.在荧光显微镜下于Ex / Em = 540/590 nm(TRITC滤光片组)分析细胞

 

溶液配制

1.储备溶液配制

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 Cellpaint 橙色储备溶液(500X):
将100 µL DMSO(组分C)添加到Cellpaint Orange(组分A)小瓶中,制成500X Cellpaint Orange储备液。 注意:如果管密封严密,未使用的500X Cellpaint Orange储备液可以在≤-20ºC下保存一个月。 避光。

 

2.工作溶液配制

将20 µL 500X Cellpaint Orange储备溶液添加到10 mL的测定缓冲液(组分B)中,并充分混合以制成Cellpaint Orange工作溶液。 这种Cellpaint Orange工作溶液在室温下至少可稳定8小时。 避光。 注意:20 µL 500X Cellpaint Orange 500X储备溶液足以用于一个96孔板。

点击查看细胞制备方案

 

样品示例及操作

1.在细胞板中加入100 µL /孔(96孔板)或50 µL /孔(384孔板)的Cellpaint Orange工作溶液。

2.避光保存,在37°C下孵育细胞10-20分钟。 注意:细胞膜探针的最佳浓度取决于具体应用。 可以根据特定的细胞类型和细胞或组织对探针的渗透性来改变染色条件。

3.除去每个孔中的Cellpaint Orange工作溶液。

4.用生理缓冲液(例如HHBS,PBS或您选择的缓冲液)洗涤细胞3次。

5.染色后固定细胞(可选)。 用4%甲醛固定细胞15-30分钟。 用生理缓冲液洗涤细胞三遍。

6.使用带有TRITC滤光片组(Ex / Em = 540/590 nm)的荧光显微镜观察细胞中的荧光信号。

Cell Navigator 细胞膜染色试剂盒 橙色荧光     货号22680

图1.在96孔黑色透明底板中,用Cell Navigator 细胞膜染色试剂盒*橙色荧光*染色的HL-60细胞的荧光图像。 使用配备有TRITC滤波片的荧光显微镜使细胞成像。

 

参考文献

Insulin receptor based lymphocyte trafficking in the progression of type 1 diabetes
Authors: Michael P Morran, Ali G Al-Dieri, Andrea L Nestor-Kalinoski, Richard K Jordan, Nirdesh K Gupta, Marcia F McInerney
Journal: Journal of Biological Methods (2018): e85

 

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Cell Meter 比色细胞细胞毒性检测试剂盒 货号22779-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Meter 比色细胞细胞毒性检测试剂盒

Cell Meter 比色细胞细胞毒性检测试剂盒

Cell Meter 比色细胞细胞毒性检测试剂盒    货号22779 货号 22779 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 5000 Tests 价格 10548
Ex (nm) 575 Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter 比色法细胞毒性检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于细胞毒性检测的试剂盒,Cell Navigator荧光成像试剂盒是一类荧光成像工具,用来标记亚细胞,细胞器;例如细胞膜、溶酶体、线粒体和细胞核等。Cell Navigator系列细胞器或亚细胞结构标记试剂盒提供最全的细胞及相关细胞器荧光标记方案,每种检测方案均能提供蓝色/绿色/红色/橙色等不同荧光检测方法。这种高效的细胞标签为从空间上和时间上研究发生的细胞活动提供了一种十分有效的方法。Cell Meter比色法细胞毒性检测试剂盒 使用可溶于水的四唑染料。在电子载体(PMS)存在的细胞还原性条件下,该染料能产生水溶性的甲瓒。四唑盐经细胞脱氢酶变成橙色的甲瓒产物,它在培养基是可溶的。一定数目甲瓒产物与一定数目活细胞成比例。我们的试剂盒比其他基于四唑细胞毒性检测试剂盒(如MTT、XTT)提供更强有力操作方案。不需要预混合,我们试剂盒四唑盐染料直接加入细胞。此外,我们的试剂盒比其他四唑细胞毒性检测试剂盒(如MTT、XTT)具有更高的灵敏度。能广泛的使用多种设备平台。适应于多种的研究,例如细胞粘附、细胞趋化、多耐药性、细胞生存能力、凋亡和细胞毒性等。该试剂盒具备最佳的组分和实验操作流程,适合于增殖或者不增殖的细胞,并能用于悬浮细胞或者贴壁细胞。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter 比色法细胞毒性检测试剂盒。

 

适用仪器


光吸收酶标仪  
吸收: 570/605nm
推荐孔板: 黑色透明

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物(100μL/孔/ 96孔板或50μL/孔/ 384孔板)制备细胞
2.添加1/5体积的分析溶液(组分A)
3.将细胞在37℃,5%CO 2培养箱中孵育1-24小时
4.监测A570nm / A605nm的吸光度比

 

操作步骤

1.在具有黑色壁和透明底部的组织培养微孔板中每孔100至10,000个细胞。 将测试化合物添加到细胞中,并在37℃,5%CO 2培养箱中孵育所需的一段时间(例如24,48或96小时)。 对于空白孔(没有细胞的培养基),加入相应量的化合物缓冲液。 对于96孔板,建议的总体积为100μL,对于384孔板,建议的总体积为50μL。

 

2.对照设置
2.1阳性对照:含有细胞和已知的增殖或细胞毒性诱导剂。

2.2阴性对照:含有细胞但不含有测试化合物。

2.3载体对照:含有细胞和用于递送测试化合物的载体。

2.4非细胞对照:含有不含细胞的生长培养基。

2.5测试化合物对照:含有用于递送测试化合物[Hank’s平衡盐溶液(HBSS)或磷酸盐缓冲盐水(PBS)]和测试化合物的载体对照。 一些测试化合物具有强自发荧光并且可能产生假阳性结果。 注意:对于96孔板,将所有对照的总体积与100μL匹配,对于具有生长培养基的384孔板,将所有对照的总体积与50μL相匹配。

 

3.将测定溶液(组分A)预热至37°C。 在开始实验之前彻底混合。

4.向每个孔中加入20μL(96孔板)或10μL(384孔板)的测定溶液(组分A)。 轻轻摇动平板30秒,混合试剂。

5.将细胞在37°C,5%CO2培养箱中孵育1-24小时,避光。 注意:适当的孵育时间取决于单个细胞类型的代谢率和使用的细胞浓度。 优化每个实验的孵育时间。 不推荐极长的孵育时间,因为指示剂可以转化为无色化合物。

6.用吸光度读板仪在OD比率A570nm / A605nm下监测吸光度的增加。 OD570与OD605的比率用于确定每个孔中的细胞活力。 注意:细胞存活率与OD570增加和OD605减少成正比。

 

数据分析

        从含有细胞的那些孔的值中减去从非细胞对照孔读取的背景吸光度。注意:空白孔的背景吸光度可以根据生长培养基或微量滴定板的来源而变化。

        每个孔中的吸光度读数表示孔中的细胞数。

根据以下公式计算样品和对照的细胞活力百分比:
%细胞活力= 100×(Rsample – Ro)/(Rctrl – Ro)
Rsample是在测试化合物存在下OD570 / OD605的吸光度比。
Rctrl是不存在测试化合物(载体对照)时OD570 / OD605的吸光度比。
Ro是OD570 / OD605的平均背景(非细胞对照)吸光度比。

        从空白标准孔获得的读数(Abs)用作阴性对照。从其他标准的读数中减去该值,以获得基线校正值。然后,绘制标准读数以获得标准曲线和方程。该等式可用于计算细胞数/孔样品。

Cell Meter 比色细胞细胞毒性检测试剂盒    货号22779

图1.用Cell Meter 比色细胞细胞毒性测定试剂盒测量CHO-K1细胞数量反应。 将1至10个细胞/孔/100μL的CHO-K1细胞在Costar黑壁/透明底96孔板中接种过夜。 将细胞与20μL/孔的测定溶液(组分A)在37℃下孵育3小时。用SpectraMax plus(Molecular Devices)在570nm和605nm下测量吸光度强度。 OD570 / OD605的比例与所示的细胞数成比例。

 

参考文献

Detection of thalidomide embryotoxicity by in vitro embryotoxicity testing based on human iPS cells
Authors: Nobuo Aikawa, Atsushi Kunisato, Kenji Nagao, Hideaki Kusaka, Katsumi Takaba, Kinya Ohgami
Journal: Journal of pharmacological sciences (2014): 201–207

 

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产品名称 货号
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Cell Meter 荧光法细胞毒性检测试剂盒 Cat#22781

说明书
Cell Meter 比色细胞细胞毒性检测试剂盒.pdf