新型钙离子荧光探针Calbryte 630, AM *细胞渗透性*

	货号	20722	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	1 mg	价格	9216
	Ex (nm)	607	Em (nm)	624
	分子量	1234.84	溶剂	DMSO
	产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：20722

产品名称：新型钙离子荧光探针Calbryte 630, AM *细胞渗透性*

规格：1mg

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：12个月

产品物理化学光谱特性

分子量：1234.84

溶剂：DMSO

激发波长（nm）：608

发射波长（nm）：626

产品介绍

新型钙离子荧光探针Calbryte 630, AM *细胞渗透性*是美国AAT Bioquest生产的钙离子荧光探针，钙测量对于许多生物学研究至关重要。显示结合钙后光谱响应的荧光探针使研究人员能够使用荧光显微镜，流式细胞仪，荧光光谱和荧光酶标仪来研究细胞内游离钙浓度的变化。x-Rhod-1通常用作红色荧光钙指示剂。但是，x-Rhod-1在酯酶水解后在活细胞中仅适度发荧光，并且细胞钙反应非常小。Calbryte 630的开发旨在改善x-Rhod-1的细胞负载和钙反应，同时保持x-Rhod-1的光谱波长，使其与TexasRed®滤光片兼容。在CHO和HEK细胞中，Cal-630 AM的细胞钙反应比x-Rhod-1敏感得多。Calbryte 630的光谱与FITC，AlexaFluor®488和GFP的光谱完全分离，使其成为与GFP细胞系或FITC / AlexaFluor®488标记的抗体进行细胞内分析多重检测的理想钙探针。Calbryte 630是用于测量细胞内钙的新一代红色荧光指示剂。Calbryte 630 AM的信号/背景比和细胞内保留特性大大提高，使其成为评估GPCR和钙通道靶标以及在活细胞中筛选其激动剂和拮抗剂的最强大的深红色荧光指示剂。像其他染料AM细胞上样一样，Calbryte 630 AM酯是非荧光的，一旦进入细胞内部，它就会被细胞内酯酶水解并被激活。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的新型钙离子荧光探针Calbryte 630, AM *细胞渗透性*。 

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钙离子篇：时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

参考文献

Ca2+ Diffusion in the Large Peptidergic Nerve Terminals of the Posterior Pituitary
Authors: Shane M McMahon, Meyer B Jackson
Journal: Biophysical Journal (2019): 238a

Functionally Identifying Members of the MscS Superfamily of Ion Channels in Paraburkholderia Membranes
Authors: Hannah M Dickinson, Brittni L Miller, Hannah R Malcolm
Journal: Biophysical Journal (2019): 240a–241a

LASS2 inhibits proliferation and induces apoptosis in HepG2 cells by affecting mitochondrial dynamics, the cell cycle and the nuclear factor-$kappa$B pathways
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Authors: Joseph M Autry, Bengt Svensson, Christine B Karim, Sudeep Perumbakkam, Zhenhui Chen, Carrie J Finno, David D Thomas, Stephanie J Valberg
Journal: Biophysical Journal (2019): 238a–239a

Shear stress induced nuclear shrinkage through activation of Piezo1 channels in epithelial cells
Authors: Deekshitha Jetta, Philip A Gottlieb, Deepika Verma, Frederick Sachs, Susan Z Hua
Journal: J Cell Sci (2019): jcs–226076

The Arrhythmogenic E105A CAM Mutation Dysregulates Normal Cardiac Function in Zebrafish by Altering CAM-Ca2+ and CAM-RyR2 Interactions
Authors: Michail Nomikos, Sahar I Da’as, Angelos Thanassoulas, Rola Salem, Brian L Calver, Alaaeldin Saleh, Ali Al-Maraghi, Gheyath K Nasrallah, Bared Safieh-Garabedian, Egon Toft
Journal: Biophysical Journal (2019): 240a

Improvements in Simultaneous Sodium and Calcium Imaging
Authors: Kenichi Miyazaki, John E Lisman, William N Ross
Journal: Frontiers in cellular neuroscience (2018)

Calreticulin regulates TGF-β1-induced epithelial mesenchymal transition through modulating Smad signaling and calcium signaling
Authors: Yanjiao Wu, Xiaoli Xu, Lunkun Ma, Qian Yi, Weichao Sun, Liling Tang
Journal: The International Journal of Biochemistry & Cell Biology (2017)

Dexmedetomidine reduces hypoxia/reoxygenation injury by regulating mitochondrial fission in rat hippocampal neurons
Authors: Jia Liu, Qing Du, He Zhu, Yu Li, Maodong Liu, Shoushui Yu, Shilei Wang
Journal: Int J Clin Exp Med (2017): 6861–6868

Monosialoganglioside 1 may alleviate neurotoxicity induced by propofol combined with remifentanil in neural stem cells
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Journal: Neural Regeneration Research (2017): 945

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新型钙离子荧光探针Calbryte-520XL葡聚糖（停产）

简要概述

产品基本信息

货号：20648

产品名称：新型钙离子荧光探针Calbryte-520XL葡聚糖

规格：1mg

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：24个月

产品物理化学光谱特性

分子量：~11000

溶剂：水

激发波长(nm)：492

发射波长(nm)：514

产品介绍

新型钙离子荧光探针Calbryte-520XL葡聚糖是美国AAT Bioquest生产的钙离子荧光探针，Calbryte 520XL右旋糖酐是一种新型荧光且细胞不渗透的钙指示剂，具有极低的亲和力。它的Kd约为500 uM，与著名的Rhod 5N相似，但比Rhod-5N稳定得多。Calbryte 520XL在高浓度钙离子存在下产生明亮的荧光信号。它具有与Fluo-4相同的激发和发射波长，因此相同的Fluo-4测定设置可轻松应用于基于Calbryte 520XL的钙测定。Calbryte 520XL是Rhod-5N的绝佳替代品。我们还提供Calbryte 520XL，AM（＃20646），钾盐（＃20645）和Calbryte 520XL叠氮化物（＃20643），它们可以通过众所周知的点击化学轻松地偶联到载体上。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的新型钙离子荧光探针Calbryte-520XL葡聚糖。 

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钙离子篇：时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

参考文献

Calreticulin regulates TGF-β1-induced epithelial mesenchymal transition through modulating Smad signaling and calcium signaling
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Journal: Int J Clin Exp Med (2017): 6861–6868

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Obtaining spontaneously beating cardiomyocyte-like cells from adipose-derived stromal vascular fractions cultured on enzyme-crosslinked gelatin hydrogels
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Di (2-ethylhexyl) phthalate-induced apoptosis in rat INS-1 cells is dependent on activation of endoplasmic reticulum stress and suppression of antioxidant protection
Authors: Xia Sun, Yi Lin, Qiansheng Huang, Junpeng Shi, Ling Qiu, Mei Kang, Yajie Chen, Chao Fang, Ting Ye, Sijun Dong
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The effect of mitochondrial calcium uniporter on mitochondrial fission in hippocampus cells ischemia/reperfusion injury
Authors: Lantao Zhao, Shuhong Li, Shilei Wang, Ning Yu, Jia Liu
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2015): 537–542

Fungus induces the release of IL-8 in human corneal epithelial cells, via Dectin-1-mediated protein kinase C pathways.
Authors: Xu-Dong Peng, Gui-Qiu Zhao, Jing Lin, Nan Jiang, Qiang Xu, Cheng-Cheng Zhu, Jain-Qiu Qu, Lin Cong, Hui Li
Journal: International journal of ophthalmology (2014): 441–447

Propofol and remifentanil at moderate and high concentrations affect proliferation and differentiation of neural stem/progenitor cells
Authors: Qing Li, Jiang Lu, Xianyu Wang
Journal: Neural regeneration research (2014): 2002

Role of mitochondrial calcium uniporter in regulating mitochondrial fission in the cerebral cortexes of living rats
Authors: Nan Liang, Peng Wang, Shilei Wang, Shuhong Li, Yu Li, Jinying Wang, Min Wang
Journal: Journal of Neural Transmission (2014): 593–600

Increased expression of cell adhesion molecule 1 by mast cells as a cause of enhanced nerve–mast cell interaction in a hapten-induced mouse model of atopic dermatitis
Authors: M Hagiyama, T Inoue, T Furuno, T Iino, S Itami, M Nakanishi, H Asada, Y Hosokawa, A Ito
Journal: British Journal of Dermatology (2013): 771–778

相关产品

新型钙离子荧光探针Calbryte 520, AM *细胞渗透性*

	货号	20651	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	10×50 ug	价格	3924
	Ex (nm)	493	Em (nm)	515
	分子量	1090.90	溶剂	DMSO
	产品详细介绍

简要概述

新型钙离子荧光探针Cal-520 AM是美国AAT Bioquest生产的钙离子荧光探针，Calbryte 520，Calbryte 590和Calbryte 630提供最强大的均匀荧光测定工具，用于检测细胞内钙动员。与现有的钙指示剂（如Fluo-3 AM，Fluo-4 AM和Rhod-2 AM）相比，这些钙敏感染料明显更亮，并提供更高的信噪比，大大提高了细胞内保留和负载效率。表达通过钙发出信号的GPCR或钙通道的细胞可以预装载可以穿过细胞膜的Calbryte 520 AM，Calbryte 590 AM或Calbryte 630 AM。一旦进入细胞内，Cal520 AM，Calbryte 590 AM或Calbryte 630 AM的亲脂性阻断AM基团被细胞内酯酶切割，产生带负电荷的荧光Calbryte 染料，留在细胞内。它们与钙结合后的荧光大大增强。当用激动剂刺激细胞时，该受体表示细胞内钙的释放，这显着增加了Calbryte 520，Calbryte 590或Calbryte 630的荧光。高灵敏度和> 100倍荧光增强的特性使Calbryte 520 AM， Calbryte 590 AM或Calbryte 630 AM是测量细胞内钙的最强大指标。

除了方便的激发波长和钙的大荧光增强外，Calbryte 520，Calbryte 590和Calbryte 630主要定位于细胞溶胶中，不像Rhod-2主要位于线粒体中。 此外，Calbryte 590和Calbryte 630的长Ex / Em波长使这些染料成为完美的钙指示剂，可与绿色荧光蛋白（GFP）细胞系进行多色检测。 此外，Calbryte 520，Calbryte 590或Calbryte 630钙测定经过优化，可与大多数现有荧光仪器兼容。 Calbryte 520可在488 nm处激发，并与FITC滤光片组配合使用。 Calbryte 590经过优化，可在555 nm激发，并与TRITC / Cy3滤光片组配合使用。 Calbryte 630经过优化，可在594 nm激发，并与TexasRed®滤光片组配合使用。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的钙离子荧光探针。

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钙离子篇：时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

产品说明书

使用Calbryte 520 AM，Calbryte 590 AM或Calbryte 630 AM酯类

1.操作步骤

        Calbryte AM酯应在使用前在无水DMSO中重新配制。 DMSO储备溶液可以在-20℃下储存（干燥）并避光。 在这些条件下，AM酯应稳定三个月。 以下是我们推荐的将Calbryte 520 AM，Calbryte 590 AM或Calbryte 630 AM酯加入活细胞的方案。 该方案仅提供指南，实际应根据您的特定需求进行修改。

a）在无水DMSO中制备2至5mM Calbryte 520AM，Calbryte 590AM或Calbryte 630AM酯的储备溶液。

b）将Calbryte 520 AM，Calbryte 590 AM或Calbryte 630 AM溶解在DMSO中或将等份的指示剂储备溶液解冻至室温。 在Hanks和Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的缓冲液（0.04％Pluronic®F-127）中制备10至20μM的染料工作溶液。 细胞加载所需指示剂的确切浓度必须根据经验确定。

注意：非离子型洗涤剂Pluronic®F-127有时用于增加Calbryte 520 AM，Calbryte 590 AM或Calbryte 630 AM酯的水溶性。 各种Pluronic®F-127可从金畔购买。

c）如果您的细胞（如CHO细胞）含有有机阴离子转运蛋白，可将丙磺舒（1-2 mM）添加到染料工作溶液中（最终浓度为0.5-1 mM）

注意：各种ReadiUse 丙磺舒（包括水溶性钠盐和稳定溶液）均可从金畔购买。

d）将等体积的染料工作溶液（来自步骤b或c）加入细胞板中。

e）将染料加载板在细胞培养箱中孵育约60分钟，然后将板在室温下再孵育15分钟。

f）用HHBS或您选择的含有阴离子转运蛋白抑制剂（如1 mM丙磺舒）的缓冲液替换染料工作溶液，以去除多余的探针。

g）对于Calbryte 520 AM，在Ex / Em = 490 / 525nm处进行钙测试，对于Calbryte 590 AM，使用540/590nm进行钙测试，对于Calbryte 630 AM，使用610/640nm进行钙测试。

2.测量细胞内钙响应：

图1. CHO-K1细胞中内源性P2Y受体对ATP的反应。 将CHO-K1细胞以每孔100μL每孔40,000个细胞接种过夜，在96孔黑色壁/透明底板中。 将含有丙磺舒的HHBS中的100μLFluo-4AM或Calbryte TM 520AM加入孔中，并将细胞在37℃下孵育45分钟。 用200μLHHBS替换染料加载培养基，加入50μL50μMATP，并使用FITC通道用荧光显微镜（Keyence）成像。

图2.用Calbryte 520或Fluo-4 AM测量的CHO-M1细胞中外源M1受体的卡巴胆碱刺激的钙响应。 在96孔黑壁/透明底板中，将CHO-M1细胞以每100μL/孔40,000个细胞接种过夜。 将100μLFluo-4AM或不含丙磺舒的Calbryte 520AM加入细胞中，并将细胞在37℃下孵育45分钟。 通过FlexStation 3（Molecular Devices）添加Carbachol（50μL/孔）以达到最终指示的浓度。

图3. CHO-K细胞中内源性P2Y受体对ATP的反应。 在96孔黑壁/透明底板中，将CHO-K细胞以每100μL/孔40,000个细胞接种过夜。 将100μL具有2mM丙磺舒的HbBS中的Calbryte 590AM或Calbryte  630 AM加入孔中，并将细胞在37℃下孵育1小时。 将染料加载培养基替换为200μLHHBS，用50μL50μMATP处理，并使用TRITC通道（Calbryte  590）和Texas Red Channel（Calbryte 630）用荧光显微镜（Keyence）成像。

结论

        由于Ca ²⁺在生物学中的重要性，已经建立了许多用于分析细胞和/或亚细胞Ca ²⁺活性机制的技术/方法。 尽管用于分析Ca ²⁺活性的每种方法都具有优于其他方法的某些优点，但每种方法也存在缺点。 凭借上述出色的性能，我们相信Calbryte 520，Calbryte 590和Calbryte 630钙检测试剂为各种生物系统中的细胞内钙分析和监测提供了新的强大工具。

        正如可能预测的那样，Ca^{2 +}分析中许多研究人员的兴趣从细胞水平转移到亚细胞水平。 已经发现Ca^{2 +}在整个细胞中均匀分布，并且在多种细胞（例如，卵母细胞，心肌细胞，肝细胞和外分泌细胞）中观察到Ca^{2 +}的细胞内异质性（例如Ca²⁺ waves and Ca²⁺ sparks）。 随着20世纪80年代共聚焦激光扫描显微镜（CLSM）和2000年代先进的酶标仪（如FLIPR，FDSS和NOVOStar专用于细胞内Ca^{2 +}检测）的出现，细胞内Ca^{2 +}的测量显着加速。 共聚焦激光扫描显微镜和最近的多光子显微镜除了测量其浓度外，还允许在亚细胞水平上对细胞内Ca ²⁺信号传导进行精确的空间和时间分析。

参考文献

Behavioral role of the reciprocal inhibition between a pair of Mauthner cells during fast escapes in zebrafish
Authors: Takashi Shimazaki, Masashi Tanimoto, Yoichi Oda, Shin-ichi Higashijima
Journal: Journal of Neuroscience (2019): 1182–1194

Deep Two-Photon Imaging In Vivo with a Red-Shifted Calcium Indicator
Authors: Antje Birkner, Arthur Konnerth
Journal: (2019): 15–26

In Vivo Functional Mapping of a Cortical Column at Single-Neuron Resolution
Authors: Carsten H Tischbirek, Takahiro Noda, Manabu Tohmi, Antje Birkner, Israel Nelken, Arthur Konnerth
Journal: Cell reports (2019): 1319–1326

Multiplex imaging of quantal glutamate release and presynaptic Ca2+ at multiple synapses in situ
Authors: Thomas P Jensen, Kaiyu Zheng, Nicholas Cole, Jonathan S Marvin, Loren L Looger, Dmitri A Rusakov
Journal: bioRxiv (2019): 336891

Multiplex imaging relates quantal glutamate release to presynaptic Ca 2+ homeostasis at multiple synapses in situ
Authors: Thomas P Jensen, Kaiyu Zheng, Nicholas Cole, Jonathan S Marvin, Loren L Looger, Dmitri A Rusakov
Journal: Nature Communications (2019): 1414

A 3D human triculture system modeling neurodegeneration and neuroinflammation in Alzheimer’s disease
Authors: Joseph Park, Isaac Wetzel, Ian Marriott, Didier Dréau, Carla D’Avanzo, Doo Yeon Kim, Rudolph E Tanzi, Hansang Cho
Journal: Nature neuroscience (2018): 941

Concepts of All-Optical Physiology
Authors: Jan Doering, Ting Fu, Isabelle Arnoux, Albrecht Stroh
Journal: (2018): 153–174

Optical probes for neurobiological sensing and imaging
Authors: Eric H Kim, Gregory Chin, Guoxin Rong, Kira E Poskanzer, Heather A Clark
Journal: Accounts of chemical research (2018): 1023–1032

Optogenetic Control of Voltage-Gated Calcium Channels
Authors: Guolin Ma, Jindou Liu, Yuepeng Ke, Xin Liu, Minyong Li, Fen Wang, Gang Han, Yun Huang, Youjun Wang, Yubin Zhou
Journal: Angewandte Chemie International Edition (2018): 7019–7022

α V β 3 Integrin regulates astrocyte reactivity
Authors: Raúl Lagos-Cabré, Alvaro Alvarez, Milene Kong, Francesca Burgos-Bravo, Areli Cárdenas, Edgardo Rojas-Mancilla, Ramón Pérez-Nunez, Rodrigo Herrera-Molina, Fabiola Rojas, Pascal Schneider
Journal: Journal of Neuroinflammation (2017): 194

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