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Buccutite 过氧化物酶（HRP）抗体偶联试剂盒 适合标记1mg蛋白 货号5506-AAT Bioquest荧光染料

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Buccutite 过氧化物酶（HRP）抗体偶联试剂盒 适合标记1mg蛋白

Buccutite 过氧化物酶（HRP）抗体偶联试剂盒 适合标记1mg蛋白

Buccutite 过氧化物酶（HRP）抗体偶联试剂盒 适合标记1mg蛋白 货号5506 货号 5506 存储条件 在2-8度冷藏保存, 避免光照
规格 5 Labelings 价格 18288
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Buccutite 过氧化物酶（HRP）抗体标记试剂盒提供了一种以微观方式标记抗体的最便捷方法。蛋白质 – 蛋白质缀合通常用双功能接头（例如常用的SMCC）进行，在每个末端具有不同的反应性以连接两种不同的蛋白质。交联剂的一端（通过NHS酯）与氨基酸赖氨酸和N-末端中发现的胺（-NH2）反应，另一端（通过马来酰亚胺）与氨基酸中发现的硫醇基团（-SH）反应。半胱氨酸。然而，SMCC修饰的蛋白质极不稳定并且通常是自身反应性的，因为蛋白质通常含有胺和硫醇基团，其引起显着量的均聚交联。此外，量化蛋白质上马来酰亚胺基团的数量是相当困难和繁琐的。 Buccutite 过氧化物酶（HRP）抗体偶联试剂盒设计用于直接从蛋白质，肽和含有游离氨基的其他配体制备辣根过氧化物酶（HRP）偶联物。我们的试剂盒中提供的HRP已使用我们专有的接头Buccutite FOL预先激活，可直接用于缀合。 Buccutite FOL活化的HRP在极其温和的中性条件下容易与含有Buccutite MTA的分子反应，无需任何催化剂。与常用的SMCC和其他类似技术相比，我们的Buccutite 生物共轭系统更易于使用。它能够以更高的效率和产量实现生物分子的更快和定量缀合。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Buccutite 过氧化物酶（HRP）抗体偶联试剂盒。 

产品说明书

实验方案

操作步骤

1.运行Antibody-Buccutite MTA反应

1.1将抗体溶液直接加入到Buccutite MTA（组分B）的小瓶中，并通过反复移液几次将其充分混合或将小瓶涡旋几秒钟。

1.2将抗体-Buccutite MTA反应混合物在室温下保持30-60分钟。 注意：如果需要，抗体-Buccutite MTA反应混合物可以旋转或摇动更长时间。

 

2.制备抗体-HRP缀合物

2.1通过向Buccutite FOL活化的HRP（组分A）的小瓶中加入50μLddH2O制备Buccutite FOL活化的HRP溶液，通过反复移液几次充分混合或将小瓶涡旋几秒钟。

2.2将整瓶Buccutite FOL活化的HRP溶液混合到纯化的抗体-Buccutite MTA溶液（来自步骤纯化抗体-Buccutite MTA溶液）中，充分混合并在室温下旋转混合物1小时。

2.3抗体-HRP结合物现在可以使用了。 注意：立即使用时，抗体-HRP结合物需要用您选择的缓冲液稀释。 注意：对于长期储存，需要浓缩或冷冻干燥抗体-HRP结合物溶液。

 

3.抗体-HRP共轭物的储存

抗体缀合物应在载体抗体（例如0.1％牛血清白蛋白）存在下以> 0.5mg / mL储存。 当在2mM叠氮化钠存在下储存并避光时，抗体-HRP缀合物溶液可以在4℃下储存两个月而没有显着变化。 对于更长时间的储存，可以将抗体-HRP缀合物冻干并在≤-20℃下储存。

 

参考文献

Chromophore attachment to phycobiliprotein beta-subunits: phycocyanobilin:cysteine-beta84 phycobiliprotein lyase activity of CpeS-like protein from Anabaena Sp. PCC7120
Authors: Zhao KH, Su P, Li J, Tu JM, Zhou M, Bubenzer C, Scheer H.
Journal: J Biol Chem (2006): 8573

Excitation energy transfer from phycobiliprotein to chlorophyll d in intact cells of Acaryochloris marina studied by time- and wavelength-resolved fluorescence spectroscopy
Authors: Petrasek Z, Schmitt FJ, Theiss C, Huyer J, Chen M, Larkum A, Eichler HJ, Kemnitz K, Eckert HJ.
Journal: Photochem Photobiol Sci (2005): 1016

Single-molecule spectroscopy selectively probes donor and acceptor chromophores in the phycobiliprotein allophycocyanin
Authors: Loos D, Cotlet M, De Schryver F, Habuchi S, Hofkens J.
Journal: Biophys J (2004): 2598

Evaluation of Tolypothrix germplasm for phycobiliprotein content
Authors: Prasanna R, Prasanna BM, Mohammadi SA, Singh PK.
Journal: Folia Microbiol (Praha) (2003): 59

Isolation and characterisation of phycobiliprotein rich mutant of cyanobacterium Synechocystis sp
Authors: Prasanna R, Dhar DW, Dominic TK, Tiwari ON, Singh PK.
Journal: Acta Biol Hung (2003): 113

Co-ordinated expression of phycobiliprotein operons in the chromatically adapting cyanobacterium Calothrix PCC 7601: a role for RcaD and RcaG
Authors: Noubir S, Luque I, Ochoa de Alda JA, Perewoska I, Tandeau de Marsac N, Cobley JG, Houmard J.
Journal: Mol Microbiol (2002): 749

Phycobiliprotein genes of the marine photosynthetic prokaryote Prochlorococcus: evidence for rapid evolution of genetic heterogeneity
Authors: Ting CS, Rocap G, King J, Chisholm SW.
Journal: Microbiology (2001): 3171

Novel activity of a phycobiliprotein lyase: both the attachment of phycocyanobilin and the isomerization to phycoviolobilin are catalyzed by the proteins PecE and PecF encoded by the phycoerythrocyanin operon
Authors: Zhao KH, Deng MG, Zheng M, Zhou M, Parbel A, Storf M, Meyer M, Strohmann B, Scheer H.
Journal: FEBS Lett (2000): 9

Phycobiliprotein-Fab conjugates as probes for single particle fluorescence imaging
Authors: Triantafilou K, Triantafilou M, Wilson KM.
Journal: Cytometry (2000): 226

[Phycobiliprotein and fluorescence immunological assay]
Authors: Wu P.
Journal: Sheng Li Ke Xue Jin Zhan (2000): 82

 

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产品名称 货号
Buccutite 过氧化物酶（HRP）抗体偶联试剂盒 适合标记25ug蛋白 Cat#5505
Buccutite 过氧化物酶（HRP）抗体偶联试剂盒 适合标记1mg蛋白 Cat#5504

说明书
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Buccutite 过氧化物酶（HRP）抗体偶联试剂盒 适合标记100ug蛋白 货号5503-AAT Bioquest荧光染料

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Buccutite 过氧化物酶（HRP）抗体偶联试剂盒 适合标记100ug蛋白

Buccutite 过氧化物酶（HRP）抗体偶联试剂盒 适合标记100ug蛋白

Buccutite 过氧化物酶（HRP）抗体偶联试剂盒 适合标记100ug蛋白 货号5503 货号 5503 存储条件 在2-8度冷藏保存, 避免光照
规格 2 Labelings 价格 3108
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Buccutite 过氧化物酶（HRP）抗体标记试剂盒提供了一种以微观方式标记抗体的最便捷方法。蛋白质 – 蛋白质缀合通常用双功能接头（例如常用的SMCC）进行，在每个末端具有不同的反应性以连接两种不同的蛋白质。交联剂的一端（通过NHS酯）与氨基酸赖氨酸和N-末端中发现的胺（-NH2）反应，另一端（通过马来酰亚胺）与氨基酸中发现的硫醇基团（-SH）反应。半胱氨酸。然而，SMCC修饰的蛋白质极不稳定并且通常是自身反应性的，因为蛋白质通常含有胺和硫醇基团，其引起显着量的均聚交联。此外，量化蛋白质上马来酰亚胺基团的数量是相当困难和繁琐的。 Buccutite 过氧化物酶（HRP）抗体偶联试剂盒设计用于直接从蛋白质，肽和含有游离氨基的其他配体制备辣根过氧化物酶（HRP）偶联物。我们的试剂盒中提供的HRP已使用我们专有的接头Buccutite FOL预先激活，可直接用于缀合。 Buccutite FOL活化的HRP在极其温和的中性条件下容易与含有Buccutite MTA的分子反应，无需任何催化剂。与常用的SMCC和其他类似技术相比，我们的Buccutite 生物共轭系统更易于使用。它能够以更高的效率和产量实现生物分子的更快和定量缀合。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Buccutite 过氧化物酶（HRP）抗体偶联试剂盒。 

产品说明书

实验方案

操作步骤

1.运行Antibody-Buccutite MTA反应

1.1将抗体溶液直接加入到Buccutite MTA（组分B）的小瓶中，并通过反复移液几次将其充分混合或将小瓶涡旋几秒钟。

1.2将抗体-Buccutite MTA反应混合物在室温下保持30-60分钟。 注意：如果需要，抗体-Buccutite MTA反应混合物可以旋转或摇动更长时间。

 

2.制备抗体-HRP缀合物

2.1通过向Buccutite FOL活化的HRP（组分A）的小瓶中加入50μLddH2O制备Buccutite FOL活化的HRP溶液，通过反复移液几次充分混合或将小瓶涡旋几秒钟。

2.2将整瓶Buccutite FOL活化的HRP溶液混合到纯化的抗体-Buccutite MTA溶液（来自步骤纯化抗体-Buccutite MTA溶液）中，充分混合并在室温下旋转混合物1小时。

2.3抗体-HRP结合物现在可以使用了。 注意：立即使用时，抗体-HRP结合物需要用您选择的缓冲液稀释。 注意：对于长期储存，需要浓缩或冷冻干燥抗体-PE结合物溶液。

 

3.抗体-HRP共轭物的储存

抗体缀合物应在载体抗体（例如0.1％牛血清白蛋白）存在下以> 0.5mg / mL储存。 当在2mM叠氮化钠存在下储存并避光时，抗体-HRP缀合物溶液可以在4℃下储存两个月而没有显着变化。 对于更长时间的储存，可以将抗体-HRP缀合物冻干并在≤-20℃下储存。

 

参考文献

Chromophore attachment to phycobiliprotein beta-subunits: phycocyanobilin:cysteine-beta84 phycobiliprotein lyase activity of CpeS-like protein from Anabaena Sp. PCC7120
Authors: Zhao KH, Su P, Li J, Tu JM, Zhou M, Bubenzer C, Scheer H.
Journal: J Biol Chem (2006): 8573

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Authors: Petrasek Z, Schmitt FJ, Theiss C, Huyer J, Chen M, Larkum A, Eichler HJ, Kemnitz K, Eckert HJ.
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Authors: Prasanna R, Prasanna BM, Mohammadi SA, Singh PK.
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Authors: Ting CS, Rocap G, King J, Chisholm SW.
Journal: Microbiology (2001): 3171

Novel activity of a phycobiliprotein lyase: both the attachment of phycocyanobilin and the isomerization to phycoviolobilin are catalyzed by the proteins PecE and PecF encoded by the phycoerythrocyanin operon
Authors: Zhao KH, Deng MG, Zheng M, Zhou M, Parbel A, Storf M, Meyer M, Strohmann B, Scheer H.
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Authors: Triantafilou K, Triantafilou M, Wilson KM.
Journal: Cytometry (2000): 226

[Phycobiliprotein and fluorescence immunological assay]
Authors: Wu P.
Journal: Sheng Li Ke Xue Jin Zhan (2000): 82

 

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Buccutite AP（碱性磷酸酶）抗体偶联试剂盒*针对标记25 ug蛋白进行了优化* 货号5512-AAT Bioquest荧光染料

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Buccutite AP（碱性磷酸酶）抗体偶联试剂盒*针对标记25 ug蛋白进行了优化*

Buccutite AP（碱性磷酸酶）抗体偶联试剂盒*针对标记25 ug蛋白进行了优化*

货号 5512 存储条件 在2-8度冷藏保存, 避免光照
规格 2 Labelings 价格 3612
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

蛋白质-蛋白质缀合交联剂通常使用在每个末端具有不同反应性的双功能接头（例如SMCC）连接两个不同的蛋白质。交联剂的一端与赖氨酸和N端的胺（-NH2）反应（通过NHS酯），另一端与半胱氨酸的硫醇基（-SH）反应（通过马来酰亚胺）。但是，SMCC修饰的蛋白质极不稳定，通常会自反应，因为蛋白质包含多个胺基和硫醇基，会引起大量的交联。另外，定量蛋白质中的马来酰亚胺基团的数量是非常困难的。 Buccutite AP（碱性磷酸酶）抗体偶联试剂盒旨在快速制备具有预活化AP的AP偶联物。该试剂盒针对标记25 ug蛋白进行了优化。 Buccutite FOL活化的AP可以在极其温和的中性条件下与Buccutite MTA修饰的抗体轻松反应，而无需任何催化剂。与常用的SMCC和其他类似技术相比，Buccutite 生物缀合系统更加稳定并且易于使用。它能够以更高的效率和产量更快且定量地偶联生物分子。

 

图示

Buccutite AP（碱性磷酸酶）抗体偶联试剂盒*针对标记25 ug蛋白进行了优化* 货号5512

图1.使用Buccutite AP（碱性磷酸酶）抗体偶联试剂盒制备的ALP-山羊-抗小鼠IgG偶联物检测了小鼠IgG剂量曲线。将3倍系列稀释的小鼠IgG包被在96孔板上，然后按照标准ELISA方法，向每个孔中加入100uL GAM IgG-ALP偶联物（1ug / ml）。在孵育30分钟后，将pNPP底物溶液用于检测固定的小鼠IgG，并在400 nm处读数。

 

参考文献

Direct pulp capping with mineral trioxide aggregate: an immunohistologic comparison with calcium hydroxide in rodents.
Authors: Dammaschke, Till and Stratmann, Udo and Wolff, Philipp and Sagheri, Darius and Schäfer, Edgar
Journal: Journal of endodontics (2010): 814-9

Vitamins C and E inhibit apoptosis of cultured human term placenta trophoblast.
Authors: Tannetta, D S and Sargent, I L and Linton, E A and Redman, C W G
Journal: Placenta (2008): 680-90

Anti-alkaline phosphatase antibody positive myasthenia gravis.
Authors: Konishi, Tetsuro and Ohta, Kiyoe and Shigemoto, Kazuhiro and Ohta, Mitsuhiro
Journal: Journal of the neurological sciences (2007): 89-93

Ectopic expression of alkaline phosphatase in proximal tubular brush border membrane of human renal cell carcinoma.
Authors: Prasad, R and Lambe, S and Kaler, P and Pathania, S and Kumar, S and Attri, S and Singh, S K
Journal: Biochimica et biophysica acta (2005): 240-5

[Identification of antigens of Colombian Giardia duodenalis isolates recognized by total IgG and subclasses].
Authors: Hernández, Jenny Fabiola and Duque, Sofía and Arévalo, Adriana and Guerrero, Rafael and Nicholls, Rubén Santiago
Journal: Biomedica : revista del Instituto Nacional de Salud (2003): 263-73

Primary intrapelvic seminoma in Klinefelter’s syndrome.
Authors: Kurabayashi, A and Furihata, M and Matsumoto, M and Sonobe, H and Ohtsuki, Y and Aki, M and Kuwahara, M
Journal: Pathology international (2001): 624-8

Recombinant adenoviral vector-lipofectAMINE complex for gene transduction into human T lymphocytes.
Authors: Di Nicola, M and Milanesi, M and Magni, M and Bregni, M and Carlo-Stella, C and Longoni, P and Tomanin, R and Ravagnani, F and Scarpa, M and Jordan, C and Gianni, A M
Journal: Human gene therapy (1999): 1875-84

A nonradioactive method for localization of endothelin receptor mRNA in situ.
Authors: McEwan, P E and Valdenaire, O and Sutherland, L and Webb, D J and Gray, G A
Journal: Journal of cardiovascular pharmacology (1998): S443-6

Focus luminescence assay: macroscopically visualized foci of human cytomegalovirus and varicella zoster virus infection.
Authors: Heider, H and Schroeder, C
Journal: Journal of virological methods (1997): 311-6

Histological and immunohistochemical diversities, and proliferative activity and grading in osteosarcomas.
Authors: Hasegawa, T and Hirose, T and Seki, K and Hizawa, K and Ishii, S and Wakabayashi, J
Journal: Cancer detection and prevention (1997): 280-7

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Buccutite AP（碱性磷酸酶）抗体偶联试剂盒*针对标记25 ug蛋白进行了优化*.pdf

Buccutite 蛋白交联试剂盒 标记100ug抗体 货号1315-AAT Bioquest荧光染料

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Buccutite 蛋白交联试剂盒 标记100ug抗体

Buccutite 蛋白交联试剂盒 标记100ug抗体

Buccutite 蛋白交联试剂盒 标记100ug抗体 货号1315 货号 1315 存储条件 Multiple
规格 2 Labelings 价格 3924
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Buccutite 蛋白交联 抗体标记试剂盒提供了一种以微观方式标记抗体的最便捷方法。蛋白质 – 蛋白质缀合通常用双功能接头如SMCC进行。 SMCC的一端（通过NHS酯）与氨基酸赖氨酸和N-末端中发现的胺（-NH2）反应，另一端（通过马来酰亚胺）与氨基酸中发现的硫醇基团（-SH）反应。半胱氨酸。然而，SMCC修饰的蛋白质极不稳定并且通常是自身反应性的，因为蛋白质通常含有胺和硫醇基团，其引起显着量的均聚交联。此外，量化蛋白质上马来酰亚胺基团的数量是相当困难和繁琐的。 AAT Bioquest开发了一种方便有效的交联方法，将两种生物分子连接起来，具有高结合率。我们的方法使用一对交联剂：Buccutite MTA和Buccutite FOL。将MTA添加到一种蛋白质中，而将FOL添加到另一种蛋白质中。通过混合Protein-1-Buccutite MTA和Protein-2-Buccutite TM FOL引发蛋白质 – 蛋白质交联反应。这种交联反应在非常温和的中性条件下进行，不需要任何催化剂，并且它坚固且有效。Buccutite 蛋白交联抗体标记试剂盒是美国AAT Bioquest研发的产品。

产品说明书

实验方案

操作步骤

进行Protein-1 MTA反应

1.直接在Buccutite MTA（组分A）中加入105μL蛋白质-1溶液，并反复移液，以重复数次，或将小瓶涡旋数秒钟。

2.在室温下将蛋白质1-Buccutite™MTA抗体混合物在室温下旋转30-60分钟，然后将其旋转。或摇晃更长的时间。

3。通过脱盐柱纯化蛋白-1-Buccutite™MTA。

4。脱盐后计算出蛋白1-Buccutite™MTA的浓度为75％。（例如，蛋白质分离后以75μs沉淀，以100μm的纯度回收蛋白质，以粗粉回收。）

 

进行Protein-Buccutite™2 FOL反应

1.直接在Buccutite™FOL（组分B）中加入105μL蛋白质2溶液，涡旋小瓶几秒钟。

2.保持蛋白质2-Buccutite™FOL反应混合物在室温下放置30-60分钟。

3.通过脱盐柱纯化Proteinin-2-Buccutite™FOL。

4.计算脱盐后Protein-2-Buccutite™FOL的浓度为75％

 

纯化抗体-Buccutite MTA溶液

1将柱（来自步骤准备旋转柱用于抗体-Buccutite MTA纯化）置于干净的收集管（1.5mL，未提供）中。 小心地将样品（~105μL，来自Step Antibody-Buccutite MTA反应）直接加载到色谱柱中心。

2加载样品后，加入5μL1XPBS（pH 7.2-7.4），使总体积为110μL。 将柱以1,000xg离心5-6分钟，并收集含有所需抗体-Buccutite MTA溶液的溶液。

 

进行Protein-1 and Protein-2蛋白交联反应

1交联反应是通过将蛋白质1-Buccutite™MTA和蛋白质2-Buccutite™FOL混合在所需的摩尔比下开始的。通常，将Buccutite™FOL修饰的蛋白质2与Buccutite™MTA修饰的蛋白质-1在1.5-2.0摩尔浓度下的混合使用，可以使蛋白质在整个过程中随成本降低。

2将混合物在室温下旋转1至2小时，或在4°C的温度下过夜。在4°C的条件下可以存放。脱盐是可选操作。

 

可选：共轭纯化和分析

1.可以使用4-12％Bis-TisProteinGelina SDS运行缓冲液系统分析少量反应混合物（例如2〜4mg）以检测结合结果。

2.结合反应混合物包含所需的结合物与少量未连接的蛋白质2混合使用，如果需要，可以按需要使用适当的色谱图和纯度（所需的大小）。

 

准备离心柱进行纯化

1.将提供的离心柱（D）颠倒数次，以储存沉淀的凝胶并除去任何气泡。

2.摘下吸头，然后将色谱柱放入清洗管中（2 mL，未提供）。取下盖子，使多余的填料缓冲液在重力作用下流到凝胶床的顶部。如果色谱柱没有开始流动，则将盖子推回色谱柱，然后再次将其取下以开始流动。丢弃排干的缓冲液，然后将色谱柱放回清洗管中。如果将色谱柱放入12 x 75 mm试管（未提供）中，请立即离心。

3.在1,000 x g的旋转桶式离心机中离心2分钟（请参阅“离心注意事项”部分）以除去包装缓冲液，弃掉缓冲液。

4.将1-2 mL 1X PBS（pH 7.2-7.4）应用于色谱柱。每次施加PBS后，使缓冲液在重力作用下流失，或将色谱柱离心2分钟以除去缓冲液。丢弃收集管中的缓冲液，重复此过程3-4次。

5.在1,000 x g的旋转桶式离心机中离心2分钟（请参阅“离心注意事项”部分）以除去包装缓冲液。弃掉缓冲液。

6.将色谱柱放在干净的收集管（1.5 mL，未提供）中。小心地将样品（〜105 µL）直接加到色谱柱中心。

7.上样后，加入10 µL 1X PBS（pH 7.2-7.4），以1,000 xg离心色谱柱5-6分钟，并收集含有所需蛋白-1-Buccutite™MTA溶液或Protein-2-Buccutite™FOL溶液。

 

离心注意事项

1.旋转柱（组分D）可放入2 mL微量离心管或12 x 75 mm试管中，以在离心过程中收集样品。将2 mL微量管与色谱柱一起用于初始色谱柱平衡步骤。

2.可产生最小力为1,000 x g的摆动式离心机适用于Bio-Spin色谱柱。在特定转速下产生的重力是微量离心机转子半径的函数。有关从每分钟转数（RPM）转换为离心力或g力的信息，请参阅回转铲斗离心机说明手册。或者，使用以下公式来计算达到1,000 x g的重力所需的以RPM为单位的速度：

RCF (x g) = (1.12 x 10-5)×(RPM)×2×r 

（①RCF是相对离心力②r是从转子中心到Bio-Spin柱中间的半径，以厘米为单位③RPM是转子的速度）

 

图示

Buccutite 蛋白交联试剂盒 标记100ug抗体 货号1315

用1ug / ml小鼠IgG对照（绿色）或1ug / ml小鼠抗人HLA-ABC（W6 / 32 mAb）（红色）染色的HL-60细胞的流式细胞仪分析，然后是山羊抗小鼠IgG-用Buccutite™快速PE-Cy5串联抗体标记试剂盒（Cat＃1315）制备的PE-Cy5共轭物。

说明书
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Buccutite 过氧化物酶（HRP）抗体偶联试剂盒 适合标记1mg蛋白 货号5504-AAT Bioquest荧光染料

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Buccutite 过氧化物酶（HRP）抗体偶联试剂盒 适合标记1mg蛋白

Buccutite 过氧化物酶（HRP）抗体偶联试剂盒 适合标记1mg蛋白

Buccutite 过氧化物酶（HRP）抗体偶联试剂盒 适合标记1mg蛋白 货号5504 货号 5504 存储条件 在2-8度冷藏保存, 避免光照
规格 1 Labeling 价格 6252
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Buccutite 过氧化物酶（HRP）抗体标记试剂盒提供了一种以微观方式标记抗体的最便捷方法。蛋白质 – 蛋白质缀合通常用双功能接头（例如常用的SMCC）进行，在每个末端具有不同的反应性以连接两种不同的蛋白质。交联剂的一端（通过NHS酯）与氨基酸赖氨酸和N-末端中发现的胺（-NH2）反应，另一端（通过马来酰亚胺）与氨基酸中发现的硫醇基团（-SH）反应。半胱氨酸。然而，SMCC修饰的蛋白质极不稳定并且通常是自身反应性的，因为蛋白质通常含有胺和硫醇基团，其引起显着量的均聚交联。此外，量化蛋白质上马来酰亚胺基团的数量是相当困难和繁琐的。 Buccutite 过氧化物酶（HRP）抗体偶联试剂盒设计用于直接从蛋白质，肽和含有游离氨基的其他配体制备辣根过氧化物酶（HRP）偶联物。我们的试剂盒中提供的HRP已使用我们专有的接头Buccutite FOL预先激活，可直接用于缀合。 Buccutite FOL活化的HRP在极其温和的中性条件下容易与含有Buccutite MTA的分子反应，无需任何催化剂。与常用的SMCC和其他类似技术相比，我们的Buccutite 生物共轭系统更易于使用。它能够以更高的效率和产量实现生物分子的更快和定量缀合。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Buccutite 过氧化物酶（HRP）抗体偶联试剂盒。 

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实验方案

操作步骤

1.运行Antibody-Buccutite MTA反应

1.1将抗体溶液直接加入到Buccutite MTA（组分B）的小瓶中，并通过反复移液几次将其充分混合或将小瓶涡旋几秒钟。

1.2将抗体-Buccutite MTA反应混合物在室温下保持30-60分钟。 注意：如果需要，抗体-Buccutite MTA反应混合物可以旋转或摇动更长时间。

 

2.制备抗体-HRP缀合物

2.1通过向Buccutite FOL活化的HRP（组分A）的小瓶中加入50μLddH2O制备Buccutite FOL活化的HRP溶液，通过反复移液几次充分混合或将小瓶涡旋几秒钟。

2.2将整瓶Buccutite FOL活化的HRP溶液混合到纯化的抗体-Buccutite MTA溶液（来自步骤纯化抗体-Buccutite MTA溶液）中，充分混合并在室温下旋转混合物1小时。

2.3抗体-HRP结合物现在可以使用了。 注意：立即使用时，抗体-HRP结合物需要用您选择的缓冲液稀释。 注意：对于长期储存，需要浓缩或冷冻干燥抗体-HRP结合物溶液。

 

3.抗体-HRP共轭物的储存

抗体缀合物应在载体抗体（例如0.1％牛血清白蛋白）存在下以> 0.5mg / mL储存。 当在2mM叠氮化钠存在下储存并避光时，抗体-HRP缀合物溶液可以在4℃下储存两个月而没有显着变化。 对于更长时间的储存，可以将抗体-HRP缀合物冻干并在≤-20℃下储存。

 

参考文献

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