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Amplite West ECL HRP 底物 *Femto 灵敏度* 货号26100-AAT Bioquest荧光染料

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Amplite West ECL HRP 底物 *Femto 灵敏度*

Amplite West ECL HRP 底物 *Femto 灵敏度*

货号 26100 存储条件 在2-8度冷藏保存, 避免光照
规格 20 ml 价格 1140
Ex (nm) Em (nm)
分子量 N/A 溶剂
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：26100

产品名称：Amplite West ECL HRP 底物 *Femto 灵敏度*

规格：10ml

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量：N/A

外观：液体

溶剂：水

 

产品介绍

Amplite® West ECL HRP 底物是一种超灵敏的化学发光 (ECL) 底物，具有最高的灵敏度和稳定性。它用于检测 HRP 偶联抗体和硝酸纤维素或 PVDF 膜上的探针的过氧化物酶活性。该底物为检测以飞克水平表达的蛋白质提供了一种快速有效的方法。它不需要任何昂贵的仪器和耗材，并且与现有的蛋白质印迹常用仪器兼容。当与非常稀释和优化的抗体浓度和封闭缓冲液结合使用时，Amplite® West ECL HRP 底物可以检测少量的靶蛋白。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite West ECL HRP 底物。 

 

参考文献

Self-luminescent photodynamic therapy and pathogen detection for infectious diseases.
Authors: Zhang, Endong and Huang, Yiming and Wang, Shu
Journal: Drug delivery and translational research (2021): 1451-1455
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Authors: Liu, Guangyan and Li, Shiyu and Jiang, Zejun and Li, Jianping
Journal: Mikrochimica acta (2021): 33
Functional metabolomics reveal the role of AHR/GPR35 mediated kynurenic acid gradient sensing in chemotherapy-induced intestinal damage.
Authors: Wang, Di and Li, Danting and Zhang, Yuxin and Chen, Jie and Zhang, Ying and Liao, Chuyao and Qin, Siyuan and Tian, Yuan and Zhang, Zunjian and Xu, Fengguo
Journal: Acta pharmaceutica Sinica. B (2021): 763-780
Human platelets display dysregulated sepsis-associated autophagy, induced by altered LC3 protein-protein interaction of the Vici-protein EPG5.
Authors: Schwertz, Hansjörg and Rowley, Jesse W and Portier, Irina and Middleton, Elizabeth A and Tolley, Neal D and Campbell, Robert A and Eustes, Alicia S and Chen, Karin and Rondina, Matthew T
Journal: Autophagy (2021): 1-17
One-step grain pretreatment for ochratoxin A detection based on bipolar electrode-electrochemiluminescence biosensor.
Authors: Lu, Lixia and Yuan, Wei and Xiong, Qiang and Wang, Minhui and Liu, Yuanjian and Cao, Min and Xiong, Xiaohui
Journal: Analytica chimica acta (2021): 83-90
Analysis of Proteins by Immunoblotting.
Authors: Kielkopf, Clara L and Bauer, William and Urbatsch, Ina L
Journal: Cold Spring Harbor protocols (2021): pdb.prot102251
Raft-like lipid microdomains drive autophagy initiation via AMBRA1-ERLIN1 molecular association within MAMs.
Authors: Manganelli, Valeria and Matarrese, Paola and Antonioli, Manuela and Gambardella, Lucrezia and Vescovo, Tiziana and Gretzmeier, Christine and Longo, Agostina and Capozzi, Antonella and Recalchi, Serena and Riitano, Gloria and Misasi, Roberta and Dengjel, Joern and Malorni, Walter and Fimia, Gian Maria and Sorice, Maurizio and Garofalo, Tina
Journal: Autophagy (2021): 2528-2548
Platelet autophagic machinery involved in thrombosis through a novel linkage of AMPK-MTOR to sphingolipid metabolism.
Authors: Lee, Tzu-Yin and Lu, Wan-Jung and Changou, Chun A and Hsiung, Yuan-Chin and Trang, Nguyen T T and Lee, Cheng-Yang and Chang, Tzu-Hao and Jayakumar, Thanasekaran and Hsieh, Cheng-Ying and Yang, Chih-Hao and Chang, Chao-Chien and Chen, Ray-Jade and Sheu, Joen-Rong and Lin, Kuan-Hung
Journal: Autophagy (2021): 4141-4158
Fe-MOGs-based enzyme mimetic and its mediated electrochemiluminescence for in situ detection of H2O2 released from Hela cells.
Authors: Zong, Li-Ping and Ruan, Ling-Yu and Li, Junji and Marks, Robert S and Wang, Jun-Song and Cosnier, Serge and Zhang, Xue-Ji and Shan, Dan
Journal: Biosensors & bioelectronics (2021): 113216
Essential meiotic structure-specific endonuclease1 (EME1) promotes malignant features in gastric cancer cells via the Akt/GSK3B/CCND1 pathway.
Authors: Guo, Zhiguo and Liang, Erbo and Li, Wei and Jiang, Leilei and Zhi, Fachao
Journal: Bioengineered (2021): 9869-9884

说明书
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Amplite 比色法Bradford蛋白定量分析试剂盒 货号11118-AAT Bioquest荧光染料

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Amplite 比色法Bradford蛋白定量分析试剂盒

Amplite 比色法Bradford蛋白定量分析试剂盒

Amplite 比色法Bradford蛋白定量分析试剂盒 货号11118 货号 11118 存储条件 Multiple
规格 1000 Tests 价格 1200
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

传统的Bradford蛋白质检测法广泛用于定量蛋白质浓度。但是，许多市场的许多操作说明非常复杂繁琐。 我们的Amplite 比色法Braford蛋白定量检测试剂盒是一种用于测定总蛋白浓度的包含两组分且与洗涤剂兼容的测定方法。该检测法基于与Bradford蛋白质测定法相同的考马斯亮蓝G-250蛋白指示剂，并提供相当的准确性。我们专有的配方使我们的试剂盒更加方便快捷。在600 nm附近检测蛋白质信号，并在30分钟内完成测定。 Amplite 比色Braford蛋白定量分析试剂盒可以以方便的96孔板进行操作，无需分离步骤即可轻松实现自动化。

 

适用仪器

光吸收酶标仪  
吸收： 595nm
推荐孔板： 透明底板

产品说明书

样品分析方案

概述

准备Bradford工作溶液（50μL）
添加BSA标准品或检测样品（50μL）
在室温下孵育5-15分钟
读取595 nm处的吸光度

注：使用前，请在室温下解冻所有试剂盒组分。

 

标准溶液制备：

BSA标准溶液：

将20 µL的1 mg / mL BSA标准溶液（组分C）添加到480 µL的PBS（未提供）中，以生成40 µg / mL的BSA标准溶液（BS1）。然后在PBS中执行1：2连续稀释，以得到连续稀释的BSA标准BS2-BS7。注意：有必要为每个测定创建标准曲线。

  

操作步骤

表1.在透明的底96孔板中布置BSA标准品和测试样品。 BS = BSA标准品（BS1-BS7，40至0.625 µg / mL）; BL =空白控件； TS =测试样品

BS1 BS1 TS TS
BS2 BS2 … …
BS3 BS3    
BS4 BS4    
BS5 BS5    
BS6 BS6    
BS7 BS7    
BL BL    

表2:每个孔的试剂

孔 溶液体积 试剂
BS1-BS7 50 µL 系列稀释液（40-0.625 µg / mL）
BL 50 µL PBS
TS 50 µL 测试样品

1.根据表1和表2提供的布局准备BSA标准（BS），空白对照（BL）和检测样品（TS）。
2.向BSA标准品，空白对照和测试样品的每个孔中添加50 µL的Bradford工作溶液，以使总测定体积为100 µL /孔。
3.将反应在室温下孵育5至15分钟。
4.用酶标仪在OD 595 nm处读取吸光度。

 

图示

Amplite 比色法Bradford蛋白定量分析试剂盒 货号11118

图1.使用透明底96孔板，使用Amplite 比色法Bradford蛋白定量分析试剂盒测量BSA剂量响应。

  

参考文献

The Effects of a Concentrated Surfactant Gel on Biofilm EPS.
Authors: Salisbury, Anne-Marie and Chen, Rui and Mullin, Marc and Foulkes, Lauren and Percival, Steven L
Journal: Surgical technology international (2020): 31-35

The effect of Chinese wild blueberry fractions on the growth and membrane integrity of various foodborne pathogens.
Authors: Zhou, Tong-Tong and Wei, Cai-Hong and Lan, Wei-Qing and Zhao, Yong and Pan, Ying-Jie and Sun, Xiao-Hong and Wu, Vivian C H
Journal: Journal of food science (2020): 1513-1522

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Journal: Sichuan da xue xue bao. Yi xue ban = Journal of Sichuan University. Medical science edition (2020): 81-86

Augmented COlorimetric NANoplasmonic (CONAN) Method for Grading Purity and Determine Concentration of EV Microliter Volume Solutions.
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Journal: Frontiers in bioengineering and biotechnology (2019): 452

Combined Fluorimetric Caspase-3/7 Assay and Bradford Protein Determination for Assessment of Polycation-Mediated Cytotoxicity.
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Effect of nanoparticle size and PEGylation on the protein corona of PLGA nanoparticles.
Authors: Partikel, Katrin and Korte, Robin and Stein, Nora C and Mulac, Dennis and Herrmann, Fabian C and Humpf, Hans-Ulrich and Langer, Klaus
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Magnetic Nanoclusters Coated with Albumin, Casein, and Gelatin: Size Tuning, Relaxivity, Stability, Protein Corona, and Application in Nuclear Magnetic Resonance Immunoassay.
Authors: Khramtsov, Pavel and Barkina, Irina and Kropaneva, Maria and Bochkova, Maria and Timganova, Valeria and Nechaev, Anton and Byzov, Il’ya and Zamorina, Svetlana and Yermakov, Anatoly and Rayev, Mikhail
Journal: Nanomaterials (Basel, Switzerland) (2019)

Pilose Antler Extracts (PAEs) Protect against Neurodegeneration in 6-OHDA-Induced Parkinson’s Disease Rat Models.
Authors: Li, Chaohua and Sun, Yanan and Yang, Weifeng and Ma, Shuhua and Zhang, Lili and Zhao, Jing and Zhao, Xin and Wang, Yi
Journal: Evidence-based complementary and alternative medicine : eCAM (2019): 7276407

Rhubarb-Evoke Mucus Secretion through Aggregation and Degranulation of Mast Cell in the Colon of Rat: In vivo and ex vivo studies.
Authors: Wu, Di and Xue, Xiaowei and Gao, Chenchen and Liu, Yuehong and Wang, Tiantian and Li, Lisheng and Tong, Xuehong and Li, Feng and Xu, Jingdong
Journal: Scientific reports (2019): 19375

Serum type and concentration both affect the protein-corona composition of PLGA nanoparticles.
Authors: Partikel, Katrin and Korte, Robin and Mulac, Dennis and Humpf, Hans-Ulrich and Langer, Klaus
Journal: Beilstein journal of nanotechnology (2019): 1002-1015

说明书
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Amplite 比色法丙二醇（MDA）定量试剂盒 货号10070-AAT Bioquest荧光染料

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Amplite 比色法丙二醇（MDA）定量试剂盒

Amplite 比色法丙二醇（MDA）定量试剂盒

Amplite 比色法丙二醇（MDA）定量试剂盒 货号10070 货号 10070 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 4584
Ex (nm) 695 Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 比色法丙二醇（MDA）定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的荧光染料。丙二醛（MDA）是脂质过氧化的天然副产物，被广泛用作确定氧化应激和自由基形成的关键指标。 历史上，MDA的测量依赖于与硫代巴比妥酸（TBA）的反应，得到可以在532nm下比色测量或在Ex / Em = 530nm / 550nm下荧光测定的化合物。 但该测定不是MDA特异性的，也是在90-100℃的酸性条件下进行的。 已经有许多商业ELISA试剂盒，这使得它更加昂贵和繁琐。 Amplite 比色丙二醛（MDA）定量试剂盒提供了最快速，最方便的MDA测量方法，无需TBARS加热步骤。 MDA Blue 与MDA反应生成蓝色产物，用吸光度酶标仪在695nm处测量。 该测定法对MDA非常快速且特异，几乎不受其他醛的干扰。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 比色法丙二醇（MDA）定量试剂盒。 

 

适用仪器

光吸收酶标仪  
吸收： 695nm
推荐孔板： 透明底板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备测试样品和连续稀释的MDA标准品（50μL）
2.添加MDA Blue 原液（10μL）
3.在室温下孵育10-30分钟
4.加入反应溶液（40μL）
5.监测OD增加至695nm

 

溶液制备

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1. MDA标准溶液（100 mM）：
将100μLDdH2O加入MDA标准小瓶（组分C）中以制备100mM MDA储备溶液。

 

2.标准溶液

2.1MDA标准
将4μL100mMMDA标准品加入996μL稀释缓冲液（组分B）中，得到400μMMDA溶液（MDA7）。 然后在稀释缓冲液中进行1：2连续稀释，得到连续稀释的MDA标准品（MDA6-MDA1）。

  

样品分析

表1. 96孔透明底微孔板中MDA标准品和测试样品的布局。 MDA = MDA标准品（MDA1-MDA7,6.25至400μM），BL =空白对照，TS =测试样品。

BL BL TS TS
MDA1 MDA1 … …
MDA2 MDA2 … …
MDA3 MDA3    
MDA4 MDA4    
MDA5 MDA5    
MDA6 MDA6    
MDA7 MDA7    

表2.每个孔的试剂组成

孔 容积 试剂
MDA1-MDA7 50ul 连续稀释（6.25至400μM）
BL 50ul 稀释缓冲液（组分B）
TS 50ul 测试样品

1.根据表1和2中提供的布局制备MDA标准品（MDA），空白对照品（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25μL试剂代替50μL。

2.将10μLMDABlue （组分A）溶液加入MDA标准品，空白对照和测试样品的每个孔中。 对于384孔板，每孔使用5μLMDABlue 溶液。

3.将反应混合物在室温下孵育10-30分钟。

4.加入40μL反应溶液（组分D），使总测定体积为100μL/孔。 对于384孔板，使用20μL反应溶液，总测定体积为50μL/孔。

5.将最终反应混合物在室温下孵育30-60分钟。

6.用吸光度板读数器监测吸光度增加，在OD为695~700nm时进行路径校正校正。

 

参考文献

Assessment of lipid peroxidation by measuring malondialdehyde (MDA) and relatives in biological samples: Analytical and biological challenges.
Authors: Tsikas D.
Journal: Anal Biochem (2016)

Development, validation and biomedical applications of stable-isotope dilution GC-MS and GC-MS/MS techniques for circulating malondialdehyde (MDA) after pentafluorobenzyl bromide derivatization: MDA as a biomarker of oxidative stress and its relation to 15(S)-8-iso-prostaglandin F2alpha and nitric oxide (NO)
Authors: Tsikas D, Rothmann S, Schneider JY, Suchy MT, Trettin A, Modun D, Stuke N, Maassen N, Frolich JC.
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Formation of Malondialdehyde, 4-Hydroxynonenal, and 4-Hydroxyhexenal during in Vitro Digestion of Cooked Beef, Pork, Chicken, and Salmon
Authors: Steppeler C, Haugen JE, Rodbotten R, Kirkhus B.
Journal: J Agric Food Chem (2016): 487

Plasma malondialdehyde as biomarker of lipid peroxidation: effects of acute exercise
Authors: Spirlandeli AL, Deminice R, Jordao AA.
Journal: Int J Sports Med (2014): 14

A specific, accurate, and sensitive measure of total plasma malondialdehyde by HPLC
Authors: Moselhy HF, Reid RG, Yousef S, Boyle SP.
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Antioxidant properties of Krebs cycle intermediates against malonate pro-oxidant activity in vitro: a comparative study using the colorimetric method and HPLC analysis to determine malondialdehyde in rat brain homogenates
Authors: Puntel RL, Roos DH, Grotto D, Garcia SC, Nogueira CW, Rocha JB.
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Malondialdehyde as biomarker of oxidative damage to lipids caused by smoking
Authors: Lykkesfeldt J.
Journal: Clin Chim Acta (2007): 50

Rapid quantification of malondialdehyde in plasma by high performance liquid chromatography-visible detection
Authors: Grotto D, Santa Maria LD, Boeira S, Valentini J, Charao MF, Moro AM, Nascimento PC, Pomblum VJ, Garcia SC.
Journal: J Pharm Biomed Anal (2007): 619

[Glaucoma and oxidative stress. Determination of malondialdehyde–a product of lipid peroxidation]
Authors: Faschinger C, Schmut O, Wachswender C, Mossbock G.
Journal: Ophthalmologe (2006): 953

Salivary thiobarbituric acid reacting substances and malondialdehyde–their relationship to reported smoking and to parodontal status described by the papillary bleeding index
Authors: Celec P, Hodosy J, Celecova V, Vodrazka J, Cervenka T, Halcak L, Bozek P, Kopani M, Kudela M.
Journal: Dis Markers (2005): 133

 

相关产品

产品名称 货号
Amplite 荧光法法丙二醇（MDA）定量试剂盒 Cat#10071
Amplite 乙醇定量试剂盒 Cat#40001
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说明书
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Amplite NADH检测试剂盒(比色法) 货号15271-AAT Bioquest荧光染料

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Amplite NADH检测试剂盒(比色法)

Amplite NADH检测试剂盒(比色法)

Amplite NADH检测试剂盒(比色法) 货号15271 货号 15271 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 400 Tests 价格 3264
Ex (nm) 460 Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite NADH检测试剂盒(比色法)是美国AAT Bioquest研发的检测NADH的试剂盒，烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD +）和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADP +）是细胞中发现的两种重要的辅因子。 NADH是NAD +的还原形式。 NAD形成NADP，通过酯键将磷酸基团添加到腺苷核苷酸的2’位置。 传统的NAD / NADH和NADP / NADPH测定基于监测340nm处NADH或NADPH吸收的变化。 NAD / NADH和NADP / NADPH测定的短紫外波长使得传统方法具有低灵敏度和高干扰。 AAT Bioquest的Amplite 比色NADH检测试剂盒为检测NADH提供了一种便捷的方法。 NADH探针是一种生色传感器，在NADH减少时具有460nm的最大吸光度。 NADH探针的吸收与溶液中NADH的浓度成正比。 Amplite 比色NADH分析试剂盒提供灵敏的分析，可在100μL分析体积中检测低至3μM的NADH。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的NADH检测试剂盒。 

 

适用仪器

光吸收酶标仪  
吸收： 460nm
推荐孔板： 透明底板

产品说明书

96孔板检测示例

概述

准备NADH反应混合物（50μL）

加入NADH标准品或测试样品（50μL）

在室温下孵育持续15分钟至2小时

监测460nm处的吸光度

注意：在开始实验之前，在室温下解冻每个试剂盒组分中的一个

 

操作步骤

1.准备NADH储备溶液：

将200μLPBS缓冲液加入到NADH标准品（组分C）的小瓶中以制备1mM（1nmol / L）NADH储备溶液。

注意：未使用的NADH储备溶液应分成单次使用的等分试样并储存在-20℃。

 

2.准备NADH反应混合物：

将1mL NADH探针（组分A）加入4mL NADH测定缓冲液（组分B）中，并充分混合。

注意：5mL NADH反应混合物用于一个96孔。未使用的NADH反应混合物应分成单次使用的等分试样并储存在-20℃。

 

3.准备NADH标准品的系列稀释液（0至100μM）：

3.1将100μL的NADH储备溶液（来自步骤1）加入到400μLPBS缓冲液（pH 7.4）中，以产生200μM（100pmol / L）NADH标准溶液。 注意：稀释的NADH标准溶液不稳定，应在4小时内使用。

3.2取200μL的200μMNADH标准溶液进行1：2连续稀释，得到NADH标准品的100,50,25,12.5,6.25,3.13和0μM连续稀释液。

3.3如表1和2所述，将NADH标准品和含有NADH的测试样品的系列稀释液加入白色/透明底96孔板中。

注意：根据需要制备细胞或组织样品。

 

表1.白色/透明底96孔微孔板中NADH标准品和测试样品的布局

BL

BL

TS

TS

NS1

NS1

….

….

NS2

NS2

 

 

NS3

NS3

 

 

NS4

NS4

 

 

NS5

NS5

 

 

NS6

NS6

 

 

NS7

NS7

 

  

注意：NS = NADH标准，BL =空白对照，TS =测试样品。

 

表2.每个孔的试剂

孔 体积 试剂
NS1 – NS7 50 µL 连续稀释 (3.13 to 200 µM)
BL 50 µL PBS
TS 50 µL 测试样品

*注意：将连续稀释的NADH标准品（3.13μM至200μM）加入NS1至NS7的孔中，一式两份。

 

4.在上清液反应中运行NADH测定：

4.1将50μL的NADH反应混合物（来自步骤2）加入NADH标准品，空白对照和测试样品的每个孔中（参见步骤3.3），使总NADH测定体积为100μL/孔

注意1：对于384孔板，每孔加入25μL样品和25μLNADH反应混合物。

注意2：根据需要准备细胞或组织样本。 为方便起见，裂解缓冲液（组分D）可用于裂解细胞。（详见附录）。

4.2在室温下孵育反应15分钟至2小时，避光。

4.3用吸光度读板仪在460 nm处检测吸光度的增加。

 

数据分析

        空白孔中的吸光度（仅用PBS缓冲液）用作对照，并从具有NADH反应的那些孔的值中减去。 NADH标准曲线如图1所示。

Amplite NADH检测试剂盒(比色法) 货号15271

图1。 使用SpectraMax酶标仪（Molecular devices），在96孔白色/透明底板中用Amplite ™比色NADH测定试剂盒测量NADH剂量反应。 孵育30分钟（n = 3）可以检测到低至3μM的NADH，在460nm处测量吸光度。

 

附录：使用组分G（NAD / NADH裂解缓冲液）的测试样品制剂

 

1.植物细胞样品：

用裂解缓冲液以200mg / mL均化，并以2500rpm离心5-10分钟，使用上清液进行测试。

 

2.细菌样品：

离心收集细菌细胞（（10,000 g，0°C，15 min）。使用约1亿至1千万细胞/ mL裂解缓冲液，将处理后的溶液在室温下保持15分钟。以2500 rpm离心5分钟， 用上清液进行试验。

 

3.哺乳动物细胞样本：

从平板孔中取出培养基，每1-5百万个细胞使用约100μL裂解缓冲液（或在96孔细胞培养板中使用50-100μL/孔），并将处理过的溶液在室温下保持15分钟。 直接使用细胞裂解液或以1500 rpm离心5分钟，使用上清液进行测试。

 

4.组织样品：

称取约20mg组织，用冷PBS洗涤。 在微量离心管中用400μl裂解缓冲液均化。 以2500rpm离心5-10分钟，使用上清液进行测定。

 

参考文献

Celastrol attenuates angiotensin II mediated human umbilical vein endothelial cells damage through activation of Nrf2/ERK1/2/Nox2 signal pathway
Authors: Miao Li, Xin Liu, Yongpeng He, Qingyin Zheng, Min Wang, Yu Wu, Yuanpeng Zhang, Chaoyun Wang
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Cytosolic Redox Status of Wine Yeast (Saccharomyces Cerevisiae) under Hyperosmotic Stress during Icewine Fermentation
Authors: Fei Yang, Caitlin Heit, Debra L Inglis
Journal: Fermentation (2017): 61

Epigenetic regulation of Runx2 transcription and osteoblast differentiation by nicotinamide phosphoribosyltransferase
Authors: Min Ling, Peixin Huang, Shamima Islam, Daniel P Heruth, Xuanan Li, Li Qin Zhang, Ding-You Li, Zhaohui Hu, Shui Qing Ye
Journal: Cell & Bioscience (2017): 27

MCU-dependent mitochondrial Ca2+ inhibits NAD+/SIRT3/SOD2 pathway to promote ROS production and metastasis of HCC cells
Authors: T Ren, H Zhang, J Wang, J Zhu, M Jin, Y Wu, X Guo, L Ji, Q Huang, H Yang
Journal: Oncogene (2017)

Metabolic and molecular insights into an essential role of nicotinamide phosphoribosyltransferase
Authors: Li Q Zhang, Leon Van Haandel, Min Xiong, Peixin Huang, Daniel P Heruth, Charlie Bi, Roger Gaedigk, Xun Jiang, Ding-You Li, Gerald Wyckoff
Journal: Cell Death & Disease (2017): e2705

Pyrroloquinoline Quinone, a Redox-active o-Quinone, Stimulates Mitochondrial Biogenesis by Activating SIRT1/PGC-1α Signaling Pathway
Authors: Kazuhiro Saihara, Ryosuke Kamikubo, Kazuto Ikemoto, Koji Uchida, Mitsugu Akagawa
Journal: Biochemistry (2017)

Resveratrol attenuates excessive ethanol exposure induced insulin resistance in rats via improving NAD+/NADH ratio
Authors: Gang Luo, Bingqing Huang, Xiang Qiu, Lin Xiao, Ning Wang, Qin Gao, Wei Yang, Liping Hao
Journal: Molecular Nutrition & Food Research (2017)

A Snapshot of the Plant Glycated Proteome STRUCTURAL, FUNCTIONAL, AND MECHANISTIC ASPECTS
Authors: Tatiana Bilova, Elena Lukasheva, Dominic Brauch, Uta Greifenhagen, Gagan Paudel, Elena Tarakhovskaya, Nadezhda Frolova, Juliane Mittasch, Gerd Ulrich Balcke, Alain Tissier
Journal: Journal of Biological Chemistry (2016): 7621–7636

AMPK activation protects cells from oxidative stress-induced senescence via autophagic flux restoration and intracellular NAD+ elevation
Authors: Xiaojuan Han, Haoran Tai, Xiaobo Wang, Zhe Wang, Jiao Zhou, Xiawei Wei, Yi Ding, Hui Gong, Chunfen Mo, Jie Zhang
Journal: Aging cell (2016): 416–427

Cell-Line Selectivity Improves the Predictive Power of Pharmacogenomic Analyses and Helps Identify NADPH as Biomarker for Ferroptosis Sensitivity
Authors: Kenichi Shimada, Miki Hayano, Nen C Pagano, Brent R Stockwell
Journal: Cell chemical biology (2016): 225–235

 

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说明书
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Amplite 比色法过氧化酶检测试剂盒 蓝色 货号11551-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Amplite 比色法过氧化酶检测试剂盒 蓝色

Amplite 比色法过氧化酶检测试剂盒 蓝色

Amplite 比色法过氧化酶检测试剂盒 蓝色 货号11551 货号 11551 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 500 Tests 价格 2604
Ex (nm) 664 Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 比色法过氧化酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于过氧化物酶的试剂盒，过氧化酶是常用于与抗体按4:1比例结合的小分子(MW ~40 KD)。由于分子量小，因此在与抗体、抗原结合形成复合物时不会带来空间阻碍。与其它酶标签相比，过氧化酶也更便宜；其主要缺点是在保护剂（例如叠氮化钠）存在的条件下溶解性低；而在低浓度下，过氧化酶的活性低。HRP偶联物是广泛用作ELISA（酶联免疫吸附实验）、免疫组化技术、Northern、 Southern和Western blot分析的第二个检测试剂。Amplite比色法过氧化酶检测试剂盒 *蓝色* 提供了一种快速(10分钟)HRP一步法均质的、无需洗脱的分析方案。本试剂盒使用Amplite Blue，我们的超灵敏HRP显色底物，即Amplite Blue作为过氧化酶的显色底物，它比双氧水和过氧化酶及其它的过氧化酶的显色底物（例如TMB, ABTS, OPD 和K-Blue）具有更高的灵敏度。Amplite Blue产生高吸收物质，在664nm处有最大吸收峰。这种近红外吸收使自动化检测生物样品时本底吸收很小。本试剂盒可以用于ELISA，酶促反应动力学分析，氧化酶抑制剂高通量筛选等。试剂盒经过最优化处理，并且可用于高通量液体处理设备。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 比色法过氧化酶检测试剂盒。 

 

适用仪器

光吸收酶标仪  
吸收： 664 ± 5 nm
推荐孔板： 透明底板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备HRP工作溶液（50μL）
2.添加HRP标准品和/或测试样品（50μL）
3.在室温下孵育10-30分钟
4.监测664±5 nm的吸光度

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1 Amplite 蓝色过氧化物酶底物储备液（100X）：
将250μLDMSO（组分E）加入到Amplite 蓝色底物（组分A）的小瓶中以制备100X Amplite 蓝色过氧化物酶底物储备溶液。

1.2 HRP标准溶液（20 U / mL）：
将1mL测定缓冲液（组分C）加入到HRP小瓶（组分D）中以制备20U / mL HRP储备溶液。

1.3 H2O2溶液（20 mM）：
将22.7μL的3％H2O2（0.88M，组分B）加入977μL的测定缓冲液（组分C）中以制备20mM H2O2溶液。 注意：稀释的H2O2溶液不稳定。 应丢弃未使用的部分。

 

2.标准溶液

HRP标准
将15μL的20U / mL HRP溶液加入985μL的测定缓冲液（组分C）中，得到300mU / mL的HRP标准溶液（SD7）。 取300 mU / mL HRP标准溶液（SD7），进行1：3连续稀释，得到连续稀释的HRP标准品（SD6 – SD1）和分析缓冲液（组分C）。

 

3.工作溶液

将50μL的Amplite Blue Peroxidase Substrate储备液（100X）和50μL的H2O2储备溶液（20 mM）加入到4.9 mL的分析缓冲液（组分C）中，使总体积为5 mL的HRP工作溶液，避光。

 

样品分析

表1.白壁/透明底96孔微孔板中HRP标准品和测试样品的布局。 SD = HRP标准品（SD1-SD7,0.3至300 mU / mL）; BL =空白对照; TS =测试样品。

BL BL TS TS
SD1 SD1 … …
SD2 SD2 … …
SD3 SD3    
SD4 SD4    
SD5 SD5    
SD6 SD6    
SD7 SD7    

表2.每个孔的试剂组成

孔 容积 试剂
SD1-SD7 50ul 连续稀释（0.3至300 mU / mL）
BL 50ul 分析缓冲液（组分C）
TS 50ul 测试样本

1.根据表1和2中提供的布局制备HRP标准品（SD），空白对照品（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25μL试剂代替50μL。

2.向HRP标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入50μLHRP工作溶液，使总HRP测定体积为100μL/孔。 对于384孔板，在每个孔中加入25μLHRP工作溶液，总体积为50μL/孔。

3.在室温下孵育反应30至60分钟，避光。

4.用吸光度读板仪在664±5nm下监测吸光度。

 

参考文献

Enzymatic oxidation of dipyridamole in homogeneous and micellar solutions in the horseradish peroxidase-hydrogen peroxide system
Authors: Almeida LE, Imasato H, Tabak M.
Journal: Biochim Biophys Acta (2006): 216

Horseradish peroxidase-driven fluorescent labeling of nanotubes with quantum dots
Authors: Didenko VV, Baskin DS.
Journal: Biotechniques (2006): 295

Recent advances in catalytic peroxidase histochemistry
Authors: Krieg R, Halbhuber KJ.
Journal: Cell Mol Biol (Noisy-le-grand) (2003): 547

Vesicular transport route of horseradish C1a peroxidase is regulated by N- and C-terminal propeptides in tobacco cells
Authors: Matsui T, Nakayama H, Yoshida K, Shinmyo A.
Journal: Appl Microbiol Biotechnol (2003): 517

Development of a novel enzyme/prodrug combination for gene therapy of cancer: horseradish peroxidase/indole-3-acetic acid
Authors: Greco O, Folkes LK, Wardman P, Tozer GM, Dachs GU.
Journal: Cancer Gene Ther (2000): 1414

Preparation, morphological characterization, and activity of thin films of horseradish peroxidase
Authors: Vianello F, Zennaro L, Di Paolo ML, Rigo A, Malacarne C, Scarpa M.
Journal: Biotechnol Bioeng (2000): 488

Synthesis and purification of horseradish peroxidase-labeled oligonucleotides for tyramide-based fluorescence in situ hybridization
Authors: van Gijlswijk RP, van de Corput MP, Bezrookove V, Wiegant J, Tanke HJ, Raap AK.
Journal: Histochem Cell Biol (2000): 175

Evidence for free radical formation during the oxidation of 2′-7′-dichlorofluorescin to the fluorescent dye 2′-7′-dichlorofluorescein by horseradish peroxidase: possible implications for oxidative stress measurements
Authors: Rota C, Chignell CF, Mason RP.
Journal: Free Radic Biol Med (1999): 873

In situ identification of cyanobacteria with horseradish peroxidase-labeled, rRNA-targeted oligonucleotide probes
Authors: Schonhuber W, Zarda B, Eix S, Rippka R, Herdman M, Ludwig W, Amann R.
Journal: Appl Environ Microbiol (1999): 1259

Relative number of cells projecting from contralateral and ipsilateral nucleus isthmi to loci in the optic tectum is dependent on visuotopic location: horseradish peroxidase study in the leopard frog
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Journal: J Comp Neurol (1999): 212

 

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