Amplite 比色法丙三醇检测试剂盒

	货号	13832	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照, 避免受潮
	规格	200 Tests	价格	4584
	Ex (nm)	575	Em (nm)
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Amplite 比色法丙三醇检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测丙三醇的试剂盒，甘油是肝脏和脂肪组织中合成甘油三酯和磷脂的前体。 禁食时，储存在这些脂滴中的甘油三酯可被水解以产生游离甘油和脂肪酸。 释放到血流中的游离甘油的量与甘油三酯/脂肪酸循环速率成正比，甘油三酯/脂肪酸循环速率在代谢调节和热量产生中是重要的。 Amplite 比色甘油测定试剂盒为测量生物样品中的甘油水平提供了一种灵敏的测定方法。 该测定基于甘油的酶偶联反应，其中在HRP偶联反应中使用我们的Amplite Red HRP底物可以检测产物过氧化氢。 信号可以使用OD575nm的吸光度酶标仪进行测量。 使用这种比色甘油测定试剂盒，我们能够在100μL反应体积中检测到低至0.15μg/ mL（〜1.6μM）的甘油。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 比色法丙三醇检测试剂盒。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备甘油工作溶液（50 µL）
2.加入甘油标准品或测试样品（50 µL）
3.在室温下孵育30分钟至1小时
4.监测575 nm的OD

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 Amplite HRP底物储备液（200X）：
将50 µL DMSO（组分E）添加到Amplite HRP底物（组分A）的小瓶中，制成200X储备溶液。

1.2 甘油标准溶液：
将1 mL ddH2O或1X PBS缓冲液添加到小瓶甘油标准品（组分D）中，制成1 mg / mL甘油标准液。

2.标准溶液

甘油标准
将10 µL甘油标准储备溶液（1 mg / mL）加入990 µL 1X PBS缓冲液中，以生成10 µg / mL标准溶液（G7）。 然后进行1：2的系列稀释，以获得系列稀释的甘油标准品（G6-G1）。

3.工作溶液

3.1 将5 mL测定缓冲液（组分C）添加到一瓶酶混合物（组分B）中，并充分混合。

3.2 将25 µL Amplite HRP底物原液添加到组分B + C的瓶子中，并充分混合以制成甘油工作溶液（组分A + B + C）。 注意：此甘油工作溶液足以用于一个96孔板。 它不稳定，请及时使用。 注意：可以将未使用的B + C组分分成一次性使用的等分试样，并保存在-20°C下。

样品操作及实验分析

表1.透明底部96孔微孔板中甘油标准品和测试样品的布局。 G =甘油标准品（G1-G7，0.156至10 µg / mL），BL =空白对照，TS =测试样品。

表2.每个孔的试剂组成

1.根据表1和2中提供的布局，准备甘油标准品（G），空白对照（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25 µL试剂代替50 µL。

2.在甘油标准品，空白对照和测试样品的每个孔中添加50 µL甘油工作溶液，以使总甘油测定体积为100 µL /孔。 对于384孔板，应在每个孔中添加25 µL甘油工作溶液，总体积为50 µL /孔。

3.避光保存，室温下孵育反应30分钟至1小时。

4.用吸光度板读数器监测吸光度的增加，并在575 nm的OD处进行路径检查。

参考文献

An alcohol oxidase of Phanerochaete chrysosporium with a distinct glycerol oxidase activity
Authors: Linke D, Lehnert N, Nimtz M, Berger RG.
Journal: Enzyme Microb Technol (2014): 7

Bioelectrocatalytic sensor for triglycerides in human skin sebum based on enzymatic cascade reaction of lipase, glycerol kinase and glycerophosphate oxidase
Authors: Jeong CY, Han YD, Yoon JH, Yoon HC.
Journal: J Biotechnol (2014): 7

Epigallocatechin-3-gallate (EGCG) inhibits 3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA reductase in the presence of glycerol
Authors: Wu Q, Li JZ, Zhao TY, Li TB, Wang JX, Sui Y.
Journal: Pak J Pharm Sci (2014): 1905

Functional characterization of Yersinia pestis aerobic glycerol metabolism
Authors: Willias SP, Chauhan S, Motin VL.
Journal: Microb Pathog (2014): 33

Identification and glycerol-induced correction of misfolding mutations in the X-linked mental retardation gene CASK
Authors: LaConte LE, Chavan V, Mukherjee K.
Journal: PLoS One (2014): e88276

Isolation of peripheral blood mononuclear cells using glycerol density gradient
Authors: Aimola IA, Inuwa HM, Nok AJ, Mamman AI, Habila N, Muhammad A, Ndidi US, Ignatius B, Jande PL, Oghor R, Isaac LC, Afolabi-Balogun NB.
Journal: Cell Biochem Biophys (2014): 583

Quantitative analysis of glycerol levels in human urine by liquid chromatography-tandem mass spectrometry
Authors: Dong Y, Ma Y, Yan K, Shen L, Wang X, Xu Y, He G, Wu Y, Lu J, Yang Z, Feng F.
Journal: J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci (2014): 30

Rapid monitoring of glycerol in fermentation growth media: Facilitating crude glycerol bioprocess development
Authors: Abad S, Perez X, Planas A, Turon X.
Journal: Talanta (2014): 210

Synthesis of substituted 1,3-diesters of glycerol using wittig chemistry
Authors: Lowe HI, Toyang NJ, Watson CT, Bryant J.
Journal: Nat Prod Commun (2014): 687

The glycoglycerolipid 1,2-dipalmitoyl-3-(N-palmitoyl-6′-amino-6′-deoxy-alpha-d-glucosyl)-sn-glycerol is no inhibitor of the human Myt1 kinase
Authors: Rohe A, Gollner C, Erdmann F, Sippl W, Schmidt M.
Journal: J Enzyme Inhib Med Chem (2014): 514

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Amplite 胆碱定量试剂盒

	货号	40007	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 Tests	价格	2604
	Ex (nm)	571	Em (nm)	584
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

胆碱及其代谢产物在细胞膜的结构完整性和信号传导以及胆碱能神经传递（乙酰胆碱合成）中起着重要作用。它是通过其代谢产物三甲基甘氨酸参与S-腺苷甲硫氨酸合成途径而获得甲基的主要来源。胆碱缺乏症可能导致肝脏疾病，动脉粥样硬化以及可能的神经系统疾病。尽管胆碱在中枢神经系统中作为乙酰胆碱和膜磷脂酰胆碱的前体具有重要作用，但胆碱在精神疾病中的作用尚未得到研究。该Amplite 胆碱定量试剂盒提供了最灵敏的胆碱定量方法之一。该试剂盒使用Amplite Red量化胆碱的浓度，这与胆碱氧化酶介导的酶偶联反应中过氧化氢的产生有关。胆碱的量与在酶偶联反应循环中形成的过氧化氢的浓度成比例。在存在过氧化物酶的情况下，Amplite Red的荧光强度与过氧化氢的形成成比例，该过氧化氢转化为胆碱的浓度。该测定可以容易地用荧光酶标仪读取，或者也可以使用光吸收酶标仪在〜570 nm处读取测定值。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 胆碱定量试剂盒。

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产品说明书

样品实验方案

简要概述

1. 准备并添加胆碱标准品和/或测试样品（50 µL）
2. 准备并添加胆碱测定工作溶液（50 µL）
3. 在室温下孵育15-60分钟
4. 检测Ex / Em = 540/590nm时的荧光强度

 

溶液配制

储备溶液配制

1. Amplite Red储备液（250X）：将40 µL DMSO（组分E）添加到Amplite Red底物（组分A）的小瓶中，应立即使用储备溶液。应将所有剩余的溶液等分，并在-20^oC重新冷冻。注意1：避免重复冻融循环。注意2：在存在硫醇（例如二硫苏糖醇（DTT）和2-巯基乙醇）的情况下，Amplite Red底物不稳定。反应中DTT或2-巯基乙醇的终浓度应不高于10 µM。Amplite Red底物在高pH（> 8.5）下也不稳定。因此，反应应在pH 7-8下进行。建议使用提供的测定缓冲液（pH 7.4）。

2.胆碱标准储备液（50 mM）：将400 µL ddH₂O加入胆碱标准液（组分C）的小瓶中，并充分混合。注意：未使用的胆碱储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在-20^oC下储存。

 

标准溶液配制

将20 µL胆碱标准储备液（50mM）加到980 µL分析缓冲液（组分D）中，生成1000 µM标准溶液。注意：  稀释的胆碱标准溶液不稳定，应在4小时内使用。将30 µL的1000 µM标准溶液加到970 µL的测定缓冲液（组分D）中以生成30 µM胆碱标准溶液，然后进行1：3系列稀释，以得到10、3、1、0.3、0.1、0.03和0 µM胆碱标准。

 

工作溶液配制

胆碱测定工作溶液：
将5 mL测定缓冲液（组分D）添加到胆碱探针瓶（组分B）中，并充分混合。在胆碱探针中加入20 µL Amplite Red 储备溶液（250X）。

 

实验步骤

表1.黑色96孔板中胆碱标准品和测试样品的布局。CS =胆碱标准（CS1-CS7）；BL =空白对照；TS =测试样品。

BL	BL	TS	TS
CS1	CS1	…	…
CS2	CS2	…	…
CS3	CS3
CS4	CS4
CS5	CS5
CS6	CS6
CS7	CS7

表2.每个孔的试剂组成

孔	容积	试剂
CS1 – CS7	50 µL	连续稀释 (0.03 to 30 µM)
BL	50 µL	缓冲液 (组分 D)
TS	50 µL	测试样品

胆碱测定：

1.如表1和表2所述，将胆碱标准品和含胆碱的测试样品添加到黑色96孔板中。

2.在胆碱标准液，空白对照和测试样品的每个孔中加入50 µL胆碱测定工作溶液（表2），使总胆碱测定体积为100 µL /孔。 注意：对于384孔板，将25 µL样品和25 µL测定反应混合物加到每个孔中。

3.避光保存，室温下孵育反应15至60分钟。

4.使用荧光酶标仪在Ex / Em = 530-570 nm / 590-600 nm（最佳Ex / Em = 540/590 nm）处检测荧光强度。

 

图示

图1.使用Gemini荧光酶标仪（Molecular Devices）在黑色96孔板上用Amplite 胆碱定量试剂盒获得胆碱剂量响应。 30分钟的孵育时间（n = 3）可以检测到低至100 nM（10皮摩尔/孔）的胆碱。

 

 

参考文献

Structural snapshots of the catalytic cycle of the phosphodiesterase Autotaxin
Authors: Hausmann, Jens and Keune, Willem-Jan and Ederveen, Agnes L Hipgrave and van Zeijl, Leonie and Joosten, Robbie P and Perrakis, Anastassis
Journal: Journal of structural biology (2016)

Real-time multiplex PCR assay for genotyping of three apolipoprotein E alleles and two choline acetyltransferase alleles with three hybridization probes
Authors: Park HD, Park KU, Kim KW, Song J, Chang HE, Heo SR, Lee HJ, Kim JQ.
Journal: Clin Chem Lab Med (2007): 346

[Methyl-3H]-choline incorporation into MCF-7 cells: correlation with proliferation, choline kinase and phospholipase D assay
Authors: Al-Saeedi F, Smith T, Welch A.
Journal: Anticancer Res (2007): 901

A simple and rapid radiochemical choline acetyltransferase (ChAT) assay screening test
Authors: Shiba K, Ogawa K, Kinuya S, Yajima K, Mori H.
Journal: J Neurosci Methods (2006): 98

Rapid high-throughput detection of peroxide with an acridinium-9-carboxamide: a homogeneous chemiluminescent assay for plasma choline
Authors: Adamczyk M, Brashear RJ, Mattingly PG.
Journal: Bioorg Med Chem Lett (2006): 2407

Comparison of different sperm detection methods: amplification of fragment 3 of amelogenin gene (AMY 3), acid phosphatase detection, microcristalline choline assay and microscopic examination
Authors: Rydzewska MJ, Janica J, Pepinski W, Skawronska M, Niemcunowicz-Janica A.
Journal: Rocz Akad Med Bialymst (2000): 63

Rapid assay of choline in foods using microwave hydrolysis and a choline biosensor
Authors: Panfili G, Manzi P, Compagnone D, Scarciglia L, Palleschi G.
Journal: J Agric Food Chem (2000): 3403

Establishment of an efficient enzyme-linked immunosorbent assay for the determination of human choline acetyltransferase
Authors: Poethke R, Tumani H, Felgenhauer K, Mader M.
Journal: J Neuroimmunol (1997): 206

Assay, Purification, and Partial Characterization of Choline Monooxygenase from Spinach
Authors: Burnet M, Lafontaine PJ, Hanson AD.
Journal: Plant Physiol (1995): 581

Ion-exchange liquid chromatography method with indirect UV detection for the assay of choline in pharmaceutical preparations
Authors: Leroy P, Barbaras M, Colin JL, Nicolas A.
Journal: J Pharm Biomed Anal (1995): 581

Amplite 比色法L-丙氨酸检测试剂盒

	货号	13826	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 Tests	价格	3924
	Ex (nm)	575	Em (nm)
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Amplite 比色法L-丙氨酸检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测丙氨酸的试剂盒，L-丙氨酸（L-Ala）作为重要蛋白质的构建块起着至关重要的作用。 L-丙氨酸主要由来自乳酸的肌肉细胞合成并通过肝脏吸收到血液中。 它被谷氨酸丙酮酸转氨酶转化为丙酮酸，进入代谢主流。 L-Ala对葡萄糖的产生和血糖管理至关重要，并且对免疫系统和肾结石的预防起着重要作用。 L-丙氨酸缺乏通常表示营养不良，低蛋白饮食和压力。 AAT Bioquest的Amplite 比色法L-丙氨酸测定试剂盒提供了一种灵敏的比色测定方法，用于量化生物样品中的L-丙氨酸。 它利用释放过氧化氢的酶偶联反应，可在575 nm的吸光度酶标仪上通过Quest Fluor L-丙氨酸传感器检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 比色法L-丙氨酸检测试剂盒。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备L-丙氨酸工作溶液（50 µL）
2.添加L-丙氨酸标准品或测试样品（50 µL）
3.在37°C下孵育30分钟至1小时
4.检测575 nm处的吸光度

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 Quest Fluor L-丙氨酸探针储备溶液（200X）：
将55 µL DMSO（组分E）添加到Quest Fluor L-丙氨酸探针（组分A）中，制成200X Quest Fluor L-丙氨酸探针储备溶液。

1.2 L-丙氨酸标准溶液（1 mM）：
将10 µL 100 mM L-丙氨酸标准溶液（组分D）加到990 µL PBS（pH 7.0）中，得到1 mM L-丙氨酸标准溶液。

2.标准溶液

L-丙氨酸标准
向900 µL PBS中加入100 µL 1 mM L-丙氨酸标准溶液，制成100 µM L-丙氨酸标准溶液（AS7）。取100 µM L-丙氨酸标准溶液（AS7），并在PBS中进行1：2连续稀释，以得到连续稀释的L-丙氨酸标准溶液（AS6-AS1）。

3.工作溶液

3.1 将5 mL测定缓冲液（组分C）添加到一个Enzyme Mix1瓶（组分B1）中，并充分混合。

3.2 将100μLddH2O加入一个Enzyme Mix2小瓶（组分B2）中并充分混合。

3.3 将整个小瓶（100μL）的Enzyme Mix2和25 uL的200X L-丙氨酸探针储备溶液转移到Enzyme Mix1瓶中，并充分混合以制成L-丙氨酸工作溶液。 注意：L-丙氨酸工作溶液不稳定-请立即使用，并避免直接暴露在光线下。

样品操作及实验分析

表1.白色透明96孔微孔板中L-丙氨酸标准品和测试样品的布局。 AS = L-丙氨酸标准品（AS1-AS7，1.563至100 µM），BL =空白对照，TS =测试样品。

表2.每个孔的试剂组成

1.根据表1和表2提供的布局，准备L-丙氨酸标准品（AS），空白对照（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25 µL试剂代替50 µL。

2.将50 µL L-丙氨酸工作溶液添加到L-Alanine标准品，空白对照和测试样品的每个孔中，以使L-Alanine测定的总体积为100 µL /孔。 对于384孔板，将25 µL L-丙氨酸工作溶液添加到每个孔中，总体积为50 µL /孔。 注意：在pH 6.5至7.0下运行L-丙氨酸测定。

3.将反应液在37°C孵育30分钟至1小时。

4.使用酶标仪在575 nm处监测吸光度的增加。

参考文献

Reactivity of beta-methylamino-L-alanine in complex sample matrixes complicating detection and quantification by mass spectrometry
Authors: Glover WB, Liberto CM, McNeil WS, Banack SA, Shipley PR, Murch SJ.
Journal: Anal Chem (2012): 7946

Synthesis and characterization of silver/alanine nanocomposites for radiation detection in medical applications: the influence of particle size on the detection properties
Authors: Guidelli EJ, Ramos AP, Zaniquelli ME, Nicolucci P, Baffa O.
Journal: Nanoscale (2012): 2884

Detection of farnesyltransferase interface hot spots through computational alanine scanning mutagenesis
Authors: Perez MA, Sousa SF, Oliveira EF, Fernandes PA, Ramos MJ.
Journal: J Phys Chem B (2011): 15339

Molecular beacon based bioassay for highly sensitive and selective detection of nicotinamide adenine dinucleotide and the activity of alanine aminotransferase
Authors: Tang Z, Liu P, Ma C, Yang X, Wang K, Tan W, Lv X.
Journal: Anal Chem (2011): 2505

Highly specific substrates of proteinase 3 containing 3-(2-benzoxazol-5-yl)-l-alanine and their application for detection of this enzyme in human serum
Authors: Wysocka M, Lesner A, Guzow K, Kulczycka J, Legowska A, Wiczk W, Rolka K.
Journal: Anal Chem (2010): 3883

In-capillary derivatization and stacking electrophoretic analysis of gamma-aminobutyric acid and alanine in tea samples to redeem the detection after dilution to decrease matrix interference
Authors: Su YS, Lin YP, Cheng FC, Jen JF.
Journal: J Agric Food Chem (2010): 120

SAFETY study: alanine aminotransferase cutoff values are set too high for reliable detection of pediatric chronic liver disease
Authors: Schwimmer JB, Dunn W, Norman GJ, Pardee PE, Middleton MS, Kerkar N, Sirlin CB.
Journal: Gastroenterology (2010): 1357

[Rapid detection of alanine aminotransferase with near-infrared spectroscopy]
Authors: Huang FR, Zhang J, Luo YH, Li SP, Zheng SF, Chen XD.
Journal: Guang Pu Xue Yu Guang Pu Fen Xi (2010): 2620

An electrochemical biosensor array for rapid detection of alanine aminotransferase and aspartate aminotransferase
Authors: Song MJ, Yun DH, Hong SI.
Journal: Biosci Biotechnol Biochem (2009): 474

Detection of the mitochondrial and catalytically active alanine aminotransferase in human tissues and plasma
Authors: Glinghammar B, Rafter I, Lindstrom AK, Hedberg JJ, Andersson HB, Lindblom P, Berg AL, Cotgreave I.
Journal: Int J Mol Med (2009): 621

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Amplite 荧光法锌离子定量试剂盒

	货号	19000	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 Tests	价格	2604
	Ex (nm)	493	Em (nm)	516
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Amplite 荧光法锌离子定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测锌离子的试剂盒，锌是一种必需的微量元素，在许多生物过程中起着重要作用。它是许多酶，蛋白质结构和遗传表达控制所必需的必需因子。锌的状态也会影响细胞分裂，生长，分化，发育和衰老的基本过程。缺锌的临床症状包括皮质炎，免疫力低下，腹泻，愈合不良，发育迟缓，性腺机能减退，胎儿生长障碍和畸形。在研究和药物发现中非常需要简单，直接和自动化的锌离子测量程序。 AAT Bioquest的Amplite 比色锌定量试剂盒使用我们专有的Zn-620 提供了一种检测生物样品中锌浓度的稳健方法，其中锌与探针结合，增强吸收在620 nm附近。在无锌溶液中，吸光度为480nm，而当锌离子与探针结合时，其在620nm处显示出大的增加（> 100倍）。锌的浓度可以用比色法测定，吸光度比为A610nm / A480nm。该检测方法可用于血清，血浆和尿液等生物样品，检测灵敏度为0.2μM（130 ng / mL）。

产品说明书

Zn²⁺检测样品分析方案

概述

测试样品（50μL）或Zn²⁺

添加锌探针试剂50μL

在室温下孵育5-10分钟读取A610nm / A480nm的吸光度比

操作步骤

1.ZnCl₂标准品和试样制剂：

1.1将10μL的100mM ZnCl₂标准溶液（组分C）加入990L测定缓冲液（组分B）中，得到1mM ZnCl₂标准溶液。

1.2将10μL的1mM锌标准溶液（组分C）加入到990L测定缓冲液（组分B）中，得到100μMZnCl₂标准溶液。

1.3取300μL的100μMZnCl2标准溶液（来自步骤1.2）进行1：2连续稀释，得到50,25,12.5,6.25,3.13,1.56和0μM连续稀释的ZnCl2标准品。

1.4用测定缓冲液（组分B）将测试样品稀释至5-100μM范围。加入50μLZnCl2标准品，稀释样品并对照到每个孔中，如说明书中的表1和2所示。

2.运行锌测定：

2.1将25μLZn-620（组分A）加入5 mL测定缓冲液（组分B）中以制备Zn测定混合物。 向ZnCl₂标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入50μLZn测定混合物（参见说明书中步骤1.5，表1和2）以使总ZnCl₂测定体积为100μL/孔。

注意：对于384孔板，每孔加入25μL样品和25μL测定反应混合物。

2.2在室温下孵育反应5-10分钟，避光。

2.3用吸光度读板仪在610 nm和480 nm处检测吸光度的增加。

参考文献

After oxidation, zinc nanoparticles lose their ability to enhance responses to odorants
Authors: Samantha Hagerty, Yasmine Daniels, Melissa Singletary, Oleg Pustovyy, Ludmila Globa, William A MacCrehan, Shin Muramoto, Gheorghe Stan, June W Lau, Edward E Morrison
Journal: BioMetals (2016): 1–14

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