Amplite 比色法α-酮戊二酸定量试剂盒

	货号	10085	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 Tests	价格	5244
	Ex (nm)	570	Em (nm)
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Amplite 比色法α-酮戊二酸定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的荧光染料。α-酮戊二酸（α-酮戊二酸）是克雷布斯循环中的关键分子，其决定了生物体的柠檬酸循环的总体速率。作为谷氨酸和谷氨酰胺的前体，α-酮戊二酸也是胃肠道细胞的中枢代谢燃料。它可以降低蛋白质分解代谢并增加蛋白质合成，从而增强骨骼肌中的骨组织形成，并可用于临床应用。 α-酮戊二酸用于肾脏疾病;肠道和胃部疾病，包括细菌感染;肝脏问题;白内障;和反复发酵的酵母菌感染。它还用于改善接受血液透析治疗的肾病患者处理蛋白质的方式。 AAT Bioquest的Amplite 比色α-酮戊二酸定量试剂盒提供灵敏的比色分析，用于定量生物样品中的α-酮戊二酸。它利用酶偶联反应释放过氧化氢，可通过Amplite Red在吸光度酶标仪中在570 nm处检测到。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 比色法α-酮戊二酸定量试剂盒。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备测试样品和连续稀释的α-酮戊二酸标准品（50μL）
2.加入等体积的α-酮戊二酸工作液（50μL）
3.在37°C孵育60-90分钟
4.监测570nm处的吸光度强度

溶液制备

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
1.1 Amplite 红色储备液（200X）：
将50μLDMSO（组分E）加入到Amplite TM Red（组分A）的小瓶中以制备200X储备溶液。

2.标准溶液

2.1α-酮戊二酸标准
将10μL10mMα-酮戊二酸标准品（组分D）加入990μLPBS中，得到100μMα-酮戊二酸标准溶液（AKG7）。 然后进行1：2连续稀释以获得连续稀释的α-酮戊二酸标准品（AKG6-AKG1）。

3.工作溶液

3.1将5 mL测定缓冲液（组分C）加入一个酶混合物1瓶（组分B1）中并充分混合。

3.2将100μLDdH2O加入一个酶混合物2小瓶（组分B2）中并充分混合。

3.3将整个小瓶（100μL）的酶混合物2和25μL的200X Amplite Red储备溶液转移到小瓶混合物1的小瓶中并充分混合以制备α-酮戊二酸的工作溶液。 注意：5mLα-酮戊二酸工作溶液足以容纳一个96孔板。 它不稳定，请及时使用。

样品分析

表1.在96孔透明底微孔板中的α-酮戊二酸标准品和测试样品的布局。 AKG =α-酮戊二酸标准品（AKG1-AKG7,1.563至100μM），BL =空白对照，TS =测试样品。

表2.每个孔的试剂组成

1.根据表1和2中提供的布局制备α-酮戊二酸标准品（AKG），空白对照（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25μL试剂代替50μL。

2.向α-酮戊二酸标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入50μLα-酮戊二酸工作溶液，使总α-酮戊二酸测定体积为100μL/孔。 对于384孔板，在每个孔中加入25μLα-酮戊二酸工作溶液，总体积为50μL/孔。

3.将反应混合物在37℃孵育60-90分钟。

4.用吸光度板读数器监测吸光度的增加，在OD为570nm时进行路径检查。

参考文献

Dietary alpha-ketoglutarate promotes higher protein and lower triacylglyceride levels and induces oxidative stress in larvae and young adults but not in middle-aged Drosophila melanogaster
Authors: Bayliak MM, Lylyk MP, Shmihel HV, Sorochynska OM, Semchyshyn OI, Storey JM, Storey KB, Lushchak VI.
Journal: Comp Biochem Physiol A Mol Integr Physiol (2017): 28

Loss of Nardilysin, a Mitochondrial Co-chaperone for alpha-Ketoglutarate Dehydrogenase, Promotes mTORC1 Activation and Neurodegeneration
Authors: Yoon WH, Sandoval H, Nagarkar-Jaiswal S, Jaiswal M, Yamamoto S, Haelterman NA, Putluri N, Putluri V, Sreekumar A, Tos T, Aksoy A, Donti T, Graham BH, Ohno M, Nishi E, Hunter J, Muzny DM, Carmichael J, Shen J, Arboleda VA, Nelson SF, Wangler MF, Karaca E, Lupski JR, Bellen HJ.
Journal: Neuron (2017): 115

The facial triad in the alpha-ketoglutarate dependent oxygenase FIH: A role for sterics in linking substrate binding to O2 activation
Authors: Hangasky JA, Taabazuing CY, Martin CB, Eron SJ, Knapp MJ.
Journal: J Inorg Biochem (2017): 26

alpha-Ketoglutarate Accelerates the Initial Differentiation of Primed Human Pluripotent Stem Cells
Authors: TeSlaa T, Chaikovsky AC, Lipchina I, Escobar SL, Hochedlinger K, Huang J, Graeber TG, Braas D, Teitell MA.
Journal: Cell Metab (2016): 485

Alpha-Ketoglutarate as a Molecule with Pleiotropic Activity: Well-Known and Novel Possibilities of Therapeutic Use
Authors: Zdzisinska B, Zurek A, Kandefer-Szerszen M.
Journal: Arch Immunol Ther Exp (Warsz). (2016)

alpha-Ketoglutarate dehydrogenase complex moonlighting: ROS signalling added to the list: An Editorial highlight for ‘Reductions in the mitochondrial enzyme alpha-ketoglutarate dehydrogenase complex in neurodegenerative disease – beneficial or detrimental?’
Authors: Fernandez E, Bolanos JP.
Journal: J Neurochem (2016): 689

Alpha-ketoglutarate enhances milk protein synthesis by porcine mammary epithelial cells
Authors: Jiang Q, He L, Hou Y, Chen J, Duan Y, Deng D, Wu G, Yin Y, Yao K.
Journal: Amino Acids (2016): 2179

alpha-ketoglutarate is associated with delayed wound healing in diabetes
Authors: Tan Q, Wang W, Yang C, Zhang J, Sun K, Luo HC, Mai LF, Lao Y, Yan L, Ren M.
Journal: Clin Endocrinol (Oxf) (2016): 54

Alpha-ketoglutarate promotes skeletal muscle hypertrophy and protein synthesis through Akt/mTOR signaling pathways
Authors: Cai X, Zhu C, Xu Y, Jing Y, Yuan Y, Wang L, Wang S, Zhu X, Gao P, Zhang Y, Jiang Q, Shu G.
Journal: Sci Rep (2016): 26802

Alpha-ketoglutarate reduces ethanol toxicity in Drosophila melanogaster by enhancing alcohol dehydrogenase activity and antioxidant capacity
Authors: Bayliak MM, Shmihel HV, Lylyk MP, Storey KB, Lushchak VI.
Journal: Alcohol (2016): 23

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	Ex (nm)		Em (nm)
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

铅是一种对人类，特别是对儿童有剧毒的金属。铅干扰细胞信号和基因表达，对大脑、肝脏、肾脏会造成严重损害，甚至会导致死亡。由于其在采矿和冶炼中的悠久历史，以及在电池、油漆和汽油中的广泛应用，土壤和地下水中的铅污染一直是最严重的环境问题之一。Amplite 荧光法铅离子定量试剂盒为检测溶液中的铅离子提供了一种稳定的方法。它使用Lead Green，一种高选择性和高灵敏的绿色荧光探针，可以用荧光酶标仪（Ex/Em=490/530nm）轻松检测。Amplite 荧光法铅离子定量试剂盒可在方便的96孔或384孔微孔板中进行实验操作，且易于自动化，无需分离步骤。分析可在30分钟内完成。用Amplite 荧光法铅离子定量试剂盒，仅检测到4μM铅离子。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 荧光法铅离子定量试剂盒。 

产品说明书

铅离子检测样品分析方案

概述

1. 准备并添加铅标准品或测试样品（50 µL）
2. 准备并添加Lead Green工作溶液（50 µL）
3. 在室温下孵育10-30分钟
4. 检测Ex / Em = 490/530 nm的荧光强度

溶液配制 

储备溶液配制

Lead Green储备溶液（200X）：将50 µL DMSO（组分D）添加到Lead Green（组分A）的小瓶中，制成Lead Green储备溶液（200X）。 注意：将未使用的Lead Green储备溶液分装在-20°C下。

标准溶液配制

将10 µL 100mM Lead标准溶液（组分C）添加到990µL H₂O中以生成1mM铅标准溶液。 取1mM铅标准溶液（LS7）以H₂O进行1：3连续稀释，以得到1.34至1000 µM（LS1至LS7）的系列稀释铅标准溶液。

工作溶液配制

Lead Green工作溶液：将25 µLLead Green储备溶液（200X）加入5 mL的测定缓冲液（组分B），使总体积为5.025 mL。 注意：避光，请立即使用Lead Green工作溶液，不可长时间放置。

操作步骤

表1.黑色96孔板中铅标准品和测试样品的布局。 LS =铅标准品（LS1-LS7，1.34至1000 µM）； BL =空白对照； TS =测试样品。

表2.每个孔的试剂组成。

1. 根据表1和2中提供的信息，准备铅标准品（LS），空白对照（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25 µL试剂代替50 µL。
2. 在铅标准品，空白对照和测试样品的每个孔中添加50 µL Lead Green工作溶液，以使铅总测定体积为100 µL /孔。 对于384孔板，将25 µL工作溶液添加到每个孔中，而不是总体积为50 µL /孔。
3. 在避光条件下，室温下孵育反应10至30分钟。
4. 使用荧光酶标仪在Ex / Em = 490/530 nm处检测荧光强度。

数据分析

从空白标准井获得的读数（RFU）用作阴性对照。从其他标准的读数中减去该值，得到基线校正值。然后，绘制标准读数，得到标准曲线和方程。该方程可用于计算Pb2+样品。我们建议使用在线四参数物流计算器

参考文献

Lead toxicity from retained bullet fragments: A systematic review and meta-analysis
Authors: Apte, A., Bradford, K., Dente, C., Smith, R. N.
Journal: J Trauma Acute Care Surg (2019): 707-716

A critical review on speciation, mobilization and toxicity of lead in soil-microbe-plant system and bioremediation strategies
Authors: Kushwaha, A., Hans, N., Kumar, S., Rani, R.
Journal: Ecotoxicol Environ Saf (2018): 1035-1045

Toxicodynamics of Lead, Cadmium, Mercury and Arsenic- induced kidney toxicity and treatment strategy: A mini review
Authors: Rana, M. N., Tangpong, J., Rahman, M. M.
Journal: Toxicol Rep (2018): 704-713

Severe Systemic Lead Toxicity Resulting From Extra-Articular Retained Shrapnel Presenting as Jaundice and Hepatitis: A Case Report and Review of the Literature
Authors: Grasso, I. A., Blattner, M. R., Short, T., Downs, J. W.
Journal: Mil Med (2017): e1843-e1848

Retained Lumbar Bullet: A Case Report of Chronic Lead Toxicity and Review of the Literature
Authors: Bustamante, N. D., Macias-Konstantopoulos, W. L.
Journal: J Emerg Med (2016): 45-9

Systemic Lead Toxicity Secondary to Retained Intraosseous Bullet A Case Report and Review of Literature
Authors: Begly, J. P., Lajam, C. M.
Journal: Bull Hosp Jt Dis (2013) (2016): 229-33

Lead toxicity in rice: effects, mechanisms, and mitigation strategies–a mini review
Authors: Ashraf, U., Kanu, A. S., Mo, Z., Hussain, S., Anjum, S. A., Khan, I., Abbas, R. N., Tang, X.
Journal: Environ Sci Pollut Res Int (2015): 18318-32

Lead toxicity: a review
Authors: Wani, A. L., Ara, A., Usmani, J. A.
Journal: Interdiscip Toxicol (2015): 55-64

A systematic review on status of lead pollution and toxicity in Iran; Guidance for preventive measures
Authors: Karrari, P., Mehrpour, O., Abdollahi, M.
Journal: Daru (2012): 2

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Authors: Flora, G., Gupta, D., Tiwari, A.
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Amplite 比色法内毒素检测试剂盒

	货号	60007	存储条件	Multiple
	规格	100 Tests	价格	3708
	Ex (nm)		Em (nm)
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：60007

产品名称：Amplite 比色法内毒素检测试剂盒

规格：100 Tests

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：24个月

试剂盒组分

组分A：Endotoxin yellow（1瓶）

组分B：不含内毒素溶液（1瓶，20ml）

组分C：Li变形细胞（1瓶）

组分D：大肠杆菌内毒素标准品（10 EU）

组分E：DMSO（1瓶，100ul）

产品介绍

脂多糖（LPS），也称为内毒素，是革兰氏阴性细菌外膜的主要成分。 LPS是脊椎动物先天免疫系统的有效刺激剂，可引起发烧，败血性休克并最终导致死亡。 LPS还被认为是检测细菌病原体入侵的生物标记，在极端情况下还负责炎症反应和内毒素休克的发展。检测生物材料（例如蛋白质，肽或抗体样品）中的LPS是生物制造和加工中的关键任务。 Amplite 比色内毒素检测试剂盒使用Endotoxin Yellow（一种敏感的生色底物）。可以在内毒素和血红细胞溶解物（LAL）（一种来自crab蟹的血细胞提取物）的存在下水解Endotoxin Yellow 产生强烈的黄色产物。内毒素活性与Endotoxin Yellow 水解产生的黄色产物的吸光度成正比。Amplite 比色内毒素检测试剂盒可检测1 EU / ml至0.002 EU / ml的多种内毒素。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 比色法内毒素检测试剂盒。 

图示

图1. Amplite 比色内毒素检测试剂盒图