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酶显色底物ADP-ribose-pNP 货号11700-AAT Bioquest荧光染料

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上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

酶显色底物ADP-ribose-pNP

酶显色底物ADP-ribose-pNP

酶显色底物ADP-ribose-pNP 货号11700 货号 11700 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 2604
Ex (nm) 405 Em (nm)
分子量 724.37 溶剂 Water
产品详细介绍

简要概述

酶显色底物ADP-ribose-pNP是美国AAT Bioquest生产的用于过氧化物酶的试剂，ADP-核糖-pNP是用来评估多聚ADP-核糖聚合酶（PARP）活性的一种显色底物。在405nm处可检测释放的p-硝基酚吸光度。标准曲线的斜率通常用来转换产生的ADP-核糖-pNP比色底物的的吸光度。使用ADP-核糖-pNP作为显色底物，PARP-1具有最大Km和Vmax数值（分别为151 uM和1.30nmolmin-1mg-1），其次是Tankyrase-1(82uM和18pmolmin-1mg-l)和VPARP（46uM和2 pmolmin-1mg-l）。显色底物通常用来决定PARP-1,tankyrase-1和VPARP 的动力学参数，然后筛选PARP-1,tankyrase-1和VPARP小分子抑制剂。由于ADP-核糖-pNP连续实验分析比标准的非连续PARP试验更有优势，因此其可用于高通量筛选PARP-1,tankyrase-1和VPARP的活性以及相关抑制剂。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的酶显色底物ADP-ribose-pNP。 

 

适用仪器

光吸收酶标仪  
吸收： 405nm
推荐孔板： 白色孔板

产品说明书

样品实验方案 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1 ADP-核糖-pNP原液：
在H2O中制备5-10mM的储备溶液。 注意：应立即使用原液。

 

2.工作溶液

ADP-核糖-pNP工作溶液：
通过用测定缓冲液（50mM Tris，10mM MgCl 2，pH 8.0）稀释储备溶液来制备0.25mM测定溶液。

 

样品操作步骤

1.将0.01mL /孔的样品溶液加入0.09mL /孔测定溶液中，使96孔透明板中的最终体积为0.1mL。

2.使用吸光度酶标仪在405nm处监测平板。

 

参考文献

A colorimetric substrate for poly(ADP-ribose) polymerase-1, VPARP, and tankyrase-1
Authors: Nottbohm AC, Dothager RS, Putt KS, Hoyt MT, Hergenrother PJ.
Journal: Angew Chem Int Ed Engl (2007): 2066

Pharmacological identification of P2X1, P2X4 and P2X7 nucleotide receptors in the smooth muscles of human umbilical cord and chorionic blood vessels
Authors: Valdecantos P, Briones R, Moya P, Germain A, Huidobro-Toro JP.
Journal: Placenta (2003): 17

Poly(ADP-ribose) polymerase as a key player in excitotoxicity and post-ischemic brain damage
Authors: Meli E, Pangallo M, Baronti R, Chiarugi A, Cozzi A, Pellegrini-Giampietro DE, Moroni F.
Journal: Toxicol Lett (2003): 153

Interactions of nucleotide cofactors with the Escherichia coli replication factor DnaC protein
Authors: Galletto R, Rajendran S, Bujalowski W.
Journal: Biochemistry (2000): 12959

Kinetic mechanism of nucleotide cofactor binding to Escherichia coli replicative helicase DnaB protein. stopped-flow kinetic studies using fluorescent, ribose-, and base-modified nucleotide analogues
Authors: Bujalowski W, Jezewska MJ.
Journal: Biochemistry (2000): 2106

Effects of caffeine and adenine nucleotides on Ca2+ release by the sarcoplasmic reticulum in saponin-permeabilized frog skeletal muscle fibres
Authors: Duke AM, Steele DS.
Journal: J Physiol (1998): 43

Adenine nucleotides regulate ADP-ribosylation of membrane-bound actin and actin-binding to membranes
Authors: Schroeder P, Just I, Aktories K.
Journal: Eur J Cell Biol (1994): 3

Trimeric G-proteins of the trans-Golgi network are involved in the formation of constitutive secretory vesicles and immature secretory granules
Authors: Barr FA, Leyte A, Mollner S, Pfeuffer T, Tooze SA, Huttner WB.
Journal: FEBS Lett (1991): 239

Inhibition and labeling of the Ca2(+)-ATPase from sarcoplasmic reticulum by periodate oxidized ATP
Authors: Mignaco J, Scofano HM, Barrabin H.
Journal: Biochim Biophys Acta (1990): 305

说明书
酶显色底物ADP-ribose-pNP.pdf

酶显色底物ADP-ribose-pNP 货号11700-AAT Bioquest荧光染料

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酶显色底物ADP-ribose-pNP

酶显色底物ADP-ribose-pNP

酶显色底物ADP-ribose-pNP 货号11700 货号 11700 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 2604
Ex (nm) 405 Em (nm)
分子量 724.37 溶剂 Water
产品详细介绍

简要概述

酶显色底物ADP-ribose-pNP是美国AAT Bioquest生产的用于过氧化物酶的试剂，ADP-核糖-pNP是用来评估多聚ADP-核糖聚合酶（PARP）活性的一种显色底物。在405nm处可检测释放的p-硝基酚吸光度。标准曲线的斜率通常用来转换产生的ADP-核糖-pNP比色底物的的吸光度。使用ADP-核糖-pNP作为显色底物，PARP-1具有最大Km和Vmax数值（分别为151 uM和1.30nmolmin-1mg-1），其次是Tankyrase-1(82uM和18pmolmin-1mg-l)和VPARP（46uM和2 pmolmin-1mg-l）。显色底物通常用来决定PARP-1,tankyrase-1和VPARP 的动力学参数，然后筛选PARP-1,tankyrase-1和VPARP小分子抑制剂。由于ADP-核糖-pNP连续实验分析比标准的非连续PARP试验更有优势，因此其可用于高通量筛选PARP-1,tankyrase-1和VPARP的活性以及相关抑制剂。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的酶显色底物ADP-ribose-pNP。 

 

适用仪器

光吸收酶标仪  
吸收： 405nm
推荐孔板： 白色孔板

产品说明书

样品实验方案 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1 ADP-核糖-pNP原液：
在H2O中制备5-10mM的储备溶液。 注意：应立即使用原液。

 

2.工作溶液

ADP-核糖-pNP工作溶液：
通过用测定缓冲液（50mM Tris，10mM MgCl 2，pH 8.0）稀释储备溶液来制备0.25mM测定溶液。

 

样品操作步骤

1.将0.01mL /孔的样品溶液加入0.09mL /孔测定溶液中，使96孔透明板中的最终体积为0.1mL。

2.使用吸光度酶标仪在405nm处监测平板。

 

参考文献

A colorimetric substrate for poly(ADP-ribose) polymerase-1, VPARP, and tankyrase-1
Authors: Nottbohm AC, Dothager RS, Putt KS, Hoyt MT, Hergenrother PJ.
Journal: Angew Chem Int Ed Engl (2007): 2066

Pharmacological identification of P2X1, P2X4 and P2X7 nucleotide receptors in the smooth muscles of human umbilical cord and chorionic blood vessels
Authors: Valdecantos P, Briones R, Moya P, Germain A, Huidobro-Toro JP.
Journal: Placenta (2003): 17

Poly(ADP-ribose) polymerase as a key player in excitotoxicity and post-ischemic brain damage
Authors: Meli E, Pangallo M, Baronti R, Chiarugi A, Cozzi A, Pellegrini-Giampietro DE, Moroni F.
Journal: Toxicol Lett (2003): 153

Interactions of nucleotide cofactors with the Escherichia coli replication factor DnaC protein
Authors: Galletto R, Rajendran S, Bujalowski W.
Journal: Biochemistry (2000): 12959

Kinetic mechanism of nucleotide cofactor binding to Escherichia coli replicative helicase DnaB protein. stopped-flow kinetic studies using fluorescent, ribose-, and base-modified nucleotide analogues
Authors: Bujalowski W, Jezewska MJ.
Journal: Biochemistry (2000): 2106

Effects of caffeine and adenine nucleotides on Ca2+ release by the sarcoplasmic reticulum in saponin-permeabilized frog skeletal muscle fibres
Authors: Duke AM, Steele DS.
Journal: J Physiol (1998): 43

Adenine nucleotides regulate ADP-ribosylation of membrane-bound actin and actin-binding to membranes
Authors: Schroeder P, Just I, Aktories K.
Journal: Eur J Cell Biol (1994): 3

Trimeric G-proteins of the trans-Golgi network are involved in the formation of constitutive secretory vesicles and immature secretory granules
Authors: Barr FA, Leyte A, Mollner S, Pfeuffer T, Tooze SA, Huttner WB.
Journal: FEBS Lett (1991): 239

Inhibition and labeling of the Ca2(+)-ATPase from sarcoplasmic reticulum by periodate oxidized ATP
Authors: Mignaco J, Scofano HM, Barrabin H.
Journal: Biochim Biophys Acta (1990): 305

说明书
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PhosphoWorks 荧光法ADP检测试剂盒 *红色荧光* 货号21655-AAT Bioquest荧光染料

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PhosphoWorks 荧光法ADP检测试剂盒 *红色荧光*

PhosphoWorks 荧光法ADP检测试剂盒 *红色荧光*

PhosphoWorks 荧光法ADP检测试剂盒 *红色荧光* 货号21655 货号 21655 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 4584
Ex (nm) 571 Em (nm) 585
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

PhosphoWorks 荧光法ADP检测试剂盒 *红色荧光*是美国AAT Bioquest生产的用于检测ADP的试剂盒，ADP参与许多生物反应，例如蛋白激酶。 我们的ADP分析试剂盒可通过监测ADP的形成来普遍用于分析蛋白激酶反应，而ADP的形成与酶磷酸转移酶的活性成正比，并通过荧光法进行测量。 该试剂盒提供了一种快速，简单且均一的测定ADP形成或消耗的测定方法。 该测定是连续的，并且可以容易地适于自动化。 该套件很方便，需要最少的动手时间。 由于蛋白激酶与诸如癌症和其他增生性疾病，炎性疾病，代谢紊乱和神经系统疾病等疾病的广泛相关性，因此参与药物开发的研究人员对蛋白激酶很感兴趣。 大多数商业化的蛋白激酶检测试剂盒都是基于对磷酸肽形成或ATP缺失的监测。 我们的ADP检测试剂盒比大多数商业激酶检测试剂盒对蛋白质激酶的检测更稳定。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的PhosphoWorks 荧光法ADP检测试剂盒 *红色荧光*。

 

适用仪器

荧光酶标仪  
激发： 540nm
发射： 590nm
cutoff： 570nm
推荐孔板： 黑色孔板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.运行激酶反应（20 µL）
2.添加ADP传感器缓冲液（20 µL）
3.添加ADP传感器（10 µL）
4.在室温下孵育15分钟-1小时
5.检测荧光强度

 

溶液制备

1.储备溶液制备

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1ADP Sensor I库存解决方案（50X）：
将20 µL DMSO（组分B3）添加到ADP探针I（组分B1）的小瓶中。

1.2ADP探针储备溶液（1X）：
将20 µL 50X ADP Sensor I储备溶液添加到ADP Sensor II（组件B2）的小瓶中。

1.3ADP标准溶液（300 mM）：
将100 µL H2O加入ADP标准液（组分C）中，制成300 mM ADP储备液。

 

2.标准溶液

ADP标准
通过包括不含ADP的样品来测量背景荧光，在激酶反应缓冲液中进行ADP标准品的系列稀释。 注意：通常，ADP浓度范围为0.05至30 µM是合适的。

 

样品示例及操作

表1.黑色96孔微孔板中ADP标准品和测试样品的布局。 SD = ADP标准（SD1-SD7，0.05至30 uM）; BL =空白对照； TS =测试样品。

BL BL TS TS
SD1 SD1 … …
SD2 SD2 … …
SD3 SD3    
SD4 SD4    
SD5 SD5    
SD6 SD6    
SD7 SD7    

表2.每个孔的试剂组成。

孔 容积 试剂
SD1-SD7 20ul 连续稀释（0.05至30 µM）
BL 20ul ADP分析缓冲液
TS 20ul 激酶反应

1.运行激酶反应（此步骤未提供试剂）：

1.1根据需要准备20 µL激酶反应溶液。激酶反应的成分应根据需要进行优化（例如，特定的激酶反应可能需要优化的缓冲液系统）。在大多数情况下，如果您没有优化的激酶缓冲液，也可以使用ADP分析缓冲液（组分D）进行激酶反应。

1.2Amplite 荧光ADP测定试剂盒用于确定ADP的形成。在DTT和β-巯基乙醇等硫醇存在下，ADP传感器不稳定。最终硫醇浓度高于10 µM会大大降低测定的动态范围。

2.运行Amplite ADP分析：

2.1向装有20 µL激酶反应溶液的每个孔中加入20 µL ADP传感器缓冲液（组分A）和10 µL ADP Sensor储备溶液，使ADP测定总体积为50 µL /孔。注意：在DTT和β-巯基乙醇等硫醇存在下，ADP传感器不稳定。最终硫醇浓度高于10 µM会大大降低测定的动态范围。注意：ADP分析应在6.5至7.4的pH值下进行。

2.2将反应混合物在室温下孵育15分钟至1小时。

2.3使用荧光酶标仪在Ex / Em = 540/590 nm处监控荧光强度。

 

参考文献

Discovery of Non-ATP-Competitive Inhibitors of Polo-like Kinase 1
Authors: Taikangxiang Yun, Tan Qin, Ying Liu, Luhua Lai
Journal: ChemMedChem (2016): 713–717

Cell polarity kinase MST4 cooperates with cAMP-dependent kinase to orchestrate histamine-stimulated acid secretion in gastric parietal cells
Authors: Hao Jiang, Wenwen Wang, Yin Zhang, William W Yao, Jiying Jiang, Bo Qin, Wendy Y Yao, Fusheng Liu, Huihui Wu, Tarsha L Ward
Journal: Journal of Biological Chemistry (2015): 28272–28285

Regulation of NDR1 activity by PLK1 ensures proper spindle orientation in mitosis
Authors: Maomao Yan, Lingluo Chu, Bo Qin, Zhikai Wang, Xing Liu, Changjiang Jin, Guanglan Zhang, Marta Gomez, Alexander Hergovich, Zhengjun Chen
Journal: Scientific reports (2015): 10449

Trypanosoma brucei vacuolar transporter chaperone 4 (TbVtc4) is an acidocalcisome polyphosphate kinase required for in vivo infection
Authors: Noelia Lander, Paul N Ulrich, Roberto Docampo
Journal: Journal of Biological Chemistry (2013): 34205–34216

 

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产品名称 货号
PhosphoWorks 荧光法焦磷酸检测试剂盒 *蓝色荧光* Cat#21611
PhosphoWorks 荧光法磷酸盐检测试剂盒 *红色荧光* Cat#21660
PhosphoWorks 荧光法焦磷酸检测试剂盒 *选择性增强* Cat#21614

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荧光标记的ADP-TAMRA conjugate [5-TAMRA-eda-ADP] 货号13606-AAT Bioquest荧光染料

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荧光标记的ADP-TAMRA conjugate [5-TAMRA-eda-ADP]

荧光标记的ADP-TAMRA conjugate [5-TAMRA-eda-ADP]

荧光标记的ADP-TAMRA conjugate [5-TAMRA-eda-ADP] 货号13606 货号 13606 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 nmol 价格 6564
Ex (nm) 552 Em (nm) 578
分子量 1309.30 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：13606

产品名称：荧光标记的ADP-TAMRA conjugate [5-TAMRA-eda-ADP]

规格：100 nmol

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：24个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量：1309.30

溶剂：DMSO

激发波长(nm)：544

发射波长(nm)：575

 

产品介绍

荧光标记的ADP-TAMRA conjugate [5-TAMRA-eda-ADP]是美国AAT Bioquest生产的荧光底物，荧光标记的ADP分子用于筛选ADP结合酶和其他蛋白质靶标用于药物发现。 该ADP-TAMRA已经测试了K（d）值为0.60±0.05？M的结合犬尿氨酸单加氧酶（KMO）和来自烟曲霉和耻垢分枝杆菌的NMO，K（d）值为2.1±0.2和4.0± 分别为0.2 M（Anal Biochem。2012,425,80-7）。 在与KMO和NMO的底物和产物的竞争性结合实验中测试该测定。 NMO对于真菌和细菌的发病机制至关重要。 NMO在含异羟肟酸的铁载体的生物合成中催化正弦和鸟氨酸的羟基化。 抑制KMO，催化犬尿氨酸转化为3-羟基犬尿氨酸，缓解神经退行性疾病，如亨廷顿氏症和阿尔茨海默氏症以及寄生虫布氏锥虫引起的脑部感染。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的荧光标记的ADP-TAMRA conjugate [5-TAMRA-eda-ADP]。 

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参考文献

Deciphering the catalysis-associated conformational changes of human adenylate kinase 1 with single-molecule spectroscopy
Authors: Lin CY, Huang JY, Lo LW.
Journal: J Phys Chem B (2013): 13947

The effect of NBD-Cl in nucleotide-binding of the major subunit alpha and B of the motor proteins F1FO ATP synthase and A1AO ATP synthase
Authors: Hunke C, Tadwal VS, Manimekalai MS, Roessle M, Gruber G.
Journal: J Bioenerg Biomembr (2010): 1

The Escherichia coli PriA helicase-double-stranded DNA complex: location of the strong DNA-binding subsite on the helicase domain of the protein and the affinity control by the two nucleotide-binding sites of the enzyme
Authors: Szymanski MR, Jezewska MJ, Bujalowski W.
Journal: J Mol Biol (2010): 344

ATP/ADP binding to a novel nucleotide binding domain of the reticulocyte-binding protein Py235 of Plasmodium yoelii
Authors: Ramalingam JK, Hunke C, Gao X, Gruber G, Preiser PR.
Journal: J Biol Chem (2008): 36386

Reversal of ADP-mediated aggregation of adenosine kinase by cyclophilin leads to its reactivation
Authors: Sen B, Chakraborty A, Datta R, Bhattacharyya D, Datta AK.
Journal: Biochemistry (2006): 263

ATPase mechanism of Eg5 in the absence of microtubules: insight into microtubule activation and allosteric inhibition by monastrol
Authors: Cochran JC, Gilbert SP.
Journal: Biochemistry (2005): 16633

Ca2+ binding to sarcoplasmic reticulum ATPase phosphorylated by Pi reveals four thapsigargin-sensitive Ca2+ sites in the presence of ADP
Authors: Vieyra A, Mintz E, Lowe J, Guillain F.
Journal: Biochim Biophys Acta (2004): 103

Evidence for proximal cysteine and lysine residues at or near the active site of arginine kinase of Stichopus japonicus
Authors: Guo Q, Chen B, Wang X.
Journal: Biochemistry (Mosc) (2004): 1336

Conformational dynamics of DnaB helicase upon DNA and nucleotide binding: analysis by intrinsic tryptophan fluorescence quenching
Authors: Flowers S, Biswas EE, Biswas SB.
Journal: Biochemistry (2003): 1910

D1 ring is stable and nucleotide-independent, whereas D2 ring undergoes major conformational changes during the ATPase cycle of p97-VCP
Authors: Wang Q, Song C, Yang X, Li CC.
Journal: J Biol Chem (2003): 32784

说明书
荧光标记的ADP-TAMRA conjugate [5-TAMRA-eda-ADP].pdf