Amplite 荧光法黄嘌呤检测试剂盒 货号13843-AAT Bioquest荧光染料

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Amplite 荧光法黄嘌呤检测试剂盒

Amplite 荧光法黄嘌呤检测试剂盒

Amplite 荧光法黄嘌呤检测试剂盒    货号13843 货号 13843 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 4584
Ex (nm) 571 Em (nm) 585
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 荧光法黄嘌呤检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测黄嘌呤的试剂盒,黄嘌呤是在大多数人体组织和液体中发现的嘌呤碱。 许多兴奋剂来源于黄嘌呤,包括咖啡因,氨茶碱,IBMX,旁黄嘌呤,己酮可可碱,可可碱和茶碱,它们可以刺激心率,收缩力,高浓度的心律失常。 因此,检测生物样品中的黄嘌呤变化对于疾病诊断和治疗监测是重要的。 Amplite 荧光黄嘌呤测定试剂盒为黄嘌呤的测量提供了快速且超灵敏的方法。 它可以用方便的96孔或384孔微量滴定板格式进行。 黄嘌呤在黄嘌呤氧化酶存在下氧化成尿酸以释放过氧化氢,其可以通过荧光酶标仪在Ex / Em = 540nm / 590nm下用Amplite Red特别测量。 使用Amplite 荧光黄嘌呤测定试剂盒,在100μL反应体积中检测到低至0.4μM的黄嘌呤。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 荧光法黄嘌呤检测试剂盒。 

 

适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 540nm
发射: 590nm
cutoff: 570nm
推荐孔板: 黑色孔板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备黄嘌呤标准品或测试样品(50 µL)
2.添加黄嘌呤工作溶液(50 µL)
3.在室温下孵育30-60分钟
4.在Ex / Em = 540/590 nm时读取荧光强度

 

溶液配制

1.储存溶液配制

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 Amplite Red底物储备液(250X):
在Amplite Red底物(组分A)的小瓶中加入40 µL DMSO(组分F)。 注意:Amplite Red底物在硫醇(例如二硫苏糖醇(DTT)和2-巯基乙醇)的存在下不稳定。 反应中DTT或2-巯基乙醇的终浓度应不高于10 µM。 由于Amplite Red在pH> 8.5时不稳定,因此应在pH 7-8(建议pH 7.4)下进行测定。

1.2 HRP储备溶液(500X):
将100 µL测定缓冲液(组分B)加到辣根过氧化物酶(组分C)小瓶中。

1.3 黄嘌呤氧化酶(XO)储备溶液(100X):
向小瓶黄嘌呤氧化酶(组分E)中加入100 µL测定缓冲液(组分B)制成黄嘌呤氧化酶(XO)储备液(100X)。

 

2.标准溶液配制

黄嘌呤标准品
将5 µL黄嘌呤标准品(组分D)添加到995 µL测定缓冲液(组分B)中,得到100 µM黄嘌呤标准溶液。 取200 µL 100 µM黄嘌呤标准溶液进行1:3连续稀释,以得到连续稀释的黄嘌呤标准液(X1-X7)。

 

3.工作溶液配制

将20μL的Amplite Red底物储备液(250X),10μL的HRP储备液(500X)和50μL的黄嘌呤氧化酶储备液(100X)加到5 mL的测定缓冲液(组分B)中,制成总体积 5.08毫升。 注意:避免直接暴露在光线下并立即使用。

 

样品操作及实验分析

表1.黑色壁/实心底部96孔微孔板中黄嘌呤标准品和测试样品的布局。 X =黄嘌呤标准品(X1-X7,0.137至100 µM); BL =空白对照; TS =测试样品。

BL BL TS TS
X1 X1
X2 X2
X3 X3    
X4 X4    
X5 X5    
X6 X6    
X7 X7    

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
X1-X7 50ul 连续稀释(0.137至100 µM)
BL 50ul 分析缓冲液(组分B)
TS 50ul 测试样品

1.根据表1和表2提供的布局,准备黄嘌呤标准品(X),空白对照(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25 µL试剂,而不是50 µL。

2.在黄嘌呤标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入50 µL黄嘌呤工作溶液,使总黄嘌呤测定体积为100 µL /孔。 对于384孔板,请向每个孔中添加25 µL工作溶液,总体积为50 µL /孔。

3.在避光条件下,于室温下孵育反应30至60分钟。

4.使用酶标仪在激发= 530-570 nm(最佳540 nm),发射= 590-600 nm(最佳590 nm),截止= 570 nm的条件下监控荧光的增加。

 

参考文献

Concentration-dependent effect of sodium hypochlorite on stem cells of apical papilla survival and differentiation
Authors: Martin DE, De Almeida JF, Henry MA, Khaing ZZ, Schmidt CE, Teixeira FB, Diogenes A.
Journal: J Endod (2014): 51

Effect of hypochlorite oxidation on cholinesterase-inhibition assay of acetonitrile extracts from fruits and vegetables for monitoring traces of organophosphate pesticides
Authors: Kitamura K, Maruyama K, Hamano S, Kishi T, Kawakami T, Takahashi Y, Onodera S.
Journal: J Toxicol Sci (2014): 71

A simple yet effective chromogenic reagent for the rapid estimation of bromate and hypochlorite in drinking water
Authors: Zhang J, Yang X.
Journal: Analyst (2013): 434

Analysis of the germination kinetics of individual Bacillus subtilis spores treated with hydrogen peroxide or sodium hypochlorite
Authors: Setlow B, Yu J, Li YQ, Setlow P.
Journal: Lett Appl Microbiol (2013): 259

Comparative antimicrobial activities of aerosolized sodium hypochlorite, chlorine dioxide, and electrochemically activated solutions evaluated using a novel standardized assay
Authors: Thorn RM, Robinson GM, Reynolds DM.
Journal: Antimicrob Agents Chemother (2013): 2216

Effect of hypochlorite-based disinfectants on inactivation of murine norovirus and attempt to eliminate or prevent infection in mice by addition to drinking water
Authors: Takimoto K, Taharaguchi M, Sakai K, Takagi H, Tohya Y, Yamada YK.
Journal: Exp Anim (2013): 237

Green synthesis of carbon dots with down- and up-conversion fluorescent properties for sensitive detection of hypochlorite with a dual-readout assay
Authors: Yin B, Deng J, Peng X, Long Q, Zhao J, Lu Q, Chen Q, Li H, Tang H, Zhang Y, Yao S.
Journal: Analyst (2013): 6551

Use of pyrogallol red and pyranine as probes to evaluate antioxidant capacities towards hypochlorite
Authors: Perez-Cruz F, Cortes C, Atala E, Bohle P, Valenzuela F, Olea-Azar C, Speisky H, Aspee A, Lissi E, Lopez-Alarcon C, Bridi R.
Journal: Molecules (2013): 1638

A novel flow-injection analysis system for evaluation of antioxidants by using sodium dichloroisocyanurate as a source of hypochlorite anion
Authors: Ichiba H, Hanami K, Yagasaki K, Tanaka M, Ito H, Fukushima T.
Journal: Drug Discov Ther (2012): 44

Colorimetric determination of hypochlorite with unmodified gold nanoparticles through the oxidation of a stabilizer thiol compound
Authors: Zhang J, Wang X, Yang X.
Journal: Analyst (2012): 2806

 

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说明书
Amplite 荧光法黄嘌呤检测试剂盒.pdf

Amplite 比色法黄嘌呤氧化酶检测试剂盒 货号11307-AAT Bioquest荧光染料

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Amplite 比色法黄嘌呤氧化酶检测试剂盒

Amplite 比色法黄嘌呤氧化酶检测试剂盒

Amplite 比色法黄嘌呤氧化酶检测试剂盒    货号11307 货号 11307 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 2604
Ex (nm) 571 Em (nm) 584
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 比色法黄嘌呤氧化酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于黄嘌呤的试剂盒,黄嘌呤氧化酶(XO)是一种催化次黄嘌呤氧化成黄嘌呤的酶,可以进一步催化黄嘌呤氧化成尿酸。它在嘌呤的分解代谢中起重要作用。黄嘌呤氧化酶通常存在于肝脏和空肠中。在严重肝损伤期间,黄嘌呤氧化酶被释放到血液中,因此XO的血液测定是确定肝脏损伤是否已经发生的一种方法。Amplite 比色黄嘌呤氧化酶检测试剂盒为黄嘌呤氧化酶活性的测量提供了一种快速,超灵敏的方法。它可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式进行,并且无需分离步骤即可轻松适应自动化。在该测定中,黄嘌呤氧化酶催化嘌呤碱基,次黄嘌呤或黄嘌呤氧化成尿酸和超氧化物,其自发降解为过氧化氢(H2O2)。该试剂盒使用我们的Amplite Red基板,使用吸光度酶标仪可以在~570 nm处轻松读取颜色信号。使用Amplite 比色黄嘌呤氧化酶检测试剂盒,我们在100μL反应体积中检测到低至0.3 mU / mL的黄嘌呤氧化酶。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 比色法黄嘌呤氧化酶检测试剂盒。 

点击查看光谱

 

适用仪器


光吸收酶标仪  
吸收: 540/610nm
推荐孔板: 透明底板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备并添加XO标准品和/或测试样品(50μL)
2.准备并添加XO Assay工作溶液(50μL)
3.在室温下孵育30-60分钟
4.在OD比为570 / 610nm时读取吸光度增加

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
1.1 Amplite 红色储备液(250X):
将40μLDMSO(组分F)加入到Amplite Red底物(组分A)的小瓶中。应立即使用原液。任何剩余的溶液应等分并在-20℃重新冷冻。注意:避免反复冻融循环。注意:在硫醇如二硫苏糖醇(DTT)和2-巯基乙醇存在下,Amplite Red底物不稳定。反应中DTT或2-巯基乙醇的最终浓度应不高于10μM。 Amplite Red底物在高pH(> 8.5)下也不稳定。因此,反应应在pH 7-8下进行。建议使用提供的分析缓冲液(pH 7.4)。

1.2 HRP库存解决方案(500X):
将100μL测定缓冲液(组分B)加入HRP小瓶(组分C)中。注意:未使用的HRP储备溶液(500X)应分成一次性使用的等分试样并储存在-20 oC。

1.3 黄嘌呤氧化酶(XO)原液:
将200μL测定缓冲液(组分B)加入黄嘌呤氧化酶标准品(组分E)的小瓶中。注意:未使用的XO储备溶液应分为单次使用的等分试样并储存在-20ºC。

 

2.标准溶液

黄嘌呤氧化酶标准
将10μL1U/ mL XO储备液加入990μL分析缓冲液(组分B)中,制成10 mU / mL XO标准溶液。进行1:3连续稀释,得到约10,3,1,0.3,0.1, 0.03,0.01和0mU / mL连续稀释的XO标准品。

 

3.工作溶液

表1.一个透明底96孔微孔板的XO分析工作溶液(2X)

成分 规格
Amplite 红色储备液(250x) 20ul
HRP(500X) 10ul
黄嘌呤(100X) 50ul
分析缓冲液 5ml
总容积 5.08ml

 

样品分析

表2.在透明底96孔微孔板中的黄嘌呤氧化酶标准品和测试样品的布局。 XOS =黄嘌呤氧化酶标准品(XOS1-XOS7); BL =空白对照; TS =测试样品。

BL BL TS TS
XOS1 XOS1
XOS2 XOS2
XOS3 XOS3    
XOS4 XOS4    
XOS5 XOS5    
XOS6 XOS6    
XOS7 XOS7    

表3.每个孔的试剂组成

XO标准 空白 测试样本
连续稀释:50μL 测定缓冲液(化合物B):50μL 50 µL

注意:黄嘌呤氧化酶标准仅用于阳性对照,不应作为酶活性的定量标准。

1.如表2和3中所述,将XO标准品和含有XO的测试样品加入白色透明底部微孔板中。

2.将50μLXOAssay工作溶液加入XO标准品,空白对照和测试样品的每个孔中(表2),使总XO测定体积为100μL/孔。 注意:对于384孔板,每孔加入25μL样品和25μL测定反应混合物。

3.在室温下孵育反应30至60分钟,避光。

4.用吸光度读数器监测信号强度,OD比为570 / 610nm。

 

参考文献

Xanthine oxidoreductase regulates macrophage IL1β secretion upon NLRP3 inflammasome activation
Authors: Annette Ives, Johji Nomura, Fabio Martinon, Thierry Roger, Didier LeRoy, Jeffrey N Miner, Gregoire Simon, Nathalie Busso, Alexander So
Journal: Nature communications (2015)

 

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说明书
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Amplite 荧光法黄嘌呤氧化酶检测试剂盒 红色荧光 货号11304-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Amplite 荧光法黄嘌呤氧化酶检测试剂盒 红色荧光

Amplite 荧光法黄嘌呤氧化酶检测试剂盒 红色荧光

Amplite 荧光法黄嘌呤氧化酶检测试剂盒 红色荧光     货号11304 货号 11304 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 2604
Ex (nm) 571 Em (nm) 584
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 荧光法黄嘌呤氧化酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的谷氨酸检测的试剂盒,XO(黄嘌呤氧化酶)是一种能催化次黄嘌呤到黄嘌呤或者更进一步催化黄嘌呤到尿酸的酶。在嘌呤的分解代谢扮演着重要角色。XO通常能在肝脏或者空肠检测到。在重度肝损伤,XO释放到血液中,因此血液中XO检测试验可以用来确定肝脏损伤的发生。黄嘌呤尿是一种少见遗传病,缺少XO导致血中高浓度黄嘌呤引起肾衰竭等健康疾病。Amplite XO检测试剂盒提供了一种快速超敏感的方法,来检测XO的活性。本试剂盒可以用于96或384微孔板分析,并且无需任何分步骤,就可以轻易地实现自动化。在实验分析种,XO氧化嘌呤碱基,次黄嘌呤、黄嘌呤转变成尿酸或者超氧化物,后者又自发的降解为双氧水。该试剂盒使用我们的Amplite Red底物使其成为双记录模式。红色的荧光信号很容易的通过荧光酶标仪(540/590nm)检测到或者被酶标仪(576nm)检测。Amplite黄嘌呤氧化酶检测试剂盒在100 ul检测体积中能检测到0.15mU/ml的XO。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 荧光法黄嘌呤氧化酶检测试剂盒。 

点击查看光谱

 

适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 540nm
发射: 590nm
cutoff: 570nm
推荐孔板: 黑色孔板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.XO标准品或测试样品(50μL)
2.添加XO工作溶液(50μL)
3.在室温下孵育15-30分钟
4.在Ex / Em = 540/590 nm处读取荧光强度(截止570 nm)

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
1. Amplite 红色储备液(250X):
将40μLDMSO(组分F)加入到Amplite Red底物(组分A)的小瓶中。应立即使用原液。注意:在硫醇如二硫苏糖醇(DTT)和2-巯基乙醇存在下,Amplite Red底物不稳定。反应中DTT或2-巯基乙醇的最终浓度应不高于10μM。 Amplite Red底物在高pH(> 8.5)下也不稳定。因此,反应应在pH = 7-8下进行。推荐使用所提供的测定缓冲液,pH = 7.4。

2. HRP库存解决方案(500X):
将100μL测定缓冲液(组分B)加入到辣根过氧化物酶(组分C)的小瓶中。

3.黄嘌呤氧化酶(XO)标准溶液(1 U / mL)
将200μL测定缓冲液(组分B)加入黄嘌呤氧化酶标准品(组分E)的小瓶中。

 

2.标准溶液

XO标准
将10μL1U/ mL XO标准溶液加入990μL测定缓冲液(组分B)中以制备10mU / mL XO标准溶液(XO7)。 进行1:3连续稀释,得到剩余的连续稀释的XO标准品(XO6-XO1)。

 

3.工作溶液

将20μLDelterite Red储备溶液(250X),10μLHRP储备溶液(500X)和50μL黄嘌呤(100X,组分D)加入5mL分析缓冲液(组分B)中,使总体积为 5.08mL黄嘌呤氧化酶(XO)工作溶液,避光。

 

样品分析

表1.实心黑色96孔微孔板中XO标准品和测试样品的布局

BL BL TS TS
XO1 XO1
XO2 XO2
XO3 XO3    
XO4 XO4    
XO5 XO5    
XO6 XO6    
XO7 XO7    

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
XO1-XO7 50ul 连续稀释(0.01至10 mU / mL)
BL 50ul 分析缓冲液(组分B)
TS 50ul 样品

1.根据表1和表2中提供的布局,将XO标准品(XO),空白对照(BL)和测试样品(TS)制备成固体黑色96孔微孔板。对于384孔板,使用25μL 每孔试剂代替50μL。

2.向XO标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入50μLXO工作溶液,使总XO测定体积为100μL/孔。 对于384孔板,在每个孔中加入25μLXO工作溶液,总体积为50μL/孔。

3.在室温下孵育反应15至30分钟,避光。

4.用荧光板读数器在激发= 530-570nm,发射= 590-600nm(最佳Ex / Em = 540 / 590nm),截止= 570nm监测荧光强度。

 

参考文献

Xanthine oxidoreductase regulates macrophage IL1β secretion upon NLRP3 inflammasome activation
Authors: Annette Ives, Johji Nomura, Fabio Martinon, Thierry Roger, Didier LeRoy, Jeffrey N Miner, Gregoire Simon, Nathalie Busso, Alexander So
Journal: Nature communications (2015)

 

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说明书
Amplite 荧光法黄嘌呤氧化酶检测试剂盒 红色荧光 .pdf

Amplite 比色法黄嘌呤检测试剂盒 货号13842-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Amplite 比色法黄嘌呤检测试剂盒

Amplite 比色法黄嘌呤检测试剂盒

Amplite 比色法黄嘌呤检测试剂盒    货号13842 货号 13842 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 4584
Ex (nm) 575 Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 比色法黄嘌呤检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测黄嘌呤的试剂盒,黄嘌呤是在大多数人体组织和液体中发现的嘌呤碱。 许多兴奋剂来源于黄嘌呤,包括咖啡因,氨茶碱,IBMX,旁黄嘌呤,己酮可可碱,可可碱和茶碱,它们可以刺激心率,收缩力,高浓度的心律失常。 因此,检测生物样品中的黄嘌呤变化对于疾病诊断和治疗监测是重要的。 Amplite 比色黄嘌呤测定试剂盒为测量黄嘌呤提供了一种快速且超灵敏的方法。 它可以用方便的96孔或384孔微量滴定板格式进行。 黄嘌呤在黄嘌呤氧化酶存在下氧化成尿酸释放过氧化氢,用吸光度酶标仪在576nm处用Amplite Red进行特异性测定。 使用Amplite 比色黄嘌呤测定试剂盒,在100μL反应体积中检测到低至1.2μM的黄嘌呤。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 比色法黄嘌呤检测试剂盒。 

 

适用仪器


光吸收酶标仪  
吸收: 570/610nm
推荐孔板: 透明底板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备黄嘌呤标准品和测试样品(50 µL)
2.添加黄嘌呤工作溶液(50 µL)
3.在室温下孵育30-60分钟
4.OD比为570/610 nm时读取吸光度增加

 

溶液配制

1.储存溶液配制

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。避免重复冻融循环。
1.1 Amplite 红色底物储备液(250X):
在Amplite 红色底物(组分A)的小瓶中加入40 µL DMSO(组分F)。注意:Amplite 红色底物在硫醇(如二硫苏糖醇(DTT)和2-巯基乙醇)的存在下不稳定。反应中DTT或2-巯基乙醇的终浓度应不高于10 µM。由于Amplite Red的pH不稳定> 8.5,因此应在pH 7 – 8(建议pH 7.4)下进行测定。

1.2 HRP储备溶液(500X):
将100 µL测定缓冲液(组分B)加到辣根过氧化物酶(组分C)小瓶中。

1.3 黄嘌呤氧化酶(XO)储备溶液(100X):
向小瓶黄嘌呤氧化酶标准品(组分E)中添加100 µL测定缓冲液(组分B),制成黄嘌呤氧化酶(XO)储备液(100X)。

1.4 黄嘌呤标准溶液(100 µM):
将5 µL黄嘌呤标准品(组分D)添加到995 µL测定缓冲液(组分B)中,得到100 µM黄嘌呤标准溶液。

 

2.标准溶液配制

黄嘌呤标准品
用100 µM黄嘌呤标准溶液(X7)进行1:3系列稀释,以获得黄嘌呤标准液(X6-X1)。

 

3.工作溶液配制

将20μL的Amplite Red底物储备液(250X),10μL的HRP储备液(500X)和50μL的黄嘌呤氧化酶储备液(100X)加入5 mL的测定缓冲液中,使总体积为5.08 mL,避光。

 

样品操作及实验分析

表1.在透明的底部96孔微孔板(50 µL /孔)中的黄嘌呤标准品和测试样品的布局。 X =黄嘌呤标准品(X1-X7,0.1至100 µM),BL =空白对照,TS =测试样品。

BL BL TS TS
X1 X1
X2 X2
X3 X3    
X4 X4    
X5 X5    
X6 X6    
X7 X7    

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
X1-X7 50ul 连续稀释液(0.1至100 µM)
BL 50ul 分析缓冲液(组分B)
TS 50ul 测试样品

1.根据表1和2中提供的布局,准备黄嘌呤标准品(X),空白对照(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25 µL试剂代替50 µL。

2.向黄嘌呤标准品,空白对照和测试样品的每个孔中添加50 µL工作溶液,以使黄嘌呤测定总体积为100 µL /孔。 对于384孔板,请向每个孔中添加25 µL工作溶液,总体积为50 µL /孔。

3.在避光条件下,于室温下孵育反应30至60分钟。

4.使用吸光度板读数器以570/610 nm的OD比监视信号强度。

 

参考文献

Concentration-dependent effect of sodium hypochlorite on stem cells of apical papilla survival and differentiation
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Amplite 比色法黄嘌呤检测试剂盒.pdf