Cell Navigator NBD神经酰胺高尔基体染色试剂盒 绿色荧光 货号22750-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Navigator NBD神经酰胺高尔基体染色试剂盒 绿色荧光

Cell Navigator NBD神经酰胺高尔基体染色试剂盒 绿色荧光

Cell Navigator NBD神经酰胺高尔基体染色试剂盒 绿色荧光     货号22750 货号 22750 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 2604
Ex (nm) 467 Em (nm) 538
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

高尔基体是大多数真核细胞胞质内囊泡和折叠膜的复合体,参与分泌和细胞内运输。它修饰内质网(ER)中内置的蛋白质和脂质,并准备将其输出到细胞外。它还在脂质在整个细胞中的运输和溶酶体的形成中起着重要作用。该Cell Navigator™NBD神经酰胺高尔基染色试剂盒提供了一种简便,快速的方法,可以选择性地对活细胞或醛固定细胞中的高尔基染色。将C6 NBD神经酰胺与牛血清白蛋白(C6-NBD-Ceramide-BSA)形成复合物给予细胞。高尔基体通过形成相应的荧光代谢产物而被染色。

点击查看光谱

点击查看细胞培养方案

 

适用仪器


荧光显微镜  
激发: 488nm
发射: 525nm
推荐孔板: 黑色透明
滤波片: FITC滤波片组

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 根据需要处理细胞
  2. 加入C6 NBD神经酰胺工作溶液,在室温或37°C下孵育15〜30分钟
  3. 更换染色缓冲液,在室温或37°C下孵育15〜30分钟
  4. 使用FITC滤镜套件在显微镜下观察
  5. 可选:用4%甲醛固定细胞

 

储备溶液配制

除非另有说明,否则所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。避免重复冻融循环。
1. C6 NBD神经酰胺储备溶液(100X):
将100 µL DMSO(组分C)加入小瓶C6 NBD神经酰胺(组分A)中并充分混合。注:将未使用的C6 NBD神经酰胺原液在-20℃保存。避免冻融循环。

 

工作溶液配制

1. C6 NBD神经酰胺工作液:
将10 µL NBD神经酰胺原液(100X)添加到990 µL染色缓冲液(组分B)中,制成NBD神经酰胺工作液。
可选:将10 µL Hoechst 33342(组分D)添加到1mL NBD神经酰胺工作溶液中以进行核染色。

 

操作步骤

  1. 接种并根据需要处理细胞。
  2. 直接在细胞培养基中加入100µL C6 NBD神经酰胺工作溶液。
  3. 在室温或37°C下孵育15〜30分钟。
  4. 除去C6 NBD神经酰胺工作溶液,并用100 µL /孔的染色缓冲液(组分B)代替。
  5. 在室温或37°C下孵育10〜15分钟。
  6. 在装有FITC滤光片的荧光显微镜下观察。
  7. 从步骤4中除去染色缓冲液,然后向每个孔中添加100 µL /孔/ 96孔板的4%甲醛固定缓冲液(未提供)。 注意:对于非贴壁细胞,请添加所需量(例如2X106细胞/ mL)的4%甲醛固定液。(可选)
  8. 在室温下将平板孵育20至30分钟。 去除固定剂。 用PBS洗涤细胞2-3次,然后用100 µL /孔的染色缓冲液(组分B)替换。(可选)

 

图例

Cell Navigator NBD神经酰胺高尔基体染色试剂盒 绿色荧光     货号22750

图1. HeLa细胞中NBD神经酰胺高尔基染色的荧光图像。 细胞在37°C下用100 µL C6 NBD神经酰胺工作溶液染色20分钟,然后用Hoechst 33342染色。 高尔基体被认为是部分包围细胞核的强烈荧光线状结构。

 

参考文献

Molecular determinants of ER-Golgi contacts identified through a new FRET-FLIM system
Authors: R. Venditti
Journal: J Cell Biol (2019): 1055-1065

A Golgi Lipid Signaling Pathway Controls Apical Golgi Distribution and Cell Polarity during Neurogenesis
Authors: Z. Xie
Journal: Dev Cell (2018): 725-740 e4

A putative calcium-ATPase of the secretory pathway family may regulate calcium/manganese levels in the Golgi apparatus of Entamoeba histolytica
Authors: M. A. Rodriguez
Journal: Parasitol Res (2018): 3381-3389

Activation of neutral sphingomyelinase 2 by starvation induces cell-protective autophagy via an increase in Golgi-localized ceramide
Authors: M. J. Back
Journal: Cell Death Dis (2018): 670

Functions of neutral ceramidase in the Golgi apparatus
Authors: W. Sakamoto
Journal: J Lipid Res (2018): 2116-2125

Regulation of glucosylceramide synthesis by Golgi-localized phosphoinositide
Authors: Y. Ishibashi
Journal: Biochem Biophys Res Commun (2018): 1011-1018

Structure of the Golgi apparatus is not influenced by a GAG deletion mutation in the dystonia-associated gene Tor1a
Authors: S. B. Mitchell
Journal: PLoS One (2018): e0206123

An inducible ER-Golgi tether facilitates ceramide transport to alleviate lipotoxicity
Authors: L. K. Liu
Journal: J Cell Biol (2017): 131-147

Ceramide Transport from the Endoplasmic Reticulum to the Trans Golgi Region at Organelle Membrane Contact Sites
Authors: K. Hanada
Journal: Adv Exp Med Biol (2017): 69-81

Endoplasmic reticulum is the sorting core facility in the Golgi-lacking protozoan Giardia lamblia
Authors: N. Zamponi
Journal: Traffic (2017): 604-621

说明书
Cell Navigator NBD神经酰胺高尔基体染色试剂盒 绿色荧光 .pdf

Cell Navigator™TMR神经酰胺高尔基体染色试剂盒*红色荧光* 货号22752-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Navigator™TMR神经酰胺高尔基体染色试剂盒*红色荧光*

Cell Navigator™TMR神经酰胺高尔基体染色试剂盒*红色荧光*

Cell Navigator™TMR神经酰胺高尔基体染色试剂盒*红色荧光*    货号22752 货号 22752 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 3732
Ex (nm) 544 Em (nm) 570
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

高尔基体是大多数真核细胞胞质内囊泡和折叠膜的复合体,参与分泌和细胞内运输。它修饰内质网(ER)中内置的蛋白质和脂质,并准备将其运输到细胞外。它还在脂质在整个细胞中的运输和溶酶体的形成中起着重要作用。Cell Navigator™TMR神经酰胺高尔基染色试剂盒提供了一种简便,快速的方法,可以在活细胞中以红色荧光染色高尔基体。高尔基体通过形成相应的荧光代谢产物而被染色。Cell Navigator™TMR神经酰胺高尔基染色试剂盒提供了一种优化的测定方法,可用于通过荧光显微镜检查高尔基体的形态。

点击查看光谱

 

适用仪器


荧光显微镜  
激发: Cy3/TRITC滤波片组
发射: Cy3/TRITC滤波片组
推荐孔板: 黑色透明

 

产品说明书

样品分析方案

概述

根据需要处理细胞

加入GGR169-神经酰胺工作溶液并在室温或37°C下孵育15至30分钟

添加染色缓冲液

使用Cy3滤波片组在显微镜下观察 

 

储备溶液配制

GGR169-神经酰胺原液(100X)

向GGR-神经酰胺(组分A)中加入100 µL DMSO(组分C)制成GGR169-神经酰胺原液(100X)。
注意:将未使用的GGR-神经酰胺原液分装在-20°C下,以单次使用,避免冻融循环。

 
工作溶液配制
GGR169-神经酰胺工作液

将10 µL GGR169-神经酰胺原液(100X)添加到990 µL染色缓冲液(组分B)中,制成GGR169-神经酰胺工作液。
可选:向1 mL GGR169-神经酰胺工作溶液中加入10 µL Hoechst 33342(组分D)以进行核染色。在带有DAPI滤光片组的荧光显微镜下观察。

 

操作步骤

以下指南应用于指导方针,并可根据要求进行修改。

  1. 接种并根据需要处理细胞。
  2. 将100 µL GGR169-神经酰胺工作溶液直接添加到细胞培养基中。
  3. 在室温或37°C下孵育15至30分钟。
  4. 除去GGR169-神经酰胺工作溶液,并用DPBS或您选择的缓冲液清洗一次。
  5. 加入100 µL /孔的染色缓冲液(组分B)。
  6. 在装有Cy3滤光片的荧光显微镜下观察。 

 

图示

Cell Navigator™TMR神经酰胺高尔基体染色试剂盒*红色荧光*    货号22752

图1.HeLa细胞中GGR169神经酰胺高尔基染色的荧光图像。在37°C下,用100μL具有Hoechst 33342的GGR169-神经酰胺工作溶液对细胞染色20分钟。

 

参考文献

Chlamydia trachomatis-infected human cells convert ceramide to sphingomyelin without sphingomyelin synthases 1 and 2.
Authors: Tachida, Yuriko and Kumagai, Keigo and Sakai, Shota and Ando, Shuji and Yamaji, Toshiyuki and Hanada, Kentaro
Journal: FEBS letters (2020): 519-529

The role of ceramide in regulating endoplasmic reticulum function.
Authors: Zelnik, Iris D and Ventura, Ana E and Kim, Jiyoon L and Silva, Liana C and Futerman, Anthony H
Journal: Biochimica et biophysica acta. Molecular and cell biology of lipids (2020): 158489

Neuronal ceroid lipofuscinosis related ER membrane protein CLN8 regulates PP2A activity and ceramide levels.
Authors: Adhikari, Babita and De Silva, Bhagya and Molina, Joshua A and Allen, Ashton and Peck, Sun H and Lee, Stella Y
Journal: Biochimica et biophysica acta. Molecular basis of disease (2019): 322-328

Structure, functions and regulation of CERT, a lipid-transfer protein for the delivery of ceramide at the ER-Golgi membrane contact sites.
Authors: Kumagai, Keigo and Hanada, Kentaro
Journal: FEBS letters (2019): 2366-2377

Activation of neutral sphingomyelinase 2 by starvation induces cell-protective autophagy via an increase in Golgi-localized ceramide.
Authors: Back, Moon Jung and Ha, Hae Chan and Fu, Zhicheng and Choi, Jong Min and Piao, Yongwei and Won, Jong Hoon and Jang, Ji Min and Shin, In Chul and Kim, Dae Kyong
Journal: Cell death & disease (2018): 670

Antidepressants act by inducing autophagy controlled by sphingomyelin-ceramide.
Authors: Gulbins, Anne and Schumacher, Fabian and Becker, Katrin Anne and Wilker, Barbara and Soddemann, Matthias and Boldrin, Francesco and Müller, Christian P and Edwards, Michael J and Goodman, Michael and Caldwell, Charles C and Kleuser, Burkhard and Kornhuber, Johannes and Szabo, Ildiko and Gulbins, Erich
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Both the N- and C- terminal regions of the Chlamydial inclusion protein D (IncD) are required for interaction with the pleckstrin homology domain of the ceramide transport protein CERT.
Authors: Kumagai, Keigo and Elwell, Cherilyn A and Ando, Shuji and Engel, Joanne N and Hanada, Kentaro
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2018): 1070-1076

Ceramide Transporter CERT Is Involved in Muscle Insulin Signaling Defects Under Lipotoxic Conditions.
Authors: Bandet, Cécile L and Mahfouz, Rana and Véret, Julien and Sotiropoulos, Athanassia and Poirier, Maxime and Giussani, Paola and Campana, Mélanie and Philippe, Erwann and Blachnio-Zabielska, Agnieszka and Ballaire, Raphaëlle and Le Liepvre, Xavier and Bourron, Olivier and Berkeš, Dušan and Górski, Jan and Ferré, Pascal and Le Stunff, Hervé and Foufelle, Fabienne and Hajduch, Eric
Journal: Diabetes (2018): 1258-1271

Ceramide-transfer protein-mediated ceramide transfer is a structurally tunable flow-inducing mechanism with structural feed-forward loops.
Authors: Giordano, Giulia
Journal: Royal Society open science (2018): 180494

Phosphoinositide binding by the PH domain in ceramide transfer protein (CERT) is inhibited by hyperphosphorylation of an adjacent serine-repeat motif.
Authors: Sugiki, Toshihiko and Egawa, Daichi and Kumagai, Keigo and Kojima, Chojiro and Fujiwara, Toshimichi and Takeuchi, Koh and Shimada, Ichio and Hanada, Kentaro and Takahashi, Hideo
Journal: The Journal of biological chemistry (2018): 11206-11217

说明书
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