AF 532 酪胺 货号11072-AAT Bioquest荧光染料

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AF 532 酪胺

AF 532 酪胺

AF 532 酪胺    货号11072 货号 11072 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Slides 价格 2388
Ex (nm) 534 Em (nm) 553
分子量 847.06 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:11072

产品名称:AF 532 酪胺

规格:200 Slides

储存条件:保存在冰箱-15℃干燥

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:847.06

外观:固体

溶剂:DMSO

激发波长(nm):534

发射波长(nm):553

 

产品介绍

酪胺信号放大 (TSA) 已被证明是一种特别通用且功能强大的酶信号放大技术,具有更高的检测灵敏度。 TSA 基于 HRP 的能力,在低浓度过氧化氢存在下,将标记的含酪胺的底物转化为氧化的、高反应性自由基,该自由基可以与 HRP 处或附近的酪氨酸残基共价结合。在免疫组织化学应用中,TSA 方法的灵敏度增强可以增加一抗稀释度以减少非特异性背景信号,并且可以克服低水平目标表达引起的弱免疫标记。AF 532 酪胺含有 Alexa Fluor® 532 荧光团,可通过 Alexa Fluor® 532/ATTO 532 滤光片组轻松检测(Alexa Fluor® 是 ThermoFisher 的商标)。 AF 532 tyramide 具有强烈的橙黄色荧光。

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iFluor 633 酪胺 货号11083-AAT Bioquest荧光染料

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iFluor 633 酪胺

iFluor 633 酪胺

iFluor 633 酪胺    货号11083 货号 11083 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Slides 价格 2388
Ex (nm) 640 Em (nm) 654
分子量 1271.67 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:11083

产品名称:iFluor 633 酪胺

规格:200 Slides

储存条件:保存在冰箱-15℃干燥

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:1271.67

外观:固体

溶剂:DMSO

激发波长(nm):640

发射波长(nm):654

 

产品介绍

酪胺信号放大 (TSA) 已被证明是一种特别通用且功能强大的酶信号放大技术,具有更高的检测灵敏度。 TSA 基于 HRP 的能力,在低浓度过氧化氢存在下,将标记的含酪胺的底物转化为氧化的、高反应性自由基,该自由基可以与 HRP 处或附近的酪氨酸残基共价结合。在免疫组织化学应用中,TSA 方法的灵敏度增强可以增加一抗稀释度以减少非特异性背景信号,并且可以克服低水平目标表达引起的弱免疫标记。iFluor 633 酪胺含有明亮的 iFluor 633 荧光团,可使用标准 Cy5 滤光片组轻松检测。 iFluor 633 是最亮的 NIR 荧光团之一。 

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生物素酪胺 CAS 41994-02-9 货号45350-AAT Bioquest荧光染料

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生物素酪胺 CAS 41994-02-9

生物素酪胺 CAS 41994-02-9

生物素酪胺 CAS 41994-02-9    货号45350 货号 45350 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 5 mg 价格 1200
Ex (nm) Em (nm)
分子量 363.48 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:45350

产品名称:生物素酪胺

CAS:41994-02-9

规格:5mg

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:363.48

溶剂:DMSO

 

产品介绍

对于许多免疫组织化学(IHC)的应用,传统的酶扩增程序足以实现充分的抗原检测。然而,有几个因素限制了这些程序的敏感性和实用性。酪胺信号放大技术(TSA)已被证明是一种特别通用和强大的酶放大技术,提高了检测灵敏度。TSA是基于HRP在低浓度过氧化氢存在下将标记的酪胺底物转化为氧化的、高活性的自由基的能力,该自由基可在HRP处或其附近共价结合酪氨酸残基。这一过程被称为催化报告沉积(CARD),通过每个过氧化物酶标签上的多个酪胺底物的转换所产生的信号放大转化为对低丰度目标的超灵敏检测和使用少量抗体和杂交探针。在免疫组化应用中,TSA法的敏感性增强使原代抗体稀释度增加,以减少非特异性背景信号,并能克服由于固定程序不理想或靶蛋白表达水平低而导致的弱免疫标记。生物素酪胺被认为能在所有TSA试剂中实现最大限度的IHC检测。生物素酪胺已用于免疫组织化学、ELISA、Western blot和原位杂交应用。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的生物素酪胺。

 

参考文献

High specificity and tight spatial restriction of self-biotinylation by DNA and RNA G-Quadruplexes complexed in vitro and in vivo with Heme.
Authors: Lat, Prince Kumar and Liu, Kun and Kumar, Dev N and Wong, Kenneth K L and Verheyen, Esther M and Sen, Dipankar
Journal: Nucleic acids research (2020)

APEX Peroxidase-Catalyzed Proximity Labeling and Multiplexed Quantitative Proteomics.
Authors: Kalocsay, Marian
Journal: Methods in molecular biology (Clifton, N.J.) (2019): 41-55

Biotinylation and isolation of an RNA G-quadruplex based on its peroxidase-mimicking activity.
Authors: Li, Wei and Zeng, Weiwu and Chen, Yi and Wang, Fang and Wu, Fan and Weng, Xiaocheng and Zhou, Xiang
Journal: The Analyst (2019): 4472-4476

Proximity labeling of cis-ligands of CD22/Siglec-2 reveals stepwise α2,6 sialic acid-dependent and -independent interactions.
Authors: Alborzian Deh Sheikh, Amin and Akatsu, Chizuru and Imamura, Akihiro and Abdu-Allah, Hajjaj H M and Takematsu, Hiromu and Ando, Hiromune and Ishida, Hideharu and Tsubata, Takeshi
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2018): 854-859

Identification of Siglec Ligands Using a Proximity Labeling Method.
Authors: Chang, Lanyi and Chen, Yi-Ju and Fan, Chan-Yo and Tang, Chin-Ju and Chen, Yi-Hsiu and Low, Penk-Yeir and Ventura, Albert and Lin, Chun-Cheng and Chen, Yu-Ju and Angata, Takashi
Journal: Journal of proteome research (2017): 3929-3941

Tyramide Signal Amplification Permits Immunohistochemical Analyses of Androgen Receptors in the Rat Prefrontal Cortex.
Authors: Low, Katelyn L and Ma, Chunqi and Soma, Kiran K
Journal: The journal of histochemistry and cytochemistry : official journal of the Histochemistry Society (2017): 295-308

Immunohistochemical Methods for Measuring Tissue Lymphangiogenesis.
Authors: Royston, Daniel J and Clasper, Steven and Jackson, David G
Journal: Methods in molecular biology (Clifton, N.J.) (2016): 35-48

Development of a highly sensitive immunohistochemical method to detect neurochemical molecules in formalin-fixed and paraffin-embedded tissues from autopsied human brains.
Authors: Goto, Satoshi and Morigaki, Ryoma and Okita, Shinya and Nagahiro, Shinji and Kaji, Ryuji
Journal: Frontiers in neuroanatomy (2015): 22

Development of a sensitive ELISA for quantification of three- and four-repeat tau isoforms in tauopathies.
Authors: Luk, Connie and Giovannoni, Gavin and Williams, David R and Lees, Andrew J and de Silva, Rohan
Journal: Journal of neuroscience methods (2009): 34-42

Levels of pregnancy-associated plasma protein A in patients with coronary artery disease.
Authors: Liu, Zhi-Yuan and Zhang, Jin-Ying and Sun, Tong-Wen and Zhang, Yan-Jun and Zhang, Li and Wang, Le-Xin
Journal: Clinical and investigative medicine. Medecine clinique et experimentale (2008): E85-9

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Azido-Cy5酪胺 货号11061-AAT Bioquest荧光染料

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Azido-Cy5酪胺

Azido-Cy5酪胺

Azido-Cy5酪胺    货号11061 货号 11061 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 3924
Ex (nm) 651 Em (nm) 670
分子量 1030.14 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:11061

产品名称:Azido-Cy5酪胺

规格:1mg

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:24个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:1030.14

溶剂:DMSO

激发波长(nm):644

发射波长(nm):665

 

适用仪器


荧光显微镜  
激发: Cy5滤波片组
发射: Cy5滤波片组
推荐孔板: 黑色透明

 

产品介绍

Azido-Cy5酪胺是美国AAT Bioquest生产的用于荧光标记的试剂,对于许多免疫组织化学(IHC)应用,传统的酶促扩增程序足以实现足够的抗原检测。但是,有几个因素限制了这些程序的敏感性和实用性。事实证明,酪胺信号放大(TSA)是一种特别通用且功能强大的酶扩增技术,具有更高的检测灵敏度。 TSA基于HRP在低浓度过氧化氢存在下将含有标记酪胺的底物转化为氧化的高反应性自由基的能力,该自由基可与HRP处或附近的酪氨酸残基共价结合。为了实现最大的IHC检测,酪胺用荧光团预标记。每个过氧化物酶标记物的多个酪胺底物的转换所赋予的信号放大转化了对低丰度靶标的超灵敏检测以及使用较少量的抗体和杂交探针。在免疫组织化学应用中,源自TSA方法的灵敏度增强允许增加一抗稀释以减少非特异性背景信号,并且可以克服由次优固定程序或低水平靶表达引起的弱免疫标记。 Azido-Cy5酪胺含有明亮的Cy5,可以使用标准Cy5过滤器套件轻松检测到。此外,它还包含一个叠加组,可用作点击化学构建块。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Azido-Cy5酪胺。 

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参考文献

Antibody-Driven Proximity Labeling in Fixed Tissues
Authors: Daniel Z Bar, Francis S Collins
Journal: (2019): 73–81

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iFluor 488 酪胺 货号45100-AAT Bioquest荧光染料

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iFluor 488 酪胺

iFluor 488 酪胺

iFluor 488 酪胺    货号45100 货号 45100 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 slides 价格 3924
Ex (nm) 491 Em (nm) 516
分子量 531.47 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

对于许多免疫组织化学(IHC)应用,传统的酶促扩增程序足以实现足够的抗原检测。但是,有几个因素限制了这些过程的敏感性和实用性。乙酰胺信号放大(TSA)已被证明是一种特别通用且功能强大的酶放大技术,具有很高的测定灵敏度。 TSA拥有HRP在低浓度过氧化氢的存在下将标记的含酪胺底物转化为可与HRP或附近的酪氨酸残基共价结合氧化的高反应性自由基的能力。为了实现最大程度的IHC检测,酪胺预先标记有荧光团,使用少量的抗体和杂交探针通过每个过氧化物酶标记的多个酪胺底物的更新而产生信号放大并转化为低丰度靶标的超灵敏检测。在免疫组织化学应用中,源自TSA方法的敏感性增强可以提高一抗稀释度,以减少非特异性背景信号,并且可以克服由于固定步骤或目标表达水平低而导致的免疫标记弱的问题。 iFluor 488酪胺包含明亮的iFluor 488,可使用标准FITC滤波片组轻松检测到。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的iFluor 488酪胺。

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适用仪器


荧光显微镜  
激发: FITC滤波片组
发射: FITC滤波片组
推荐孔板: 黑色透明
滤波片: FITC滤波片组

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 修复/透化细胞或组织
  2. 在封闭缓冲液中添加一抗
  3. 加入结合HRP的二抗
  4. 准备酪胺工作溶液,并在室温下添加到细胞或组织中(5-10分钟)

 

溶液配制

储备溶液配制

酪胺储备溶液(200X):
将100 µL DMSO加入小瓶中并充分混合。注意:未使用的酪胺储备溶液可在2-8℃下储存。

 

工作溶液配制

酪胺工作溶液(1X):
将100 µL酪胺储备溶液添加到20 mL含有0.003%H2O2的缓冲液中。 注意:可以使用pH = 7.4的Tris Buffer以获得最佳性能。注意:应立即使用Tyramide工作溶液,随用随配。注意: 20 mL溶液适合200次测试。

 

实验步骤

(该步骤适用于细胞或组织染色)

细胞固定和透化

1.在室温下用3.7%甲醛或低聚甲醛的PBS固定细胞或组织20分钟。

2.用PBS冲洗细胞或组织两次。

3.在室温下用0.1%Triton X-100溶液透化细胞1-5分钟。

4.用PBS冲洗细胞或组织两次。

 

组织固定,脱石蜡和补液

(根据标准IHC方案对组织进行脱蜡和脱水处理。根据实验方案使用特定溶液进行抗原修复。)

 

过氧化物酶标记

1.可选:通过在过氧化物酶淬灭溶液(例如3%过氧化氢)中孵育细胞或组织样品10分钟来淬灭内源性过氧化物酶活性,然后在室温下用PBS冲洗两次。

2.可选:如果使用结合HRP的链霉亲和素,建议通过生物素封闭缓冲液封闭内源性生物素。

3.在4°C下用封闭溶液(例如含1%BSA的PBS)封闭30分钟。

4.除去封闭溶液,并添加稀释好的一抗,在室温下放置60分钟或在4°C下放置过夜。

5.用PBS洗涤3次,每次5分钟。

6.将100 µL二级抗体-HRP工作溶液添加到每个样品中,并在室温下孵育60分钟。注意:孵育时间和浓度可以根据信号强度而变化。

7.用PBS洗涤3次,每次5分钟。

 

酪胺标记

1.准备并向每个样品中加入100 µL的Tyramide工作溶液,并在室温下孵育5-10分钟。 注意:如果观察到非特异性信号,则可以缩短与Tyramide的孵育时间。您应该在不同的孵育时间点使用阳性和阴性对照样品优化孵育时间。或者您可以在工作溶液中使用较低浓度的酪胺。

2.用PBS冲洗3次。

 

复染和荧光成像

1.根据需要对细胞或组织样本进行复染。AAT提供了一系列核复染色试剂,如表1所示。请按照试剂附带的说明进行操作。

2.加上盖玻片。

3.使用适当的滤波器观察Tyramide的荧光信号。

表1.建议用于核复染色的产品。 

货号 产品名称 Ex/Em(nm)
17548 核蓝 DCS1 350/461
17550 核绿 DCS1 503/526
17551 核橙 DCS1 528/576
17552 核红 DCS1 642/660

说明书
iFluor 488 酪胺.pdf