多甲藻黄素-叶绿素-蛋白复合物 PerCP

	货号	2559	存储条件	在2-8度冷藏保存, 避免光照
	规格	1 mg	价格	1272
	Ex (nm)	477	Em (nm)	678
	分子量	~35000	溶剂	Water
	产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

分子量：~35,000

Ex(nm):482

Ex(nm):677

荧光量子产率（QY）：1

产品介绍

PerCP 多甲藻黄素-叶绿素-蛋白复合物是由藻胆蛋白提取出的一种蛋白复合物。藻胆蛋白由许多亚基组成，每个亚基具有蛋白质骨架，线性四吡咯发色团与其共价结合。藻红蛋白（红色）和藻蓝蛋白（蓝色）是两种主要的藻胆蛋白。藻红蛋白（PE）的吸收最大值介于490和570nm之间，而藻蓝蛋白（PC）的吸收最大值介于610和665nm之间。通常，当作为硫酸铵沉淀物冷藏储存时，藻胆蛋白具有良好的长期稳定性。纯化的胆脂蛋白可以在酸性或碱性条件下解离成亚基，但在室温下在中性pH下相对稳定，浓度大于0.1mg / mL。解离的亚基通常具有比天然色素更低的着色和荧光。建议将所有藻胆蛋白及其结合物（优选在中性缓冲溶液中）冷藏，从不冷冻。

藻胆蛋白[包括B-藻红蛋白（B-PE），R-藻红蛋白（R-PE）和别藻蓝蛋白（APC）]是用于生物学检测的超灵敏荧光染料。 它们比传统的有机荧光团灵敏度高100倍。 即使在诸如流式细胞术和免疫测定的实际应用中，藻胆蛋白缀合的抗体的灵敏度通常远大于相应的基于有机分子的缀合物的灵敏度。 Phycobiliproteins是最亮的荧光标签，具有多个位点，可与许多生物和合成材料形成稳定的结合。

• 藻红蛋白（B-PE）具有三个吸收带，在545nm处具有最大吸收。 B-PE的亚基结构类似于R-PE，但亚基的发色团含量不同，导致吸收峰的相对强度不同：α和β亚基仅含有PEB，而γ亚基含有PEB和PUB。 B-PE存在于蓝细菌和红藻中。 B-PE的强烈粉红色和橙色荧光几乎与肉眼无法区分的R-PE。别藻蓝蛋白在主要的藻胆蛋白中是最不稳定的，在低浓度下易于解离，包括进行某些测定的浓度。 出于这个原因，许多研究人员更喜欢使用在α和β亚基之间化学交联的CL-APC，并且比APC更稳定。

• 藻红蛋白（R-PE）从红藻中分离。其主要吸收峰位于565nm，第二峰位于496nm和545nm。 次生峰的相对突出性在来自不同物种的R-PE之间显着不同。R-PE具有三种类型的亚基：α（~20,000道尔顿），β（~20,000道尔顿）和γ（~30,000道尔顿）。已发现完整R-PE的分子量为约240,000道尔顿，并且已确定（αβ）6γ的亚基结构。R-PE的α亚基仅含有藻红蛋白（PEB）发色团，而β和γ亚基含有PEB和藻蓝蛋白（PUB）。来自不同物种的R-PE的吸收光谱的可变性反映了亚基的PEB / PUB比率的差异。R-PE和密切相关的B-PE是最强荧光的藻胆蛋白，其量子效率可能超过90％，并且在任何中等浓度的溶液中，其橙色荧光很容易被肉眼看到。

C-藻蓝蛋白（C-PC）在许多蓝细菌中作为主要的藻胆蛋白发生，在一些红藻中作为次生的藻胆蛋白发生。该颜料在615和620nm之间具有单个可见吸收最大值，在~650nm处具有最大荧光发射。其分子量在70,000至110,000道尔顿之间。颜料由两个亚基α和β组成，它们以相同的数量出现，但构成分子的α和β对的确切数目可能因物种而异。α和β亚基都仅含有PCB发色团。 除了直接吸收光之外，这种强烈的蓝色颜料通过荧光能量转移接受来自藻红蛋白的量子，其中存在PE的生物体。C-PC的红色荧光转移到别藻蓝蛋白。AAT Bioquest研发的RPE、APC试剂及试剂盒被国内外科研人员灵活运用，达到不俗的科研成果。

图示

图1. 多甲藻黄素-叶绿素-蛋白复合物（PerCP）是一种类胡萝卜素色素，某些生物体在光合作用中使用。 许多光合作用的鞭毛藻都使用多甲藻黄素-叶绿素-蛋白复合物，该蛋白在470-550 nm的范围内吸收蓝绿光，超出了叶绿素分子可及的范围。 苦豆素-叶绿素-蛋白质复合物是一种特殊的分子复合物，由具有大中心腔的船形蛋白分子组成，其中包含苦豆素，叶绿素和脂质分子，通常以苦参素与叶绿素的比例为4：1。 PerCP通常用于免疫测定，例如荧光激活细胞分选（FACS）和流式细胞仪。 荧光团与蛋白质或抗体共价连接，用于研究应用。

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参考文献

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Authors: Zhao KH, Su P, Li J, Tu JM, Zhou M, Bubenzer C, Scheer H.
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Excitation energy transfer from phycobiliprotein to chlorophyll d in intact cells of Acaryochloris marina studied by time- and wavelength-resolved fluorescence spectroscopy
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Journal: Photochem Photobiol Sci (2005): 1016

Single-molecule spectroscopy selectively probes donor and acceptor chromophores in the phycobiliprotein allophycocyanin
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Evaluation of Tolypothrix germplasm for phycobiliprotein content
Authors: Prasanna R, Prasanna BM, Mohammadi SA, Singh PK.
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Isolation and characterisation of phycobiliprotein rich mutant of cyanobacterium Synechocystis sp
Authors: Prasanna R, Dhar DW, Dominic TK, Tiwari ON, Singh PK.
Journal: Acta Biol Hung (2003): 113

Co-ordinated expression of phycobiliprotein operons in the chromatically adapting cyanobacterium Calothrix PCC 7601: a role for RcaD and RcaG
Authors: Noubir S, Luque I, Ochoa de Alda JA, Perewoska I, Tandeau de Marsac N, Cobley JG, Houmard J.
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Phycobiliprotein genes of the marine photosynthetic prokaryote Prochlorococcus: evidence for rapid evolution of genetic heterogeneity
Authors: Ting CS, Rocap G, King J, Chisholm SW.
Journal: Microbiology (2001): 3171

Novel activity of a phycobiliprotein lyase: both the attachment of phycocyanobilin and the isomerization to phycoviolobilin are catalyzed by the proteins PecE and PecF encoded by the phycoerythrocyanin operon
Authors: Zhao KH, Deng MG, Zheng M, Zhou M, Parbel A, Storf M, Meyer M, Strohmann B, Scheer H.
Journal: FEBS Lett (2000): 9

Phycobiliprotein-Fab conjugates as probes for single particle fluorescence imaging
Authors: Triantafilou K, Triantafilou M, Wilson KM.
Journal: Cytometry (2000): 226

[Phycobiliprotein and fluorescence immunological assay]
Authors: Wu P.
Journal: Sheng Li Ke Xue Jin Zhan (2000): 82

Cell Navigator 活细胞微管蛋白染色试剂盒

	货号	23171	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	300 Slides	价格	5244
	Ex (nm)		Em (nm)
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Cell Navigator 活细胞微管蛋白染色试剂盒提供了一种可靠的方法，可以用Tubulite Red对活细胞中的微管蛋白进行荧光成像。该探针可透过活细胞，因此不需要固定细胞即可显像微管蛋白。它可以方便地用于跟踪活细胞中微管蛋白的聚合过程。它的红色光谱波长和良好的细胞渗透性使该探针易于与其他颜色（如GFP表达的细胞）或核染料（如DAPI）一起使用。中性的Tubulite Red容易穿过活细胞的质膜。亲脂性封闭基团一旦进入细胞，就会被酯酶裂解，形成带负电荷的产物，并充分保留在细胞内部。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Navigator 活细胞微管蛋白染色试剂盒。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1. 用5×10⁵到1×10⁶细胞/ mL 的密度制备含测试化合物的细胞
2. 准备并向细胞添加Tubulite Red工作溶液
3. 在37℃孵育30至60分钟
4. 使用Cy5滤波片组读取荧光强度

注意：开始实验之前，请在室温下解冻每种试剂盒成分。该说明书仅提供指南，实际情况应根据您的特定需求进行修改。

 

溶液配制

储备溶液配制

Tubulite Red储备液（500X）：将25 µL（Cat＃23170）或75 µL（Cat＃23171）DMSO（组分D）加入Tubulite Red（小瓶A）的小瓶中，并充分混合。注意：一次性使用等分试样，并将未使用的储备溶液在-20 ℃的冰箱避光保存，并避免重复冻融循环。

 

工作溶液配制

Tubulite Red工作溶液（1X）：
将2.5 µL Tubulite Red储备溶液和100 µL 25 mM ReadiUse 丙磺舒（组分D）加入1 mL的测定缓冲液（组分B）或自备缓冲液中，混合均匀。注意：我们建议每次都使用新鲜的Tubulite Red工作溶液。工作溶液可以稳定几个小时，不要长时间放置。

 

实验步骤

1. 根据需要准备细胞样品。
2. 除去细胞生长培养基，并用PBS（未提供）或自备缓冲液洗涤细胞。（可选）。
3. 加入100 µL Tubulite Red工作溶液，并在37^oC的培养箱中孵育30至60分钟。注意：适当的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和细胞浓度。最佳的孵育时间需要根据细胞类型等因素自行测试。
4. 除去工作溶液，并用PBS或自备缓冲液（2.5mg丙磺舒（从组分C稀释））洗涤细胞两次。
5. 添加含2.5 mM丙磺舒的测定缓冲液（从组分C稀释）到带测细胞中，并使用Cy5滤光片组在荧光显微镜下检测荧光强度。

 

图示

图1.活HeLa细胞中微管蛋白的成像。HeLa细胞与Tubulite red和DAPI（目录＃17507）一起在37℃，5％CO2培养箱中孵育60分钟，然后用荧光显微镜（Cy5滤光片组）拍摄荧光图像。