Amplite 荧光法法丙二醇(MDA)定量试剂盒
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货号 |
10072 |
存储条件 |
在零下15度以下保存, 避免光照 |
规格 |
200 Tests |
价格 |
5244 |
Ex (nm) |
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Em (nm) |
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分子量 |
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溶剂 |
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产品详细介绍 |
简要概述
Amplite 荧光法法丙二醇(MDA)定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的荧光染料。丙二醛(MDA)是脂质过氧化过程中的天然副产物之一。它被广泛用作确定氧化应激的可靠生物标志物,MDA的定量是评估病理生理过程中氧化应激的必不可少的方法。Amplite 荧光丙二醛(MDA)定量试剂盒提供了一种新的方法来测量MDA,而无需基于TBARS的MDA分析所需的加热步骤。MDA Green 可以与MDA反应,以方便的96孔或384孔板形式增强绿色荧光信号。与其他商用MDA分析试剂盒不同,该分析功能强大且对MDA具有特异性,几乎不受其他醛的干扰。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 荧光法法丙二醇(MDA)定量试剂盒。
适用仪器
荧光酶标仪 |
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激发: |
480nm |
发射: |
555nm |
cutoff: |
530nm |
推荐孔板: |
黑色透明 |
产品说明书
样品实验方案
简要概述
- 准备MDA标准品或测试样品(50 µL)
- 添加MDA Green 工作溶液(50 µL)
- 在室温下孵育6分钟
- 添加MDA终止液(50 µL)
- 检测Ex / Em = 480/555 nm的荧光强度
溶液制备
储备溶液
1. MDA标准溶液(100 mM):将100µL ddH2O加入MDA标准溶液(组分C)的样品瓶中,制成100 mM MDA标准溶液。
2. MDA Green 储备溶液(250 X):将20µL DMSO(组分E)添加到一小瓶MDA Green (组分A)中,制成MDA Green 储备溶液。注意:制备后,所有储备溶液应储存在-20oC下。避免重复冻融循环。
标准溶液
将10 µL 100 mM MDA标准溶液加到990 µL MDA分析缓冲液(组分B)中,以生成1000 µM MDA标准溶液(MDA7)。取1000 µM MDA标准溶液(MDA7)并进行1:3连续稀释,以得到带有MDA分析缓冲液(组分B)的系列稀释MDA标准溶液(MDA6- MDA1)。
工作溶液
MDA Green 工作溶液:将20µL 250 X MDA Green 储备溶液添加到5 mL MDA分析缓冲液(组分B)中,并充分混合以制成MDA Green 工作溶液。 注意:该MDA Green 工作溶液应在实验前准备好,并避免光照。
样品分析
表1. 96孔透明底微孔板中MDA标准品和测试样品的布局。 MDA = MDA标准品(MDA1-MDA7,6.25至400μM),BL =空白对照,TS =测试样品。
BL |
BL |
TS |
TS |
MDA1 |
MDA1 |
… |
… |
MDA2 |
MDA2 |
… |
… |
MDA3 |
MDA3 |
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MDA4 |
MDA4 |
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MDA5 |
MDA5 |
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MDA6 |
MDA6 |
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MDA7 |
MDA7 |
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表2.每个孔的试剂组成
孔 |
容积 |
试剂 |
MDA1-MDA7 |
50ul |
连续稀释(6.25至400μM) |
BL |
50ul |
稀释缓冲液(组分B) |
TS |
50ul |
测试样品 |
- 根据表1和2中提供的布局,准备MDA标准品(MDA),空白对照(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25 µL试剂,而不是50 µL。
- 将50 µL MDA Green 工作溶液添加到MDA标准品,空白对照和测试样品的每个孔中。对于384孔板,请在每个孔中添加25 µL MDA Green™工作溶液。
- 在避光条件下,于室温下孵育反应5-6分钟。
- 向反应的每个孔中加入50 µL MDA终止溶液(组分D)。对于384孔板,向每个孔中添加25 µL MDA终止液(组分D)。
- 使用荧光板读数器在Ex / Em = 480/555 nm(截止= 530 nm)处检测荧光强度。
参考文献
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Journal: Int Immunopharmacol (2018): 113-118
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说明书
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