Amplite 荧光法荧光胺蛋白质定量试剂盒 蓝色荧光 货号11100-AAT Bioquest荧光染料

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Amplite 荧光法荧光胺蛋白质定量试剂盒 蓝色荧光

Amplite 荧光法荧光胺蛋白质定量试剂盒 蓝色荧光

Amplite 荧光法荧光胺蛋白质定量试剂盒 蓝色荧光     货号11100 货号 11100 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 2604
Ex (nm) 380 Em (nm) 464
分子量 278.26 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 荧光法荧光胺蛋白质定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的荧光染料。荧光胺本质上是非荧光性的,但是一旦与脂肪胺类(包括:多肽、蛋白质)反应便会产生一种带蓝绿色荧光的衍生物。Amplite荧光法荧光胺蛋白质定量试剂盒提供了一种在水溶液中对蛋白质进行定量检测的简单方法。它的荧光信号可以容易读出Ex/Em = 380 /470 nm。该Amplite 荧光胺蛋白质检测法可以便捷地用于96或384微孔板分析中,并且无需任何分步操作就可以容易地实现自动化。本检测法可以在30分钟内完成。用Amplite 荧光胺蛋白质检测试剂盒,可以检出少至3 ug/mL的BSA。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 荧光法荧光胺蛋白质定量试剂盒。 

 

适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 380nm
发射: 470nm
cutoff: 420nm
推荐孔板: 黑色底板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备荧光胺工作溶液(25μL)
2.添加BSA标准品或测试样品(75μL)
3.在室温下孵育5-30分钟
4.在Ex / Em = 380 / 470nm处读取荧光强度

 

溶液制备 

1.1标准溶液

BSA标准
通过进行1:2连续稀释,将适量的BSA标准品1 mg / mL(组分C)稀释到PBS中,以获得BSA标准品(BS7-BS1)的连续稀释液。

 

2.工作溶液

将DMSO(组分B)的全部内容物加入荧光胺(组分A)的瓶中,并充分混合。 注意:2.5 mL的荧光胺工作溶液足以用于1个平板。

 

样品分析

表1.实心黑色96孔微孔板中BSA标准品和测试样品的布局。 BS = BSA标准品(BS1-BS7,1.563至100μg/ mL),BL =空白对照,TS =测试样品。

BL BL TS TS
BS1 BS1
BS2 BS2
BS3 BS3    
BS4 BS4    
BS5 BS5    
BS6 BS6    
BS7 BS7    

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
BS1-BS7 75ul 连续稀释(1.563至100微克/毫升)
BL 75ul PBS
TS 75ul 测试样本

1.根据表1和2中提供的布局制备BSA标准品(BS),空白对照品(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用30μL试剂代替75μL。

2.向BSA标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入25μL荧光胺工作溶液,使总测定体积为100μL/孔。 对于384孔板,在每个孔中加入10μL荧光胺工作溶液,总体积为40μL/孔。

3.在室温下孵育反应5至30分钟,避光。

4.用Ex / Em = 380 / 470nm的荧光板读数器监测荧光增加。

 

参考文献

Covalent vaccination with Trypanosoma cruzi Tc24 induces catalytic antibody production
Authors: Sarah M Gunter, Leroy Versteeg, Kathryn M Jones, Keegan P Brian, Ulrich Strych, Maria Elena Bottazzi, Peter J Hotez, Eric L Brown
Journal: Parasite immunology (2018): e12585

说明书
Amplite 荧光法荧光胺蛋白质定量试剂盒 蓝色荧光 .pdf

活性氧 Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 绿色荧光 货号11503-AAT Bioquest荧光染料

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活性氧 Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 绿色荧光

活性氧 Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 绿色荧光

活性氧 Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 绿色荧光    货号11503 货号 11503 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 3264
Ex (nm) 498 Em (nm) 517
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测过氧化物的试剂盒,过氧化氢 (H2O2) 是一种活性氧代谢副产物,是许多氧化应激相关状态的关键调节剂。它参与了许多与哮喘、动脉粥样硬化、糖尿病血管病变、骨质疏松症、许多神经退行性疾病和唐氏综合症有关的生物事件。也许过氧化氢生物学最有趣的方面是最近的报告,即抗体具有将分子氧转化为过氧化氢的能力,有助于免疫系统的正常识别和破坏过程。这种活性物质的测量将有助于确定氧化应激如何调节不同的细胞内途径。该 Cell Meter 过氧化氢检测试剂盒使用我们独特的 OxiVision Green 过氧化氢探针来量化活细胞中的过氧化氢。 OxiVision Green 具有细胞渗透性,当它与过氧化氢反应时会产生绿色荧光。该试剂盒是一种优化的“混合和读取”分析格式,与 HTS 液体处理仪器兼容。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒。  

点击查看光谱

活性氧(ROS)篇:包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

 

适用仪器


荧光显微镜  
激发: FITC滤波片组
发射: FITC滤波片组
推荐孔板: 黑色透明
荧光酶标仪  
激发: 490nm
发射: 525nm
cutoff: 515nm
推荐孔板: 黑色透明

产品说明书

96孔板的测定方案

概述

用于溶液测定

1.准备H2O2反应混合物(50μL)

2.加入H2O2标准品或测试样品(50μL)

3.在室温下孵育10-60分钟

4.在Ex / Em = 490/525 nm (cutoff=515nm)处检测荧光强度

注意:在开始实验之前,在室温下解冻所有试剂盒组分。

 

用于活细胞检测

1. 在生长培养基中制备细胞
2. 使用 OxiVision Green 过氧化氢探针工作溶液对细胞进行染色并孵育
3. 用测试化合物处理细胞
4. 在 Ex/Em = 490/525 nm (Cutoff = 515nm) 处用底部读取模式检测荧光强度

 

溶液配制

1. OxiVision Green 过氧化氢探针储备液 (250X)
将 50 μL DMSO(组分 D)加入 OxiVision Green 过氧化氢探针(组分 A)的小瓶中,制成 250X OxiVision Green 过氧化氢探针储备液,注意避光。

2. H2O2 标准溶液(20 mM)
将 22.7 μL 的 3% H2O2(0.88 M,组分 B)加入 977 μL 的 Assay Buffer(组分 C)中,制成 20 mM H2O2 标准溶液。

注意 稀释的 H2O2 标准溶液不稳定。 未使用的部分应丢弃。

3.H2O2 标准
将 50 μL 20 mM H2O2 标准溶液加入 950 μL Assay Buffer(组分 C)中,得到 1000 μM H2O2 标准溶液。 取 1000 μM H2O2 标准溶液并进行 1:3 的系列稀释,以得到含有测定缓冲液(组分 C)的系列稀释的 H2O2 标准品(HS1 – HS7)。

4.工作溶液配制

将 20 μL 250X OxiVision Green 过氧化氢探针储备液加入 5 mL 检测缓冲液(组分 C)中,制成 OxiVision Green 过氧化氢探针工作溶液。

 

操作步骤

在上清液反应中检测H2O2
表 1. 纯黑色 96 孔微孔板中 H2O2 标准品和测试样品的布局。 HS= H 2 O 2 标准品(HS1 – HS7,300 至 0.3 μM); BL=空白控制; TS=测试样品

BL BL TS TS
HS1 HS1
HS2 HS2
HS3 HS3    
HS4 HS4    
HS5 HS5    
HS6 HS6    
HS7 HS7    

表2. 每孔试剂组成

容积 试剂
HS1-HS7 50ul 连续稀释(300至0.3μM)
BL 50ul 分析缓冲液(组分C)
TS 50ul 测试样本

1.根据表 1 和表 2 中提供的布局准备 H2O2 标准 (HS)、空白对照 (BL) 和测试样品 (TS)。对于 384 孔板,每孔使用 25 μL 试剂,而不是 50 μL。

2. 将 50 μL OxiVision Green 过氧化氢探针工作液加入 H2O2 标准品、空白对照和测试样品的每个孔中,使H2O2 测定总体积为 100 μL/孔。 对于384孔板,将 25 μL 的 OxiVision Green 过氧化氢探针工作溶液添加到每个孔中,总体积为 50 μL/孔。

3. 在室温下将反应孵育 15 到 30 分钟,避光。

4. 用荧光酶标仪在Ex= 490 ± 10,Em= 520 ± 10 nm(最佳 Ex/Em = 490/525 nm,截止 = 515 nm)检测荧光强度。

 

在活细胞中进行H2O2检测

1.根据需要培养细胞

2.用 PBS 缓冲液清洗细胞,用 100 μL/孔的 OxiVision Green 过氧化氢探针工作溶液孵育细胞 5 到 60 分钟。 对于 384 孔板,添加 25 μL/孔的 OxiVision Green 过氧化氢探针工作溶液。

3. 在 Ex/Em = 490/525 nm (Cutoff = 515 nm) 下使用荧光酶标仪(底部读取模式)检测荧光增加或使用 FITC 通道通过荧光显微镜成像荧光变化。

 

参考文献

Bio-inspired redox-cycling antimicrobial film for sustained generation of reactive oxygen species
Authors: Huan Liu, Xue Qu, Eunkyoung Kim, Miao Lei, Kai Dai, Xiaoli Tan, Miao Xu, Jinyang Li, Yangping Liu, Xiaowen Shi
Journal: Biomaterials (2018)

PPARα-mediated peroxisome induction compensates PPARγ-deficiency in bronchiolar club cells
Authors: Srikanth Karnati, Gani Oruqaj, Harshavardhan Janga, Srinu Tumpara, Claudia Colasante, Paul P Van Veldhoven, Nancy Braverman, Adrian Pilatz, Thomas J Mariani, Eveline Baumgart-Vogt
Journal: PloS one (2018): e0203466

Semaphorin 4D inhibits neutrophil activation and is involved in the pathogenesis of neutrophil-mediated autoimmune vasculitis
Authors: Masayuki Nishide, Satoshi Nojima, Daisuke Ito, Hyota Takamatsu, Shohei Koyama, Sujin Kang, Tetsuya Kimura, Keiko Morimoto, Takashi Hosokawa, Yoshitomo Hayama
Journal: Annals of the Rheumatic Diseases (2017): annrheumdis–2016

Aggravation of brain infarction through an increase in acrolein production and a decrease in glutathione with aging
Authors: Takeshi Uemura, Kenta Watanabe, Misaki Ishibashi, Ryotaro Saiki, Kyoshiro Kuni, Kazuhiro Nishimura, Toshihiko Toida, Keiko Kashiwagi, Kazuei Igarashi
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2016): 630–635

Hydrogen peroxide detection with high specificity in living cells and inflamed tissues
Authors: Lei Rong, Chi Zhang, Qi Lei, Ming-Ming Hu, Jun Feng, Hong-Bing Shu, Yi Liu, Xian-Zheng Zhang
Journal: Regenerative Biomaterials (2016): rbw022

Modification of lignin in sugarcane bagasse by a monocopper hydrogen peroxide-generating oxidase from Thermobifida fusca
Authors: Cheng-Yu Chen, Cheng-Cheng Lee, Hung-Shuan Chen, Chao-Hsun Yang, Shu-Ping Wang, Jyh-Horng Wu, Menghsiao Meng
Journal: Process Biochemistry (2016): 1486–1495

Dopamine-mediated oxidation of methionine 127 in α-synuclein causes cytotoxicity and oligomerization of α-synuclein
Authors: Kazuhiro Nakaso, Naoko Tajima, Satoru Ito, Mari Teraoka, Atsushi Yamashita, Yosuke Horikoshi, Daisuke Kikuchi, Shinsuke Mochida, Kenji Nakashima, Tatsuya Matsura
Journal: PLoS One (2013): e55068

Hydrogen peroxide stimulates the epithelial sodium channel through a phosphatidylinositide 3-kinase-dependent pathway
Authors: He-Ping Ma
Journal: Journal of Biological Chemistry (2011): 32444–32453

 

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说明书
活性氧 Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 绿色荧光.pdf

Amplite 荧光法葡萄糖-6-磷酸检测试剂盒 货号13804-AAT Bioquest荧光染料

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Amplite 荧光法葡萄糖-6-磷酸检测试剂盒

Amplite 荧光法葡萄糖-6-磷酸检测试剂盒

Amplite 荧光法葡萄糖-6-磷酸检测试剂盒    货号13804 货号 13804 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 3924
Ex (nm) 571 Em (nm) 585
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 荧光法葡萄糖-6-磷酸检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测鞘磷脂的试剂盒,葡萄糖-6 – 磷酸( G6P )是用于葡萄糖到细胞转运的关键中间体。 G6P也可在肝脏和肌肉中转化为糖原或淀粉进行存储。 G6P是由葡萄糖-6 – 磷酸脱氢酶( G6PD)用来生成在NADPH形式的还原当量。其中G6PD缺乏引起的溶血性贫血。 AAT Bioquest的Amplite 荧光葡萄糖-6 – 磷酸检测试剂盒提供了用于生物样品如血清,血浆,以及细胞培养样品中检测G6P一种简单,灵敏,快速的基于荧光的方法。在偶联酶测定中, 比例是专门由一个荧光NADPH传感器监测。荧光信号可以通过荧光酶标仪在EX/ EM = 530-570 nm/590-600纳米读取(建议EX / EM = 540 nm/590 nm建议)。Amplite G6P测定试剂盒,我们能够检测少至0.3 μM G6P在100微升反应体积。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 荧光法葡萄糖-6-磷酸检测试剂盒。 

 

适用仪器


光吸收酶标仪  
吸收: 575/605nm
推荐孔板: 透明底板
荧光酶标仪  
激发: 540nm
发射: 590nm
cutoff: 570nm
推荐孔板: 黑色孔板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备G6P工作溶液(50 µL)
2.添加G6P标准品或测试样品(50 µL)
3.在室温下孵育30分钟-2小时
4.监测Ex / Em = 540/590 nm(截止= 570 nm)的荧光增加

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 NADP储备溶液(100X):
在NADP小瓶(组分C)中加入100 µL H2O,制成100X NADP储备溶液。

1.2 G6P标准溶液(100 mM):
将100 µL H2O或1x PBS缓冲液加到G6P标准品(组分D)的小瓶中,制成100 mM G6P标准品溶液。

 

2.标准溶液

G6P标准
将10 µL 100 mM G6P标准溶液加到990 µL 1x PBS缓冲液中,生成1 mM G6P标准溶液。 然后,将100 µL 1 mM G6P标准溶液添加到900 µL 1 x PBS缓冲液中,制成100 µM G6P标准溶液(G6P7)。 取100 µM G6P标准溶液(G6P7)并进行1:3连续稀释,以使用1x PBS缓冲液连续稀释G6P标准溶液(G6P6- G6P1)。注意:稀释的G6P标准溶液不稳定,应在4小时内使用。

 

3.工作溶液

3.1将5 mL测定缓冲液(组分B)加入一瓶酶探针(组分A)中,并充分混合。

3.2将50 µL 100X NADP储备溶液添加到组分A + B的瓶子中,并充分混合以制成G6P工作溶液。 注意:此G6P工作溶液足以用于一个96孔板。

 

样品操作及实验分析

表1.黑色96孔微孔板中G6P标准品和测试样品的布局。 G6P = G6P标准品(G6P1-G6P7,0.14至100 µM),BL =空白对照,TS =测试样品。

BL BL TS TS
G6P1 G6P1
G6P2 G6P2
G6P3 G6P3    
G6P4 G6P4    
G6P5 G6P5    
G6P6 G6P6    
G6P7 G6P7    

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
G6P1-G6P7 50ul 连续稀释(0.14至100 µM)
BL 50ul 稀释缓冲液
TS 50ul 测试样品

1.根据表1和2中提供的布局,准备G6P标准品(G6P),空白对照(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25 µL试剂代替50 µL。

2.在G6P标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入50 µL G6P工作溶液,以使G6P测定总体积为100 µL /孔。 对于384孔板,将25 µL G6P工作溶液添加到每个孔中,总体积为50 µL /孔。

3.避光保存,室温下孵育反应30分钟至2小时。

4.使用荧光板读数器在激发= 530-570 nm,发射= 590-600 nm(最佳Ex / Em = 540/590 nm,截止= 570nm)下监测荧光的增加。 注意:该板的内容物也可以转移到白色透明底板上,并通过吸光度酶标仪以A575nm / A605nm的比率进行读取。 与荧光读数相比,吸收检测的灵敏度较低。

 

参考文献

The microsomal enzyme 17beta-hydroxysteroid dehydrogenase 3 faces the cytoplasm and uses NADPH generated by glucose-6-phosphate dehydrogenase
Authors: Legeza B, Balazs Z, Nashev LG, Odermatt A.
Journal: Endocrinology (2013): 205

A novel cytofluorometric assay for the detection and quantification of glucose-6-phosphate dehydrogenase deficiency
Authors: Shah SS, Diakite SA, Traore K, Diakite M, Kwiatkowski DP, Rockett KA, Wellems TE, Fairhurst RM.
Journal: Sci Rep (2012): 299

Effects of glucose-6-phosphate dehydrogenase deficiency on the metabolic and cardiac responses to obesogenic or high-fructose diets
Authors: Hecker PA, Mapanga RF, Kimar CP, Ribeiro RF, Jr., Brown BH, O’Connell KA, Cox JW, Shekar KC, Asemu G, Essop MF, Stanley WC.
Journal: Am J Physiol Endocrinol Metab (2012): E959

Effects of laparoscopic Roux-en-Y gastric bypass on glucose-6 phosphate dehydrogenase activity in obese type 2 diabetics
Authors: Schneider AM, Rawat D, Weinstein LS, Gupte SA, Richards WO.
Journal: Surg Endosc (2012): 823

High prevalence of hemoglobin disorders and glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PD) deficiency in the Republic of Guinea (West Africa)
Authors: Millimono TS, Loua KM, Rath SL, Relvas L, Bento C, Diakite M, Jarvis M, Daries N, Ribeiro LM, Manco L, Kaeda JS.
Journal: Hemoglobin (2012): 25

Molecular characterization of glucose-6-phosphate dehydrogenase deficient variants in Baghdad city – Iraq
Authors: Al-Musawi BM, Al-Allawi N, Abdul-Majeed BA, Eissa AA, Jubrael JM, Hamamy H.
Journal: BMC Blood Disord (2012): 4

Alternative targeting of Arabidopsis plastidic glucose-6-phosphate dehydrogenase G6PD1 involves cysteine-dependent interaction with G6PD4 in the cytosol
Authors: Meyer T, Holscher C, Schwoppe C, von Schaewen A.
Journal: Plant J (2011): 745

Frequency of glucose-6-phosphate dehydrogenase deficiency in malaria patients from six African countries enrolled in two randomized anti-malarial clinical trials
Authors: Carter N, Pamba A, Duparc S, Waitumbi JN.
Journal: Malar J (2011): 241

Glucose-6-phosphate dehydrogenase status and severity of malarial anaemia in Nigerian children
Authors: Orimadegun AE, Sodeinde O.
Journal: J Infect Dev Ctries (2011): 792

Implementation and analysis of a pilot in-hospital newborn screening program for glucose-6-phosphate dehydrogenase deficiency in the United States
Authors: Nock ML, Johnson EM, Krugman RR, Di Fiore JM, Fitzgerald S, Sandhaus LM, Walsh MC.
Journal: J Perinatol (2011): 112

 

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产品名称 货号
Amplite 比色法葡萄糖-6-磷酸检测试剂盒 Cat#13805

说明书
Amplite 荧光法葡萄糖-6-磷酸检测试剂盒.pdf

Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒 绿色荧光 货号11953-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒 绿色荧光

Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒 绿色荧光

货号 11953 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 500 Tests 价格 2604
Ex (nm) 498 Em (nm) 517
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于磷酸酶的试剂盒,碱性磷酸酶是广泛分布于人体各脏器器官中,其中以肝脏为最多其次为肾脏,骨骼、肠、和胎盘等组织,。这种酶能催化核酸分子脱掉5’磷酸基团,从而使DNA 或RNA片段的5’-P末端转换成5’-OH末端,并生成一分子的有机基团和一分子的无机磷酸。碱性磷酸酶不是单一的酶,而是一组同功酶。碱性磷酸酶在ELISA、免疫组化,Northern, Southern 和 Western blot分析中有很高的灵敏度。它广泛地用于多种生物学分析(特别是免疫分析)和基于ELISA的疾病诊断。Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒 *绿色荧光* 用FDP,一种灵敏的碱性磷酸酶绿色荧光底物来定量检测溶液中、细胞抽提液,固相物质表面(例如PVDF膜)的碱性磷酸酶活性。本试剂盒提供所有必需组分,包括我们最佳的产品组合和分析方法,并且与可用于HTS(高通量筛选)。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒。 

点击查看光谱

 

适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 490nm
发射: 525nm
cutoff: 515nm
推荐孔板: 黑色孔板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备碱性磷酸酶工作溶液(50μL)
2.添加碱性磷酸酶标准品或测试样品(50μL)
3.在室温或37°C孵育10 – 30分钟
4.监测Ex / Em = 490/525 nm处的荧光强度(Cutfoff = 515 nm)

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1 FDP(250X):
将100μLDMSO(组分D)加入到FDP小瓶(组分A)中以制备250X FDF储备溶液。 应立即使用FDP储备溶液。

1.2 碱性磷酸酶标准溶液(100 U / mL):
将100μL含0.1%BSA(H2O-0.1%BSA)的蒸馏水加入碱性磷酸酶标准品(组分C,10单位)中,得到100单位/ mL碱性磷酸酶标准溶液。 注意:碱性磷酸酶标准溶液不稳定。

 

2.标准溶液

碱性磷酸酶标准
将10μL100单位/ mL碱性磷酸酶标准溶液加入990μLH2O-0.1%BSA中,生成1,000 mU / mL碱性磷酸酶标准溶液。 取1,000 mU / mL碱性磷酸酶标准溶液,进行1:10(AS7),然后在H2O-0.1%BSA中进行1:3连续稀释,得到碱性磷酸酶标准品(AS6-AS1)的连续稀释液。

 

3.工作溶液

将20μL250XFDP储备溶液加入5 mL分析缓冲液(组分B)中并充分混合以制备碱性磷酸酶工作溶液。 注意:避光。

点击查看细胞制备指南

 

样品操作及分析

表1.碱性磷酸酶标准品和实心黑色96孔微孔板中的测试样品的布局。 AS =碱性磷酸酶标准品(AS1-AS7,0.1至100 mU / mL); BL =空白对照; TS =测试样品。

BL BL TS TS
AS1 AS1
AS2 AS2
AS3 AS3    
AS4 AS4    
AS5 AS5    
AS6 AS6    
AS7 AS7    

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
AS1-AS7 50ul 连续稀释(0.1至100 mU / mL)
BL 50ul H2O – 0.1% BSA
TS 50ul 测试样本

1.在上清液中进行碱性磷酸酶测定:

1.1根据表1和2中提供的布局制备碱性磷酸酶标准品(AS),空白对照(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25μL试剂代替50μL。注意:根据需要准备细胞或组织样本。应丢弃未使用的碱性磷酸酶标准品系列稀释液。

1.2向碱性磷酸酶标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入50μL碱性磷酸酶工作溶液,使总碱性磷酸酶测定体积为100μL/孔。对于384孔板,在每个孔中加入25μL碱性磷酸酶工作溶液,总体积为50μL/孔。

1.3将反应在所需温度下孵育10至30分钟,避光。可选:在30分钟孵育结束时,加入50μL/孔(对于96孔板)或25μL/孔(对于384孔板)的终止溶液(组分E)。

1.4用荧光板读数器在激发= 490±10,发射= 525±10nm(截止= 515nm)监测荧光增加。

 

2.在细胞中运行碱性磷酸酶测定:

2.1根据需要处理细胞。

2.2从细胞板中完全除去生长培养基。 注意:由于生长培养基与FDP的干扰,重要的是从细胞板中完全除去生长培养基。

2.3用5mL蒸馏水将1mL稀释的5mL碱性磷酸酶工作溶液稀释。

2.4向细胞孔中加入100μL(对于96孔板)或50μL(对于384孔板)1:1稀释的碱性磷酸酶工作溶液。

2.5将反应在所需温度下孵育30至60分钟,避光。 可选:在30分钟孵育结束时加入50μL/孔(对于96孔板)或25μL/孔(对于384孔板)的终止溶液(组分E)。

2.6用荧光板读数器在激发= 490±10,发射= 525±10nm(截止= 515nm)监测荧光增加。

 

参考文献

Development and validation of bioengineered intestinal tubules for translational research aimed at safety and efficacy testing of drugs and nutrients
Authors: Paulus GM Jochems, Jeroen van Bergenhenegouwen, Anne Metje van Genderen, Sophie T Eis, Livia JF Wilod Versprille, Harry J Wichers, Prescilla V Jeurink, Johan Garssen, Rosalinde Masereeuw
Journal: Toxicology in Vitro (2019)

Rapid detection of Escherichia coli in beverages using genetically engineered bacteriophage T7
Authors: Nicharee Wisuthiphaet, Xu Yang, Glenn M Young, Nitin Nitin
Journal: AMB Express (2019): 55

The impact of various scaffold components on vascularized bone constructs
Authors: Ahmad Eweida, Matthias Schulte, Oliver Frisch, Ulrich Kneser, Leila Harhaus
Journal: Journal of Cranio-Maxillofacial Surgery (2017)

A Mineralized High Strength and Tough Hydrogel for Skull Bone Regeneration
Authors: Bing Xu, Pengbin Zheng, Fei Gao, Wei Wang, Hongtao Zhang, Xuran Zhang, Xuequan Feng, Wenguang Liu
Journal: Advanced Functional Materials (2016)

DRG axon elongation and growth cone collapse rate induced by Sema3A are differently dependent on NGF concentration
Authors: Andrius Kaselis, Rimantas Treinys, Ruta Vosyliute, Saulius Satkauskas
Journal: Cellular and molecular neurobiology (2014): 289–296

Acute oral toxicity and kinetic behaviors of inorganic layered nanoparticles
Authors: Jin Yu, Hea-Eun Chung, Soo-Jin Choi
Journal: Journal of Nanomaterials (2013): 12

Effect of Some Antihypertensive Drugs on Alkaline Phosphatase and DNA of Mice
Authors: OY El-Khawaga, A El-Waseef, YO Ellazec, MM El-Naggar, Abd M Alla
Journal: International Journal of Genomics and Proteomics (2013): 60

An engineering understanding of the small intestine
Authors: Monica Rosalia Jaime Fonseca
Journal: (2012)

Cytotoxicity and alkaline phosphatase activity evaluation of endosequence root repair material
Authors: Mahmoud Reza Modareszadeh, Peter M Di Fiore, David A Tipton, Narges Salamat
Journal: Journal of endodontics (2012): 1101–1105

Alginate-loaded liposomes can protect encapsulated alkaline phosphatase functionality when exposed to gastric pH
Authors: Alan M Smith, Monica R Jaime-Fonseca, Liam M Grover, Serafim Bakalis
Journal: Journal of agricultural and food chemistry (2010): 4719–4724

 

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说明书
Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒 绿色荧光 .pdf

Amplite 荧光法法丙二醇(MDA)定量试剂盒 货号10072-AAT Bioquest荧光染料

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Amplite 荧光法法丙二醇(MDA)定量试剂盒

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规格 200 Tests 价格 5244
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 荧光法法丙二醇(MDA)定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的荧光染料。丙二醛(MDA)是脂质过氧化过程中的天然副产物之一。它被广泛用作确定氧化应激的可靠生物标志物,MDA的定量是评估病理生理过程中氧化应激的必不可少的方法。Amplite 荧光丙二醛(MDA)定量试剂盒提供了一种新的方法来测量MDA,而无需基于TBARS的MDA分析所需的加热步骤。MDA Green 可以与MDA反应,以方便的96孔或384孔板形式增强绿色荧光信号。与其他商用MDA分析试剂盒不同,该分析功能强大且对MDA具有特异性,几乎不受其他醛的干扰。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 荧光法法丙二醇(MDA)定量试剂盒。 

 

适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 480nm
发射: 555nm
cutoff: 530nm
推荐孔板: 黑色透明

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 准备MDA标准品​​或测试样品(50 µL)
  2. 添加MDA Green 工作溶液(50 µL)
  3. 在室温下孵育6分钟
  4. 添加MDA终止液(50 µL)
  5. 检测Ex / Em = 480/555 nm的荧光强度

 

溶液制备

储备溶液

1. MDA标准溶液(100 mM):将100µL ddH2O加入MDA标准溶液(组分C)的样品瓶中,制成100 mM MDA标准溶液。

2. MDA Green 储备溶液(250 X):将20µL DMSO(组分E)添加到一小瓶MDA Green (组分A)中,制成MDA Green 储备溶液。注意:制备后,所有储备溶液应储存在-20oC下。避免重复冻融循环。

 

标准溶液

将10 µL 100 mM MDA标准溶液加到990 µL MDA分析缓冲液(组分B)中,以生成1000 µM MDA标准溶液(MDA7)。取1000 µM MDA标准溶液(MDA7)并进行1:3连续稀释,以得到带有MDA分析缓冲液(组分B)的系列稀释MDA标准溶液(MDA6- MDA1)。

 

工作溶液

MDA Green 工作溶液:将20µL 250 X MDA Green 储备溶液添加到5 mL MDA分析缓冲液(组分B)中,并充分混合以制成MDA Green 工作溶液。 注意:该MDA Green 工作溶液应在实验前准备好,并避免光照。

 

样品分析

表1. 96孔透明底微孔板中MDA标准品和测试样品的布局。 MDA = MDA标准品(MDA1-MDA7,6.25至400μM),BL =空白对照,TS =测试样品。

BL BL TS TS
MDA1 MDA1
MDA2 MDA2
MDA3 MDA3    
MDA4 MDA4    
MDA5 MDA5    
MDA6 MDA6    
MDA7 MDA7    

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
MDA1-MDA7 50ul 连续稀释(6.25至400μM)
BL 50ul 稀释缓冲液(组分B)
TS 50ul 测试样品
  1. 根据表1和2中提供的布局,准备MDA标准品​​(MDA),空白对照(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25 µL试剂,而不是50 µL。
  2. 将50 µL MDA Green 工作溶液添加到MDA标准品​​,空白对照和测试样品的每个孔中。对于384孔板,请在每个孔中添加25 µL MDA Green™工作溶液。
  3. 在避光条件下,于室温下孵育反应5-6分钟。
  4. 向反应的每个孔中加入50 µL MDA终止溶液(组分D)。对于384孔板,向每个孔中添加25 µL MDA终止液(组分D)。
  5. 使用荧光板读数器在Ex / Em = 480/555 nm(截止= 530 nm)处检测荧光强度。

 

参考文献

Glutathione peroxidase and malondialdehyde in children with chronic hepatitis C
Authors: Khedr, M. A., El-Araby, H. A., Konsowa, H. A., Sokar, S. S., Mahmoud, M. F., Adawy, N. M., Zakaria, H. M.
Journal: Clin Exp Hepatol (2019): 81-87

Malondialdehyde Assay in the Evaluation of Aspirin Antiplatelet Effects
Authors: Polzin, A., Dannenberg, L., Schneider, T., Knoop, B., Naguib, D., Helten, C., Pohl, M., Kelm, M., Zeus, T., Hohlfeld, T.
Journal: Pharmacology (2019): 23-29

Status of malondialdehyde, catalase and superoxide dismutase levels/activities in schoolchildren with iron deficiency and iron-deficiency anemia of Kashere and its environs in Gombe State, Nigeria
Authors: Sharif Usman, S., Dahiru, M., Abdullahi, B., Abdullahi, S. B., Maigari, U. M., Ibrahim Uba, A.
Journal: Heliyon (2019): e02214

The Evaluation of Glutathione Reductase and Malondialdehyde Levels in Patients With Lumbar Disc Degeneration Disease
Authors: Bakirezer, S. D., Yaltirik, C. K., Kaya, A. H., Yilmaz, S. G., Ozdogan, S., Billur, D., Isbir, T.
Journal: In Vivo (2019): 811-814

Association between dietary and metabolic factors and IgM antibodies to phosphorylcholine and malondialdehyde in patients with systemic lupus erythematosus and population-based matched controls
Authors: Lourdudoss, C., Ajeganova, S., Frostegard, J.
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Autoimmune reactivity to malondialdehyde adducts in systemic lupus erythematosus is associated with disease activity and nephritis
Authors: Hardt, U., Larsson, A., Gunnarsson, I., Clancy, R. M., Petri, M., Buyon, J. P., Silverman, G. J., Svenungsson, E., Gronwall, C.
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Elevated serum levels of malondialdehyde and cortisol are associated with major depressive disorder: A case-control study
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Journal: SAGE Open Med (2018): 2050312118773953

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Journal: J Pak Med Assoc (2018): 1373-1377

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Authors: Mikuls, T. R., Duryee, M. J., Engl and B. R., Anderson, D. R., Hearth-Holmes, M., Su, K., Michaud, K., Payne, J. B., Sayles, H., Hunter, C., McGowan, J. D., Klassen, L. W., Thiele, G. M.
Journal: Int Immunopharmacol (2018): 113-118

 

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