活性氧 Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒 适合于酶标仪

	货号	22971	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 Tests	价格	3924
	Ex (nm)	540	Em (nm)	590
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

线粒体是细胞超氧化物的主要生产者。低中等水平的超氧化物的产生对于许多重要细胞过程的适当调节至关重要，这些过程包括基因表达，信号转导和肌肉对耐力运动训练的适应性。不受控制的线粒体超氧化物的产生会触发细胞氧化损伤，从而导致多种疾病的发病机理，包括癌症，心血管疾病，神经退行性疾病和衰老。Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒使用我们独特的超氧化物指示剂来定量活细胞中的超氧化物水平。MitoROS 580具有活细胞渗透性，可以快速，选择性地靶向线粒体中的超氧化物。与超氧化物反应时会生成红色荧光。Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒提供了一种灵敏的一步荧光测定法，可在培养一小时后检测活细胞中的线粒体超氧化物。该试剂盒可用于荧光酶标仪和荧光显微镜应用。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒。

活性氧（ROS）篇：包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1. 在生长培养基中准备细胞
2. 用测试化合物处理细胞以诱导超氧化物
3. 添加MitoROS 580工作溶液
4. 在37°C下将细胞染色30-60分钟
5. 检测Ex / Em = 540/590 nm（截止= 570 nm）处的荧光增加（底部读取模式）或使用配备TRITC滤光片的荧光显微镜

 

溶液配制

储备溶液配制

1. MitoROS 580储备溶液（500X）：将50 µL DMSO（组分C）添加到MitoROS 580（组分A）的小瓶中，并充分混合以制成500X MitoROS 580储备液，避光。 注意：25 µL 500X MitoROS 580储备溶液足以用于1个板。 为了存放，请将管子紧紧密封。

 

工作溶液配制

将25μL的500X MitoROS 580储备溶液添加到10 mL的测定缓冲液（组分B）中，并充分混合以制成MitoROS 580工作溶液。 注意：此MitoROS 580工作溶液在室温下至少可稳定2小时。

 

实验步骤

1. 在所需的缓冲液（例如PBS或HHBS）中，用10 µL 10X测试化合物（96孔板）或5 µL 5X测试化合物（384孔板）处理细胞。 对于对照孔（未处理的细胞），添加相应量的化合物缓冲液。

2. 为了诱导超氧化物，将细胞板在37°C下孵育所需的时间，避光。 注意：我们在37°C下用50 µM抗霉素A（AMA）处理HeLa细胞30分钟，以诱导超氧化物。 有关详细信息，请参见图1。

3. 将100 µL /孔（96孔板）或25 µL /孔（384孔板）的MitoROS 580工作溶液添加到细胞板中。

4. 将细胞在37°C下孵育30至60分钟。

5. 使用荧光酶标仪（Ext / Em = 540/590 nm（Cutoff = 570 m））检测荧光强度，或者使用带有TRITC滤光片的荧光显微镜观察细胞。

 

图示

 

图1.使用Cell Meter 荧光细胞内超氧化物检测试剂盒（Cat＃22971）在HeLa细胞中测量超氧化物的荧光图像。 将100,000个细胞/孔/ 100 µL的HeLa细胞在96孔黑色板中接种过夜。 AMA处理：将细胞在37°C下用50 µM抗霉素A（AMA）处理30分钟，然后与MitoROS 580孵育1小时。 未经处理的对照：HeLa细胞与MitoROS 580在37°C下孵育1小时，未经AMA处理。 使用带有TRITC滤光片的荧光显微镜检测荧光信号。

图2.使用Cell Meter 荧光细胞内超氧化物检测试剂盒（Cat＃22971）检测HeLa细胞中的细胞内超氧化物。 将100,000个细胞/孔/ 100 µL的HeLa细胞在96孔黑色板中接种过夜。 将细胞与50 µM绿脓素（Pyo）孵育； 50 µM抗霉素A（AMA）或未经处理（对照）在37ºC下放置30分钟。 然后将细胞与MitoROS 580在37℃孵育1小时。 使用CLARIOstar酶标仪（BMG Labtech）以底部读取模式在Ex / Em = 540/590 nm（截止= 570 nm）下检测荧光信号。

 

 

参考文献

Concentration-dependent effect of sodium hypochlorite on stem cells of apical papilla survival and differentiation
Authors: Martin DE, De Almeida JF, Henry MA, Khaing ZZ, Schmidt CE, Teixeira FB, Diogenes A.
Journal: J Endod (2014): 51

Effect of hypochlorite oxidation on cholinesterase-inhibition assay of acetonitrile extracts from fruits and vegetables for monitoring traces of organophosphate pesticides
Authors: Kitamura K, Maruyama K, Hamano S, Kishi T, Kawakami T, Takahashi Y, Onodera S.
Journal: J Toxicol Sci (2014): 71

A simple yet effective chromogenic reagent for the rapid estimation of bromate and hypochlorite in drinking water
Authors: Zhang J, Yang X.
Journal: Analyst (2013): 434

Analysis of the germination kinetics of individual Bacillus subtilis spores treated with hydrogen peroxide or sodium hypochlorite
Authors: Setlow B, Yu J, Li YQ, Setlow P.
Journal: Lett Appl Microbiol (2013): 259

Comparative antimicrobial activities of aerosolized sodium hypochlorite, chlorine dioxide, and electrochemically activated solutions evaluated using a novel standardized assay
Authors: Thorn RM, Robinson GM, Reynolds DM.
Journal: Antimicrob Agents Chemother (2013): 2216

Effect of hypochlorite-based disinfectants on inactivation of murine norovirus and attempt to eliminate or prevent infection in mice by addition to drinking water
Authors: Takimoto K, Taharaguchi M, Sakai K, Takagi H, Tohya Y, Yamada YK.
Journal: Exp Anim (2013): 237

Green synthesis of carbon dots with down- and up-conversion fluorescent properties for sensitive detection of hypochlorite with a dual-readout assay
Authors: Yin B, Deng J, Peng X, Long Q, Zhao J, Lu Q, Chen Q, Li H, Tang H, Zhang Y, Yao S.
Journal: Analyst (2013): 6551

Use of pyrogallol red and pyranine as probes to evaluate antioxidant capacities towards hypochlorite
Authors: Perez-Cruz F, Cortes C, Atala E, Bohle P, Valenzuela F, Olea-Azar C, Speisky H, Aspee A, Lissi E, Lopez-Alarcon C, Bridi R.
Journal: Molecules (2013): 1638

A novel flow-injection analysis system for evaluation of antioxidants by using sodium dichloroisocyanurate as a source of hypochlorite anion
Authors: Ichiba H, Hanami K, Yagasaki K, Tanaka M, Ito H, Fukushima T.
Journal: Drug Discov Ther (2012): 44

Colorimetric determination of hypochlorite with unmodified gold nanoparticles through the oxidation of a stabilizer thiol compound
Authors: Zhang J, Wang X, Yang X.
Journal: Analyst (2012): 2806

Amplite 荧光法黄嘌呤氧化酶检测试剂盒 红色荧光

	货号	11304	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 Tests	价格	2604
	Ex (nm)	571	Em (nm)	584
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Amplite 荧光法黄嘌呤氧化酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的谷氨酸检测的试剂盒，XO（黄嘌呤氧化酶）是一种能催化次黄嘌呤到黄嘌呤或者更进一步催化黄嘌呤到尿酸的酶。在嘌呤的分解代谢扮演着重要角色。XO通常能在肝脏或者空肠检测到。在重度肝损伤，XO释放到血液中，因此血液中XO检测试验可以用来确定肝脏损伤的发生。黄嘌呤尿是一种少见遗传病，缺少XO导致血中高浓度黄嘌呤引起肾衰竭等健康疾病。Amplite XO检测试剂盒提供了一种快速超敏感的方法，来检测XO的活性。本试剂盒可以用于96或384微孔板分析，并且无需任何分步骤，就可以轻易地实现自动化。在实验分析种，XO氧化嘌呤碱基，次黄嘌呤、黄嘌呤转变成尿酸或者超氧化物，后者又自发的降解为双氧水。该试剂盒使用我们的Amplite Red底物使其成为双记录模式。红色的荧光信号很容易的通过荧光酶标仪（540／590nm）检测到或者被酶标仪（576nm）检测。Amplite黄嘌呤氧化酶检测试剂盒在100 ul检测体积中能检测到0.15mU／ml的XO。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 荧光法黄嘌呤氧化酶检测试剂盒。 

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产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.XO标准品或测试样品（50μL）
2.添加XO工作溶液（50μL）
3.在室温下孵育15-30分钟
4.在Ex / Em = 540/590 nm处读取荧光强度（截止570 nm）

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
1. Amplite 红色储备液（250X）：
将40μLDMSO（组分F）加入到Amplite Red底物（组分A）的小瓶中。应立即使用原液。注意：在硫醇如二硫苏糖醇（DTT）和2-巯基乙醇存在下，Amplite Red底物不稳定。反应中DTT或2-巯基乙醇的最终浓度应不高于10μM。 Amplite Red底物在高pH（> 8.5）下也不稳定。因此，反应应在pH = 7-8下进行。推荐使用所提供的测定缓冲液，pH = 7.4。

2. HRP库存解决方案（500X）：
将100μL测定缓冲液（组分B）加入到辣根过氧化物酶（组分C）的小瓶中。

3.黄嘌呤氧化酶（XO）标准溶液（1 U / mL）
将200μL测定缓冲液（组分B）加入黄嘌呤氧化酶标准品（组分E）的小瓶中。

2.标准溶液

XO标准
将10μL1U/ mL XO标准溶液加入990μL测定缓冲液（组分B）中以制备10mU / mL XO标准溶液（XO7）。 进行1：3连续稀释，得到剩余的连续稀释的XO标准品（XO6-XO1）。

3.工作溶液

将20μLDelterite Red储备溶液（250X），10μLHRP储备溶液（500X）和50μL黄嘌呤（100X，组分D）加入5mL分析缓冲液（组分B）中，使总体积为 5.08mL黄嘌呤氧化酶（XO）工作溶液,避光。

样品分析

表1.实心黑色96孔微孔板中XO标准品和测试样品的布局

表2.每个孔的试剂组成

1.根据表1和表2中提供的布局，将XO标准品（XO），空白对照（BL）和测试样品（TS）制备成固体黑色96孔微孔板。对于384孔板，使用25μL 每孔试剂代替50μL。

2.向XO标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入50μLXO工作溶液，使总XO测定体积为100μL/孔。 对于384孔板，在每个孔中加入25μLXO工作溶液，总体积为50μL/孔。

3.在室温下孵育反应15至30分钟，避光。

4.用荧光板读数器在激发= 530-570nm，发射= 590-600nm（最佳Ex / Em = 540 / 590nm），截止= 570nm监测荧光强度。

参考文献

Xanthine oxidoreductase regulates macrophage IL1β secretion upon NLRP3 inflammasome activation
Authors: Annette Ives, Johji Nomura, Fabio Martinon, Thierry Roger, Didier LeRoy, Jeffrey N Miner, Gregoire Simon, Nathalie Busso, Alexander So
Journal: Nature communications (2015)

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Amplite 荧光法甲醛定量试剂盒 绿色荧光

	货号	10057	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 Tests	价格	3924
	Ex (nm)	400	Em (nm)	510
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Amplite 荧光法甲醛定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的荧光染料。甲醛是自发产生的物质。上层大气中，可以自发贡献这个环境总甲醛的90%。生物体内很少遇到单体或者水合物甲醛。甲烷的生成通过等效量甲醛，但是在甲烷化时一碳物种被亚甲基类所掩饰。甲醛是甲醇毒性的原因，因为甲醇通过乙醇脱氢酶转变为甲醛。Amplite荧光法甲醛分析试剂盒 *绿色荧光* 利用专有的无荧光染料通过与甲醛反应产生强荧光。这个荧光试剂盒可以提供敏感的混合和读取的方法来检测甲醛。本试剂盒可以用于96或384微孔板分析，并且无需任何分步骤，就可以轻易地实现自动化。它的信号可以通过酶标仪在400／510nm处轻易地读取。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 荧光法甲醛定量试剂盒。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备甲醛标准品和/或测试样品（50μL）
2.添加AldeLight 绿色工作溶液（50μL）
3.在室温下孵育20至60分钟
4.监测Ex / Em = 410/525 nm处的荧光增加（截止= 495 nm）

溶液制备

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1 AldeLight 绿色原液（500X）：
将20μLDMSO（组分D）加入AldeLight Green（组分A）小瓶中，制成500X AldeLight Green原液。

1.2 甲醛标准溶液（123 mM）：
将5μL37.2％甲醛标准品（组分C）加入0.5mL测定缓冲液（组分B）中，制成123mM甲醛标准溶液。

2.标准溶液

2.1醛标准溶液

将12.2μL123mM甲醛标准溶液加入0.5mL测定缓冲液（组分B）中，制成3mM甲醛标准溶液。 取3mM甲醛标准溶液，在测定缓冲液（组分B）中进行1:10，制成300μM甲醛标准品（FS7）。 取300μM甲醛标准品（FS7）并进行1：3连续稀释，得到连续稀释的甲醛标准品（FS6-FS1）和分析缓冲液（组分B）。

3.工作溶液

将10μL500XAldeLight Green原液加入5 mL分析缓冲液（组分B）中，充分混合，制成AldeLight Green工作溶液。 注意：5 mL AldeLight Green工作溶液足以容纳1个板。 AldeLight 绿色工作溶液不稳定，最好在2小时内使用。

样品分析

表1.固体背96孔微孔板中甲醛标准品和测试样品的布局。 FS =甲醛标准品（FS1-FS7,0.41至300μM），BL =空白对照，TS =测试样品。

表2.每个孔的试剂组成

1.根据表1和2中提供的布局制备甲醛标准品（FS），空白对照品（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25μL试剂代替50μL。

2.向甲醛标准品，空白对照品和测试样品的每个孔中加入50μLAldeLight Green工作溶液，使总甲醛测定体积为100μL/孔。 对于384孔板，在每个孔中加入25μLAldeLight Green工作溶液，总体积为50μL/孔。

3.在室温下孵育反应20至60分钟，避光。

4.用Ex / Em = 410 / 525nm（截止= 495nm）的荧光板读数器监测荧光增加。

参考文献

Biological Activity of Peptide-conjugated Polyion Complex Matrices Consisting of Alginate and Chitosan
Authors: Chikara Fujimori, Jun Kumai, Kyotaro Nakamura, Yingzi Gu, Fumihiko Katagiri, Kentaro Hozumi, Yamato Kikkawa, Motoyoshi Nomizu
Journal: Peptide Science (2016)

Hepatic Deficiency of Augmenter of Liver Regeneration Exacerbates Alcohol-Induced Liver Injury and Promotes Fibrosis in Mice
Authors: Sudhir Kumar, Jiang Wang, Richa Rani, Chandrashekhar R Gandhi
Journal: PloS one (2016): e0147864

Integrated self-assembling drug delivery system possessing dual responsive and active targeting for orthotopic ovarian cancer theranostics
Authors: Chun-Jui Lin, Chen-Hsiang Kuan, Li-Wen Wang, Hsi-Chin Wu, Yunching Chen, Chien-Wen Chang, Rih-Yang Huang, Tzu-Wei Wang
Journal: Biomaterials (2016): 12–26

Fiber-optic protease sensor based on the degradation of thin gelatin films
Authors: Bastien Schyrr, Stéphanie Boder-Pasche, Réal Ischer, Rita Smajda, Guy Voirin
Journal: Sensing and Bio-Sensing Research (2015): 65–73

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Amplite 荧光法L-丙氨酸检测试剂盒

	货号	13825	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 Tests	价格	3924
	Ex (nm)	571	Em (nm)	585
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Amplite 荧光法L-丙氨酸检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测丙氨酸的试剂盒，L-丙氨酸（L-Ala）作为重要蛋白质的构建块起着至关重要的作用。 L-丙氨酸主要由来自乳酸的肌肉细胞合成并通过肝脏吸收到血液中。 它被谷氨酸丙酮酸转氨酶转化为丙酮酸，进入代谢主流。 L-Ala对葡萄糖的产生和血糖管理至关重要，并在免疫系统和预防肾结石方面发挥重要作用。 L-丙氨酸的缺乏通常是营养不良，低蛋白饮食和压力的标志。 AAT Bioquest的Amplite 荧光L-丙氨酸测定试剂盒提供了一种灵敏的荧光测定方法，用于量化生物样品中的L-丙氨酸。 它利用一种酶偶合反应释放过氧化氢，Quest Fluor L-丙氨酸传感器在Ex / Em = 540/590 nm处使用荧光酶标仪进行检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 荧光法L-丙氨酸检测试剂盒。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备测试样品以及连续稀释的L-丙氨酸标准品（50 µL）
2.加入等体积的L-丙氨酸工作溶液（50 µL）
3.在37°C下孵育30分钟至1小时
4.监测Ex / Em = 540/590 nm的荧光强度

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 Quest Fluor L-丙氨酸传感器储备溶液（200X）：
将55 µL DMSO（组分E）添加到Quest Fluor L-丙氨酸传感器（组分A）中，制成200X Quest Fluor L-丙氨酸传感器储备溶液。

1.2 L-丙氨酸标准溶液（1 mM）：
将10 µL 100 mM L-丙氨酸（组分D）加到990 µL PBS（pH 7.0）中，得到1 mM L-丙氨酸溶液。

2.标准溶液

L-丙氨酸标准
向900 µL PBS中加入100 µL 1 mM L-丙氨酸标准溶液，制成100 µM L-丙氨酸溶液（AS7）。进行1：2连续稀释以获得连续稀释的L-丙氨酸标准品（AS6-AS1）。

3.工作溶液

3.1 将5 mL测定缓冲液（组分C）加入一瓶酶混合1瓶（组分B1）中，并充分混合。

3.2 将100μLddH2O加入一个酶混合物2小瓶（组分B2）中并充分混合。

3.3 将整个小瓶（100μL）的Enzyme Mix 2和25 uL的200X L-丙氨酸传感器储备溶液转移到Enzyme Mix 1瓶中； 混合均匀。 注意：工作解决方案不稳定。 立即使用，避免直接暴露在光线下。

样品操作及实验分析

表1.黑色96孔微孔板中L-丙氨酸标准品和测试样品的布局。 AS = L-丙氨酸标准品（AS1-AS7，1.5至100 µM）； BL =空白对照； TS =测试样品。

表2.每个孔的试剂组成

1.根据表1和表2提供的布局，准备L-丙氨酸标准品（AS），空白对照（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25 µL试剂代替50 µL。

2.将50 µL L-丙氨酸工作溶液添加到L-Alanine标准品，空白对照和测试样品的每个孔中，以使L-Alanine测定的总体积为100 µL /孔。 对于384孔板，将25 µL L-丙氨酸工作溶液添加到每个孔中，总体积为50 µL /孔。 注意：在pH 6.5至7.0下运行L-丙氨酸测定。

3.将反应混合物在37°C孵育30分钟至1小时。

4.使用荧光板读数器在Ex / Em = 540/590 nm（截止：570 nm）下监测荧光的增加。

参考文献

Reactivity of beta-methylamino-L-alanine in complex sample matrixes complicating detection and quantification by mass spectrometry
Authors: Glover WB, Liberto CM, McNeil WS, Banack SA, Shipley PR, Murch SJ.
Journal: Anal Chem (2012): 7946

Synthesis and characterization of silver/alanine nanocomposites for radiation detection in medical applications: the influence of particle size on the detection properties
Authors: Guidelli EJ, Ramos AP, Zaniquelli ME, Nicolucci P, Baffa O.
Journal: Nanoscale (2012): 2884

Detection of farnesyltransferase interface hot spots through computational alanine scanning mutagenesis
Authors: Perez MA, Sousa SF, Oliveira EF, Fernandes PA, Ramos MJ.
Journal: J Phys Chem B (2011): 15339

Molecular beacon based bioassay for highly sensitive and selective detection of nicotinamide adenine dinucleotide and the activity of alanine aminotransferase
Authors: Tang Z, Liu P, Ma C, Yang X, Wang K, Tan W, Lv X.
Journal: Anal Chem (2011): 2505

Highly specific substrates of proteinase 3 containing 3-(2-benzoxazol-5-yl)-l-alanine and their application for detection of this enzyme in human serum
Authors: Wysocka M, Lesner A, Guzow K, Kulczycka J, Legowska A, Wiczk W, Rolka K.
Journal: Anal Chem (2010): 3883

In-capillary derivatization and stacking electrophoretic analysis of gamma-aminobutyric acid and alanine in tea samples to redeem the detection after dilution to decrease matrix interference
Authors: Su YS, Lin YP, Cheng FC, Jen JF.
Journal: J Agric Food Chem (2010): 120

SAFETY study: alanine aminotransferase cutoff values are set too high for reliable detection of pediatric chronic liver disease
Authors: Schwimmer JB, Dunn W, Norman GJ, Pardee PE, Middleton MS, Kerkar N, Sirlin CB.
Journal: Gastroenterology (2010): 1357

[Rapid detection of alanine aminotransferase with near-infrared spectroscopy]
Authors: Huang FR, Zhang J, Luo YH, Li SP, Zheng SF, Chen XD.
Journal: Guang Pu Xue Yu Guang Pu Fen Xi (2010): 2620

An electrochemical biosensor array for rapid detection of alanine aminotransferase and aspartate aminotransferase
Authors: Song MJ, Yun DH, Hong SI.
Journal: Biosci Biotechnol Biochem (2009): 474

Detection of the mitochondrial and catalytically active alanine aminotransferase in human tissues and plasma
Authors: Glinghammar B, Rafter I, Lindstrom AK, Hedberg JJ, Andersson HB, Lindblom P, Berg AL, Cotgreave I.
Journal: Int J Mol Med (2009): 621

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