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Screen Quest 阿片样受体1表达细胞株
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货号 | 38006 | 存储条件 | 在零下80度以下保存 |
| 规格 | Each | 价格 | 0 | |
| Ex (nm) | Em (nm) | |||
| 分子量 | 溶剂 | |||
| 产品详细介绍 | ||||
简要概述
产品基本信息
货号：38006
产品名称：Screen Quest 阿片样受体1表达细胞株
规格：Each
产品介绍
G蛋白偶联受体（GPCR）是药物发现计划针对的最大受体类别之一。钙通量（通过Gq途径耦合）测定法是药物发现中筛选GPCR靶标的首选方法。但是，超过60％的已知GPCR通过与cAMP偶联的腺苷酸环化酶活性发出信号。大多数现有的cAMP分析不仅需要细胞裂解，而且缺乏时间和空间分辨率。 Screen Quest 阿片样受体1表达细胞株能够研究通常不通过细胞内钙偶联的GPCR。 Screen Quest 阿片样受体1表达细胞株基于一系列G蛋白嵌合体，包括混杂G蛋白Gα16和外源性环状核苷酸门控通道（CNGC）。嵌合体由Gq蛋白复合物的α亚基组成，该复合物的5个羧基末端氨基酸已被其他G蛋白之一（Gαs，Gαi，Gαo或Gαz）取代。这些氨基酸负责受体与其G蛋白的偶联。这些嵌合体或CNGC与特定的非Gq偶联受体共表达可能会在受体刺激后导致细胞内钙信号的产生。 Screen Quest HEK-CNGC-阿片受体样1（ORL1）细胞系是用CNGC和人阿片受体样1稳定转染的HEK-293细胞。在细胞中组成性表达的CNGC实时响应增加或通过协调改变阳离子通量（例如钙，钾或钠）来降低细胞内cAMP水平。可以使用钙敏感的荧光指示剂（例如Calbryte 520 AM，Cal-520 AM，Fluo-8 AM或Fluo-4 AM和相应的免洗钙试剂盒）检测特定配体对ORL1的激活。 ）或AAT优化的膜电位测定试剂盒。该细胞系已成功用于药物发现和筛选环境中，以研究通常不通过细胞内钙偶联的GPCR。它已被FLIPR和FDSS系统有效使用。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Screen Quest 阿片样受体1表达细胞株。
图示
 图1. Screen Quest 活细胞cAMP测定原理 |
 图2.ORL1细胞和亲代细胞对Orphanin FQ的反应。 将HEK-ORL1细胞和亲本细胞均在20 µL /孔培养基中的Poly-D-赖氨酸包被的黑色384孔板中铺板过夜。 将细胞与等体积（20 µL）的MP染料工作溶液在室温下孵育2小时。 在添加Orphanin FQ之前和之后30分钟获得了两个读数。 图中绘制了两个读数的比率（F / F0）。 A：Orphanin FQ在HEK-PRL1细胞系中的剂量反应曲线。 在PDE抑制剂Ro20-1724和β-肾上腺素受体激动剂异丙肾上腺素存在下，EC50 = 0.75 nM。 B：亲代细胞对Orphanin FQ无反应。 |
参考文献
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cAMP-Induced Histones H3 Dephosphorylation Is Independent of PKA and MAP Kinase Activations and Correlates With mTOR Inactivation
Authors: Rodriguez P, Rojas J.
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A cAMP Biosensor-Based High-Throughput Screening Assay for Identification of Gs-Coupled GPCR Ligands and Phosphodiesterase Inhibitors
Authors: Vedel L, Brauner-Osborne H, Mathiesen JM.
Journal: J Biomol Screen (2015): 849
Cardiac Hypertrophy Is Inhibited by a Local Pool of cAMP Regulated by Phosphodiesterase 2
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