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Signal Guard 磷酸酶反应终止液 货号11622-AAT Bioquest荧光染料

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Signal Guard 磷酸酶反应终止液

Signal Guard 磷酸酶反应终止液

Signal Guard 磷酸酶反应终止液 货号11622 货号 11622 存储条件 在2-8度冷藏保存
规格 100 mL 价格 1272
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Signal Guard 磷酸酶反应终止液是美国AAT Bioquest生产的用于终止磷酸酶反应的即用型终止溶液，碱性和酸性磷酸酶是分别在碱性和酸性条件下负责分子（例如核苷酸，蛋白质和生物碱）的去磷酸化的水解酶。一些磷酸酶测定和测试需要停止磷酸酶反应以使用终止溶液进行进一步分析。我们的Signal Guard 磷酸酶反应终止溶液是一种即用型试剂，可在用户确定的时间点提供终止荧光和比色信号产生磷酸酶反应的便利工具，并可使荧光或比色信号保持稳定，最高可达18小时。Signal Guard 磷酸酶反应终止溶液经过优化，可与碱性，酸性和蛋白质磷酸酶相容。与其他商业磷酸酶停止试剂相比，我们的Signal Guard 磷酸酶反应终止溶液几乎是中性和温和的。它与绝大多数比色和荧光磷酸酶底物相容，而来自其他供应商的终止试剂由于其极高的pH而与大多数基于荧光的磷酸酶测定不相容。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Signal Guard 磷酸酶反应终止液。 

产品说明书

96孔板的测定方案
1.将Signal Guard 磷酸酶反应停止溶液温热至室温。
2.在所需的停止时间点，在每个微孔板孔中每200μL体积加入50μL的Signal Guard 磷酸酶反应终止溶液。
注意：对于其他反应体积，按比例调整Signal Guard 磷酸酶反应终止溶液的添加（例如，向25μL反应体积中加入5μL）。信号应保持稳定至少18小时。

 

示例数据分析

 

Signal Guard 磷酸酶反应终止液 货号11622

图1. Signal Guard 磷酸酶反应终止溶液在酸性磷酸酶荧光（AAT Bioquest Cat＃11627）测定中的应用。 通过添加200μL反应混合物引发含有100mU / mL酸性磷酸酶的两个平行反应。 将反应物在室温下温育上述时间，然后将50μLCalignGuard TM磷酸酶反应终止溶液加入到一个反应中。 该图表明Signal Guard 磷酸酶反应终止溶液完全抑制了反应。

 

参考文献

Alkaline phosphatase: a potential biomarker for stroke and implications for treatment
Authors: A. L. Brichacek
Journal: Metab Brain Dis (2019): 3-19

Discoveries of the phosphatidate phosphatase genes in yeast published in the Journal of Biological Chemistry
Authors: G. M. Carman
Journal: J Biol Chem (2019): 1681-1689

Dynamic structural rearrangements and functional regulation of voltage-sensing phosphatase
Authors: S. Sakata
Journal: J Physiol (2019): 29-40

Fat-regulating phosphatidic acid phosphatase: a review of its roles and regulation in lipid homeostasis
Authors: G. M. Carman
Journal: J Lipid Res (2019): 2-6

Myosin phosphatase: Unexpected functions of a long-known enzyme
Authors: A. Kiss
Journal: Biochim Biophys Acta Mol Cell Res (2019): 2-15

Redox inhibition of protein phosphatase PP2A: Potential implications in oncogenesis and its progression
Authors: D. Raman
Journal: Redox Biol (2019): 101105

Regulation of hematopoietic cell signaling by SHIP-1 inositol phosphatase: growth factors and beyond
Authors: M. L. Hibbs
Journal: Growth Factors (2019): 1-19

Roles of phosphatase and tensin homolog in skeletal muscle
Authors: T. Shan
Journal: J Cell Physiol (2019): 3192-3196

Structure and functions of His domain protein tyrosine phosphatase in receptor trafficking and cancer (1)
Authors: G. Desrochers
Journal: Biochem Cell Biol (2019): 68-72

The multiple functions of protein phosphatase 6
Authors: T. Ohama
Journal: Biochim Biophys Acta Mol Cell Res (2019): 74-82

说明书
Signal Guard 磷酸酶反应终止液.pdf

荧光磷酸酶底物 CF-MUP钠盐 MUP的卓越代替品 （停产） 货号11628-AAT Bioquest荧光染料

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荧光磷酸酶底物 CF-MUP钠盐 MUP的卓越代替品 （停产）

荧光磷酸酶底物 CF-MUP钠盐 MUP的卓越代替品 （停产）

货号 11628 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 10 mg 价格 0
Ex (nm) 356 Em (nm) 456
分子量 352.55 溶剂 Water
产品详细介绍

简要概述

荧光磷酸酶底物 CF-MUP钠盐 MUP的卓越代替品是美国AAT Bioquest生产的荧光素，该产品在与磷酸酶相互作用后，无色和非荧光FDP被水解成高荧光荧光素，其表现出优异的光谱特性，与配备有氩激光激发的大多数荧光仪器的最佳检测相匹配。或者，FDP也可用于检测发色模式中的磷酸酶，因为酶产物（荧光素）表现出很大的消光系数（接近100,000cm-1mol-1）。在一些文献中，FDP被认为是最敏感的荧光磷酸酶底物之一。FDP已广泛用于各种ELISA测定。此外，它还用于检测酪氨酸磷酸酶。FDP是热不稳定的，需要特别注意保存固体样品和储备溶液。

Mup是用于磷酸酶的荧光底物。它广泛用于检测溶液中的磷酸酶。然而，这种磷酸酶底物不适合活细胞或连续测定，因为MU（4-甲基伞形酮）是酶产物，其仅在pH值> 10时发展出最大荧光。因此，也难以使用MUP检测具有酸性最佳pH范围的磷酸酶，例如酸性磷酸酶。

AAT Bioquest提供的CF-MUP Plus，用于解决与MUP基质相关的pH限制问题。CF-MU在pH 5.0以上表现出最大荧光，因此CF-MUP底物可以很好地用于连续磷酸酶测定。它还可以用于酸性pH的测定，例如酸性磷酸酶和一些蛋白磷酸酶。

衍生自红色荧光二甲基吖啶酮（Sun Red）的磷酸酶底物仅含有单个水解敏感部分，从而避免了基于荧光素底物的双相动力学。磷酸酶催化的太阳红磷酸盐（SRP）的水解产生可以用633nm激光激发并且发射~660nm的太阳红荧光团。虽然Sun Red很容易在633 nm处激发，红色发射约为660 nm，但SRP在633 nm处的吸收非常小，没有红色发射，使SRP成为最敏感的NIR磷酸酶传感器之一。请不要使用DMSO制备储备溶液，因为它会显著增加分析背景。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的荧光磷酸酶底物 CF-MUP钠盐 MUP的卓越代替品。

产品说明书

磷酸盐底物的测定方案

概述

在Tris缓冲液（50μL）中制备10-50μM磷酸盐

添加磷酸酶标准品和/或测试样品（50μL）

在室温或37℃孵育30至120分钟监测荧光强度

注意：以下是溶液中磷酸酶测定的推荐方案。 该说明仅提供指导，应根据具体需要进行修改。

 

1.准备工作解决方案：

1.1在升值溶剂中制备2至10 mM的储备溶液（见说明书中的表）。任何未使用的溶液需要等分并在<-20℃冷冻。

注意1：不要使用DMSO，ETOH或METH制备SunRed™磷酸盐（目录号11629）的原液，因为它可以显著提高分析背景。

注意2：避免反复冻融循环，避免光照。

1.2制备2X磷酸盐工作溶液：在实验当天，将底物溶解在升值溶剂中或在室温下解冻等份的储备溶液（来自步骤1.1）。在100 mM Tris缓冲液或您选择的缓冲液（pH 8至9）（非磷酸盐缓冲液）中制备10至50μM的2X工作溶液。

 

2.在上清液中进行磷酸酶测定：

2.1将50μL2X磷酸盐工作溶液（来自步骤1.2）加入磷酸酶标准品，空白对照和测试样品的每个孔中，使总磷酸酶测定体积为100μL/孔。

注意：对于384孔板，每孔加入25μL样品和25μL2X磷酸盐工作溶液。

2.2在所需温度下孵育反应30至120分钟，避光。

2.3用荧光板读数器检测适当滤光片组（见说明书中的表）的荧光增加。

2.4空白孔中的荧光（仅用测定缓冲液）用作对照，并从具有磷酸酶反应的那些孔的值中减去。

 

参考文献

Application of intracellular alkaline phosphatase activity measurement in detection of neutrophil adherence in vitro
Authors: Bednarska K, Klink M, Sulowska Z.
Journal: Mediators Inflamm (2006): 19307

Evaluation of an alternative method for the enumeration and confirmation of Clostridium perfringens from treated and untreated sewages
Authors: Wohlsen T, Bayliss J, Gray B, Bates J, Katouli M.
Journal: Lett Appl Microbiol (2006): 438

Fluorometric cell-ELISA for quantifying rabies infection and heparin inhibition
Authors: Rincon V, Corredor A, Martinez-Gutierrez M, Castellanos JE.
Journal: J Virol Methods (2005): 33

Purification and partial characterization of an acid phosphatase from Spirodela oligorrhiza and its affinity for selected organophosphate pesticides
Authors: Hoehamer CF, Mazur CS, Wolfe NL.
Journal: J Agric Food Chem (2005): 90

Relative movement and soil fixation of soluble organic and inorganic phosphorus
Authors: Anderson BH, Magdoff FR.
Journal: J Environ Qual (2005): 2228

Crystal structure of a covalent intermediate of endogenous human arylsulfatase A
Authors: Chruszcz M, Laidler P, Monkiewicz M, Ortlund E, Lebioda L, Lewinski K.
Journal: J Inorg Biochem (2003): 386

Development of a rapid 1-h fluorescence-based cytotoxicity assay for Listeria species
Authors: Shroyer ML, Bhunia AK.
Journal: J Microbiol Methods (2003): 35

Enzymatic differentiation of Candida parapsilosis from other Candida spp. in a membrane filtration test
Authors: Bauters TG, Peleman R, Dhont M, Vanhaesebrouck P, Nelis HJ.
Journal: J Microbiol Methods (2003): 11

A colorimetric and fluorometric microplate assay for the detection of microcystin-LR in drinking water without preconcentration
Authors: Bouaicha N, Maatouk I, Vincent G, Levi Y.
Journal: Food Chem Toxicol (2002): 1677

LVV-hemorphin-4 modulates Ca2+/calmodulin-dependent pathways in the immune system by the same mechanism as in the brain
Authors: Barkhudaryan N, Gambarov S, Gyulbayazyan T, Nahapetyan K.
Journal: J Mol Neurosci (2002): 203

说明书
荧光磷酸酶底物 CF-MUP钠盐 MUP的卓越代替品 （停产）.pdf

Amplite 比色法碱性磷酸酶检测试剂盒 黄色荧光 货号11950-AAT Bioquest荧光染料

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Amplite 比色法碱性磷酸酶检测试剂盒 黄色荧光

Amplite 比色法碱性磷酸酶检测试剂盒 黄色荧光

Amplite 比色法碱性磷酸酶检测试剂盒 黄色荧光 货号11950 货号 11950 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 500 Tests 价格 1944
Ex (nm) 405 Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 比色法碱性磷酸酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于过氧化物酶的试剂盒，碱性磷酸酶是用于ELISA，免疫组织化学，Northern，Southern和Western印迹应用的高度灵敏的酶。 它广泛用于各种生物测定（特别是免疫测定）和基于ELISA的诊断。 这种Amplite 碱性磷酸酶检测试剂盒使用pNPP（一种生色磷酸酶底物）来定量溶液，细胞提取物以及固体表面（如PVDF膜）上的碱性磷酸酶活性。 该试剂盒通过我们优化的“混合和读取”测定方案提供所有必需组分，该方案与HTS液体处理仪器兼容。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 比色法碱性磷酸酶检测试剂盒。 

 

适用仪器

光吸收酶标仪  
吸收： 400nm
推荐孔板： 透明底板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备碱性磷酸酶标准品和/或测试样品（50μL）
2.添加ALP工作溶液（50μL）
3.在室温或37°C孵育10 – 30分钟
4.监测400nm处的吸光度增加

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1 pNPP储备液（100X）：
将300μL蒸馏水加入pNPP小瓶（组分A）中。 好好混合。 应立即使用pNPP储备溶液。 注意：如果妥善保存，解决方案应该有效期为3-4周。

1.2 碱性磷酸盐标准溶液：
添加100μL含0.1％BSA（H2O-0.1％BSA）的蒸馏水至碱性磷酸酶标准品（组分C，10单位），以产生100单位/ mL碱性磷酸酶标准溶液。

 

2.标准溶液

碱性磷酸盐标准
将10μL100单位/ mL碱性磷酸酶标准溶液加入990μLH2O-0.1％BSA中，生成1,000 mU / mL碱性磷酸酶标准溶液。 然后取100μL的1,000 mU / mL碱性磷酸酶标准溶液进行1:10稀释，得到100 mU / mL碱性磷酸酶标准溶液（AS7）。 然后进行1：3连续稀释以获得剩余标准品（AS6-AS1）。 注意：应丢弃未使用的稀释碱性磷酸酶标准溶液部分。

 

3.工作溶液

将50μLpNPP储备溶液（100X）加入5mL测定缓冲液（组分B）中，使总体积为5.05mL的pNPP工作溶液。

 

样品操作及分析

表1.碱性磷酸酶标准品和白色/透明底96孔微孔板中的样品的布局。 AS =碱性磷酸酶标准品（AS1-AS7,0.1至100 mU / mL）; BL =空白对照; TS =测试样品

BL BL TS TS
AS1 AS1 … …
AS2 AS2 … …
AS3 AS3    
AS4 AS4    
AS5 AS5    
AS6 AS6    
AS7 AS7    

表2.每个孔的试剂组成

孔 容积 试剂
AS1-AS7 50ul 连续稀释（0.1至100 mU / mL）
BL 50ul H2O-0.1％BSA
TS 50ul 测试样品

1.在上清液中：

1.1根据表1和2中提供的布局制备碱性磷酸盐标准品（AS），空白对照品（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25μL试剂代替50μL。

1.2向碱性磷酸盐标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入50μLpNPP工作溶液，使总碱性磷酸盐测定体积为100μL/孔。 对于384孔板，在每个孔中加入25μLpNPP工作溶液，总体积为50μL/孔。

1.3将反应在所需温度下孵育10至30分钟，避光。

1.4用吸光度读板仪在400 nm处监测吸光度的增加。

 

2.在细胞中：

2.1根据需要处理细胞。

2.2将等体积的pNPP工作溶液加入每个细胞孔（例如100μL/ 96孔板或50μL/ 384孔板）中。 注意：或者，从细胞板中取出生长培养基，用5 mL蒸馏水稀释5 mL工作溶液。 然后向细胞孔中加入100μL（对于96孔板）或50μL（对于384孔板）1：1稀释的工作溶液。

2.3将反应在所需温度下孵育30至60分钟，避光。

2.4用吸光度读板仪在400 nm处监测吸光度的增加。

 

参考文献

An mTOR Signaling Modulator Suppressed Heterotopic Ossification of Fibrodysplasia Ossificans Progressiva
Authors: Kyosuke Hino, Chengzhu Zhao, Kazuhiko Horigome, Megumi Nishio, Yasue Okanishi, Sanae Nagata, Shingo Komura, Yasuhiro Yamada, Junya Toguchida, Akira Ohta
Journal: Stem cell reports (2018): 1106–1119

R51Q SNX10 induces osteopetrosis by promoting uncontrolled fusion of monocytes to form giant, non-functional osteoclasts
Authors: Maayan Barnea, Merle Stein, Sabina Winograd-Katz, Moran Shalev, Esther Arman, Ori Brenner, Fadi Thalji, Moien Kanaan, Hila Elinav, Polina Stepensky
Journal: bioRxiv (2018): 332551

The impact of various scaffold components on vascularized bone constructs
Authors: Ahmad Eweida, Matthias Schulte, Oliver Frisch, Ulrich Kneser, Leila Harhaus
Journal: Journal of Cranio-Maxillofacial Surgery (2017)

A Mineralized High Strength and Tough Hydrogel for Skull Bone Regeneration
Authors: Bing Xu, Pengbin Zheng, Fei Gao, Wei Wang, Hongtao Zhang, Xuran Zhang, Xuequan Feng, Wenguang Liu
Journal: Advanced Functional Materials (2016)

DRG axon elongation and growth cone collapse rate induced by Sema3A are differently dependent on NGF concentration
Authors: Andrius Kaselis, Rimantas Treinys, Ruta Vosyliute, Saulius Satkauskas
Journal: Cellular and molecular neurobiology (2014): 289–296

Acute oral toxicity and kinetic behaviors of inorganic layered nanoparticles
Authors: Jin Yu, Hea-Eun Chung, Soo-Jin Choi
Journal: Journal of Nanomaterials (2013): 12

Effect of Some Antihypertensive Drugs on Alkaline Phosphatase and DNA of Mice
Authors: OY El-Khawaga, A El-Waseef, YO Ellazec, MM El-Naggar, Abd M Alla
Journal: International Journal of Genomics and Proteomics (2013): 60

An engineering understanding of the small intestine
Authors: Monica Rosalia Jaime Fonseca
Journal: (2012)

Cytotoxicity and alkaline phosphatase activity evaluation of endosequence root repair material
Authors: Mahmoud Reza Modareszadeh, Peter M Di Fiore, David A Tipton, Narges Salamat
Journal: Journal of endodontics (2012): 1101–1105

Alginate-loaded liposomes can protect encapsulated alkaline phosphatase functionality when exposed to gastric pH
Authors: Alan M Smith, Monica R Jaime-Fonseca, Liam M Grover, Serafim Bakalis
Journal: Journal of agricultural and food chemistry (2010): 4719–4724

 

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产品名称 货号
Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒 Cat#11952
Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒 Cat#11953
Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒 Cat#11954

说明书
Amplite 比色法碱性磷酸酶检测试剂盒 黄色荧光.pdf

Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒 红色荧光 货号11954-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒 红色荧光

Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒 红色荧光

货号 11954 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 500 Tests 价格 2604
Ex (nm) 592 Em (nm) 609
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于磷酸酶的试剂盒，碱性磷酸酶是广泛分布于人体各脏器器官中，其中以肝脏为最多其次为肾脏，骨骼、肠、和胎盘等组织,。这种酶能催化核酸分子脱掉5’磷酸基团，从而使DNA 或RNA片段的5’-P末端转换成5’-OH末端，并生成一分子的有机基团和一分子的无机磷酸。碱性磷酸酶不是单一的酶，而是一组同功酶。碱性磷酸酶在ELISA、免疫组化，Northern, Southern 和 Western blot分析中有很高的灵敏度。它广泛地用于多种生物学分析（特别是免疫分析）和基于ELISA的疾病诊断。Amplite 荧光法碱性磷酸酶分析试剂盒 *红色荧光* 利用磷酸酶SunRed红色荧光底物的特性，来定量检测溶液中、细胞抽提液，固相物质表面（例如PVDF膜）的碱性磷酸酶活性。这种磷酸酶荧光底物在磷酸酶催化下产生的荧光产物具有强烈的红色荧光。本试剂盒提供所有必需组分，包括我们最佳的产品组合和分析方法，并且与可用于HTS（高通量筛选）。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒。 

点击查看光谱

 

适用仪器

荧光酶标仪  
激发： 620nm
发射： 660nm
cutoff： 630nm
推荐孔板： 黑色孔板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备碱性磷酸酶工作溶液（50μL）
2.添加碱性磷酸酶标准品和/或测试样品（50μL）
3.在室温或37°C孵育30至120分钟
4.监测Ex / Em = 620/660 nm处的荧光强度（截止= 630 nm）

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1 SunRed 底物储备液（250X）：
将100μL双无菌H2O加入到SunRed 底物（组分A）的小瓶中，制备250X SunRed 底物储备溶液。 应立即使用原液。

1.2碱性磷酸酶标准溶液（100 U / mL）：
添加100μL含0.1％BSA（H2O-0.1％BSA）的蒸馏水至碱性磷酸酶标准品（组分C，10单位），以产生100单位/ mL碱性磷酸酶标准溶液。 注意：碱性磷酸酶标准溶液不稳定。

 

2.标准溶液

碱性磷酸酶标准
将10μL100单位/ mL碱性磷酸酶标准溶液加入990μLH2O-0.1％BSA中，生成1,000 mU / mL碱性磷酸酶标准溶液。 取1,000 mU / mL碱性磷酸酶标准溶液，进行1：3连续稀释，得到连续稀释的碱性磷酸酶标准品（AS7-AS1）和H2O-0.1％BSA。

 

3.工作溶液

对于一个96孔板，将20μL250XSunRed 底物储备溶液加入到5 mL分析缓冲液（组分B）中并充分混合以制备碱性磷酸酶工作溶液。 注意：避免光照并为每个实验准备新鲜的反应混合物。

点击查看细胞制备指南

 

样品操作及分析

表1.碱性磷酸酶标准品和实心黑色96孔微孔板中的测试样品的布局。 AS =碱性磷酸酶标准品（AS1-AS7,0.3至300 mU / mL）; BL =空白对照; TS =测试样品。

BL BL TS TS
AS1 AS1 … …
AS2 AS2 … …
AS3 AS3    
AS4 AS4    
AS5 AS5    
AS6 AS6    
AS7 AS7    

表2.每个孔的试剂组成

孔 容积 试剂
AS1-AS7 50ul 连续稀释（0.3至300 mU / mL）
BL 50ul H2O – 0.1% BSA
TS 50ul 测试样本

1.在上清液中进行碱性磷酸酶测定：

1.1根据表1和2中提供的布局制备碱性磷酸酶标准品（AS），空白对照（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25μL试剂代替50μL。

1.2向碱性磷酸酶标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入50μL碱性磷酸酶工作溶液，使总碱性磷酸酶测定体积为100μL/孔。 对于384孔板，在每个孔中加入25μL碱性磷酸酶工作溶液，总体积为50μL/孔。

1.3在所需温度下将反应温育30至120分钟，避光。

1.4用Ex / Em = 620 / 660nm（截止值= 630nm）的荧光板读数器监测荧光增加。

 

2.在细胞中运行碱性磷酸酶测定：

2.1根据需要处理细胞。

2.2从细胞板中完全除去生长培养基。 注意：由于生长培养基与SunRed™底物的干扰，重要的是从细胞板中完全除去生长培养基。

2.3用5mL蒸馏水将1mL稀释的5mL碱性磷酸酶工作溶液稀释。

2.4向每个细胞孔中加入100μL（96孔板）或50μL（384孔板）的1：1稀释的碱性磷酸酶工作溶液。

2.5在所需温度下孵育反应30至60分钟，避光。

2.6用Ex / Em = 620 / 660nm（截止值= 630nm）的荧光板读数器监测荧光增加。

 

参考文献

The impact of various scaffold components on vascularized bone constructs
Authors: Ahmad Eweida, Matthias Schulte, Oliver Frisch, Ulrich Kneser, Leila Harhaus
Journal: Journal of Cranio-Maxillofacial Surgery (2017)

A Mineralized High Strength and Tough Hydrogel for Skull Bone Regeneration
Authors: Bing Xu, Pengbin Zheng, Fei Gao, Wei Wang, Hongtao Zhang, Xuran Zhang, Xuequan Feng, Wenguang Liu
Journal: Advanced Functional Materials (2016)

DRG axon elongation and growth cone collapse rate induced by Sema3A are differently dependent on NGF concentration
Authors: Andrius Kaselis, Rimantas Treinys, Ruta Vosyliute, Saulius Satkauskas
Journal: Cellular and molecular neurobiology (2014): 289–296

Acute oral toxicity and kinetic behaviors of inorganic layered nanoparticles
Authors: Jin Yu, Hea-Eun Chung, Soo-Jin Choi
Journal: Journal of Nanomaterials (2013): 12

Effect of Some Antihypertensive Drugs on Alkaline Phosphatase and DNA of Mice
Authors: OY El-Khawaga, A El-Waseef, YO Ellazec, MM El-Naggar, Abd M Alla
Journal: International Journal of Genomics and Proteomics (2013): 60

An engineering understanding of the small intestine
Authors: Monica Rosalia Jaime Fonseca
Journal: (2012)

Cytotoxicity and alkaline phosphatase activity evaluation of endosequence root repair material
Authors: Mahmoud Reza Modareszadeh, Peter M Di Fiore, David A Tipton, Narges Salamat
Journal: Journal of endodontics (2012): 1101–1105

Alginate-loaded liposomes can protect encapsulated alkaline phosphatase functionality when exposed to gastric pH
Authors: Alan M Smith, Monica R Jaime-Fonseca, Liam M Grover, Serafim Bakalis
Journal: Journal of agricultural and food chemistry (2010): 4719–4724

Regulation of the osteoblast-specific transcription factor Osterix by NO66, a Jumonji family histone demethylase
Authors: Krishna M Sinha, Hideyo Yasuda, Madelene M Coombes, Sharon YR Dent, Benoit De Crombrugghe
Journal: The EMBO journal (2010): 68–79

 

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Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒 红色荧光 .pdf

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Amplite 碱性磷酸酶检测试剂盒 生物发光法

Amplite 碱性磷酸酶检测试剂盒 生物发光法

Amplite 碱性磷酸酶检测试剂盒 生物发光法 货号11956 货号 11956 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 2604
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 碱性磷酸酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于磷酸酶的试剂盒，碱性磷酸酶是广泛分布于人体各脏器器官中，其中以肝脏为最多其次为肾脏，骨骼、肠、和胎盘等组织,。这种酶能催化核酸分子脱掉5’磷酸基团，从而使DNA 或RNA片段的5’-P末端转换成5’-OH末端，并生成一分子的有机基团和一分子的无机磷酸。碱性磷酸酶不是单一的酶，而是一组同功酶。碱性磷酸酶在ELISA、免疫组化，Northern, Southern 和 Western blot分析中有很高的灵敏度。它广泛地用于多种生物学分析（特别是免疫分析）和基于ELISA的疾病诊断。Amplite 碱性磷酸酶检测试剂盒 *生物发光法* 利用碱性磷酸酶底物产生冷光的特性，来定量检测溶液中、细胞抽提液，固相物质表面（例如PVDF膜）的碱性磷酸酶活性。这种磷酸酶荧光底物在磷酸酶催化下产生的荧光产物具有强烈的荧光。本试剂盒提供所有必需组分，包括我们最佳的产品组合和分析方法，并且与可用于HTS（高通量筛选）。本试剂盒具有非常高的灵敏度，可用于对灵敏度有要求的分析中。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 碱性磷酸酶检测试剂盒。 

 

适用仪器

发光酶标仪  
推荐孔板： 白色孔板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备碱性磷酸酶工作溶液（50μL）
2.添加碱性磷酸酶标准品和/或测试样品（50μL）
3.在室温下孵育30-60分钟
4.添加分析缓冲液（组分D）（50μL）
5.在室温下孵育10-30分钟
6.监测发光强度

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1碱性磷酸酶标准溶液（100 U / mL）：
将100μL含有0.1％BSA（H2O-0.1％BSA）的蒸馏水加入到碱性磷酸酶标准品（组分C，10单位）的小瓶中，以产生100单位/ mL碱性磷酸酶标准溶液。 注意：碱性磷酸酶标准溶液不稳定。

 

2.标准溶液

碱性磷酸酶标准
将10μL100单位/ mL碱性磷酸酶标准溶液加入990μLH2O-0.1％BSA中，生成1,000 mU / mL碱性磷酸酶标准溶液。 取1,000 mU / mL碱性磷酸酶标准溶液，在H2O-0.1％BSA中以1：100的比例获得10 mU / mL碱性磷酸酶标准溶液（AS7）。 然后取10 mU / mL碱性磷酸酶标准溶液（AS7），在H2O-0.1％BSA中进行1：3连续稀释，得到连续稀释的碱性磷酸酶标准品（AS6-AS1）。 注意：应废弃未使用的碱性磷酸酶标准品系列稀释液。

 

3.工作溶液

将磷酸酶底物（组分A）的全部内容物与反应缓冲液（组分B）混合以制备碱性磷酸酶工作溶液。 避光。

点击查看细胞制备指南

 

样品操作及分析

表1.固体白色96孔微孔板中碱性磷酸酶标准品和测试样品的布局。 AS =碱性磷酸酶标准品（AS1-AS7,0.01至10 mU / mL）; BL =空白对照; TS =测试样品。

BL BL TS TS
AS1 AS1 … …
AS2 AS2 … …
AS3 AS3    
AS4 AS4    
AS5 AS5    
AS6 AS6    
AS7 AS7    

表2.每个孔的试剂组成

孔 容积 试剂
AS1-AS7 50ul 连续稀释（0.01至10 mU / mL）
BL 50ul H2O – 0.1% BSA
TS 50ul 测试样本

1.在上清液中进行碱性磷酸酶测定：

1.1根据表1和2中提供的布局制备碱性磷酸酶标准品（AS），空白对照（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25μL试剂代替50μL。

1.2向碱性磷酸酶标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入50μL碱性磷酸酶工作溶液，使总碱性磷酸酶测定体积为100μL/孔。对于384孔板，在每个孔中加入25μL碱性磷酸酶工作溶液，总体积为50μL/孔。

1.3在室温下孵育反应30至60分钟，避光。

1.4将50μL测定缓冲液（组分D）加入碱性磷酸酶标准品，空白对照和测试样品的每个孔中，用测定反应混合物使总碱性磷酸酶测定体积为150μL/孔。对于384孔板，向每个孔中加入25μL测定缓冲液（组分D），总体积为75μL/孔。

1.5在室温下孵育反应10至30分钟，避光。

1.6用标准发光板读数器监测发光增加。

 

2.在细胞中进行碱性磷酸酶测定：

2.1根据需要处理细胞。

2.2从细胞板中完全除去生长培养基。 注意：由于生长培养基与磷酸酶底物的干扰，重要的是从细胞板中完全除去生长培养基。

2.3用5mL蒸馏水将1mL稀释的5mL碱性磷酸酶工作溶液稀释。

2.4将100μL（96孔板）或50μL（384孔板）的1：1稀释的碱性磷酸酶工作溶液加入细胞孔中。

2.5将反应在所需温度下孵育30至60分钟，避光。

2.6将50μL（96孔板）或25μL（384孔板）的测定缓冲液（组分D）加入含有工作溶液的细胞孔中。

2.7在室温下孵育反应10至30分钟，避光。

2.8用标准发光板读数器监测发光增加。

 

参考文献

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说明书
Amplite 碱性磷酸酶检测试剂盒 生物发光法 .pdf