Amplite 硫醇快速定量试剂盒 比色法 货号5529-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Amplite 硫醇快速定量试剂盒 比色法

Amplite 硫醇快速定量试剂盒 比色法

Amplite 硫醇快速定量试剂盒 比色法     货号5529 货号 5529 存储条件 Multiple
规格 2 Tests 价格 2604
Ex (nm) 680 Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 硫醇快速定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于硫醇定量的试剂盒,具有马来酰亚胺基团的各种交联剂广泛用于将蛋白质与蛋白质或蛋白质交联至其他生物分子。马来酰亚胺交联技术的关键点是与单一蛋白质或抗体连接的马来酰亚胺的定量。马来酰亚胺可以在302nm下通过分光光度法直接测定。然而,620M-1cm-1的小消光系数使得该测定不敏感,并且该测定由于在相同波长下的蛋白质吸光度而进一步复杂化。 AAT Bioquest的Amplite 快速比色马来酰亚胺定量试剂盒使用我们专有的马来酰亚胺传感器Maleimide Blue ,在~780nm处具有最大吸光度,可快速准确地量化马来酰亚胺。该测定的原理是马来酰亚胺蓝 与马来酰亚胺连接的样品反应,并且所得产物通过单个旋转柱以除去过量的传感器。测量纯化产物的吸收光谱,并且可以从780nm和280nm(对于蛋白质)或260nm(对于寡核苷酸和核酸)的吸光度比计算马来酰亚胺与蛋白质的比率。这种Amplite 快速马来酰亚胺定量试剂盒可在传统的比色皿,NanoDrop 分光光度计或方便的96孔吸光板读数器中进行,带有UV透明板。该试剂盒已广泛用于从蛋白质,寡核苷酸和核酸样品中快速定量马来酰亚胺基团。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 硫醇快速定量试剂盒。

 

适用仪器


分光光度计  
吸收: 250nm-750nm
推荐孔板: 比色皿
光吸收酶标仪  
吸收: 280nm and 680nm
推荐孔板: 透明底板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备GSH工作溶液(50μL)
2.添加GSH标准品或测试样品(50μL)
3.在室温下孵育10至60分钟
4.监测Ex / Em = 490/525 nm处的荧光增加(截止= 515 nm)

 

溶液配制

1.储备溶液配制

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1 GSH标准溶液(1 mM):
将200μLddH2 O加入到GSH标准品(组分C)的小瓶中以制备1mM(1nmol /μL)GSH标准溶液。

1.2 Thiolite Green原液(100X):
将100μLDMSO(组分D)加入到Thiolite Green(组分A)的小瓶中以制备100X Thiolite Green原液。

 

2.标准溶液配制
将30μL的1mM(1nmol /μL)GSH标准溶液加入到970μL的测定缓冲液(组分B)中以产生30μM(30pmol /μL)GSH标准溶液。 取30μM(30 pmol /μL)GSH标准溶液,进行1:3连续稀释,得到用分析缓冲液(组分B)连续稀释的GSH标准品(SD7-SD1)。 注意:稀释的GSH标准溶液不稳定。 在4小时内使用。

 

3.工作溶液配制

将50μL100XThiolite Green原液加入5 mL分析缓冲液(组分B)中,充分混合,制成GSH工作溶液。 注意:这种GSH工作溶液足以容纳一个96孔板。 在室温下不稳定,应在2小时内及时使用。 避免暴露在光线下。 注意:或者,可以通过按比例添加含有分析缓冲液(组分B)的100X Thiolite Green原液来制备GSH工作溶液。

 

操作步骤

表1.实心黑色96孔微孔板中GSH标准品和测试样品的布局。 SD = GSH标准品(SD1  –  SD7,0.014至10μM); BL =空白对照; TS =测试样品

BL BL TS TS
SD1 SD1
SD2 SD2
SD3 SD3    
SD4 SD4    
SD5 SD5    
SD6 SD6    
SD7 SD7    

 

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
SD1-SD7 50ul 连续稀释液 (0.014 to 10 µM)
BL 50ul 分析缓冲液
TS 50ul 测试样本

1.根据表1和2中提供的布局制备GSH标准品(SD),空白对照品(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25μL试剂代替50μL。 注意:根据需要处理细胞或组织样本。

2.向GSH标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入50μLGSH工作溶液,使总测定体积为100μL/孔。 对于384孔板,在每个孔中加入25μLGSH工作溶液,总体积为50μL/孔。

3.在室温下孵育反应10至60分钟,避光。

4.用荧光酶标仪在Ex / Em = 490 / 525nm(截止= 515nm)下监测荧光增加。

 

参考文献

Activation of transcription factors in human bronchial epithelial cells exposed to aqueous extracts of mainstream cigarette smoke in vitro
Authors: Takashi Sekine, Tadashi Hirata, Toshiki Mine, Yasuo Fukano
Journal: Toxicology mechanisms and methods (2016): 22–31

说明书
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Thiolite Green硫醇化合物绿色荧光探针 货号21508-AAT Bioquest荧光染料

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Thiolite Green硫醇化合物绿色荧光探针

Thiolite Green硫醇化合物绿色荧光探针

Thiolite  Green硫醇化合物绿色荧光探针    货号21508 货号 21508 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 5 mg 价格 3924
Ex (nm) 510 Em (nm) 525
分子量 ~400 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

Thiolite  Green硫醇化合物绿色荧光探针是美国AAT Bioquest生产的荧光探针,Thiolite Green是用于测量硫醇化合物的最灵敏的荧光探针之一。与硫醇化合物(例如半胱氨酸)反应时,会生成绿色荧光加合物。它可用于定量蛋白质上的半胱氨酸数量。我们用它来荧光测量谷胱甘肽。与含硫醇的化合物反应后,其荧光增强> 200倍。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Thiolite  Green硫醇化合物绿色荧光探针。 

点击查看光谱

产品说明书

操作步骤

1.准备Thiolite Green 工作溶液:

1.1在高品质无水DMSO中准备10至25 mM的Thiolite Green 储备溶液。储备溶液应及时使用;任何剩余的溶液均需等分并冷冻在-20℃。

注意:未使用的Thiolite Green储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在-20oC下避光保存。

1.2准备一个2X Thiolite 绿色 工作溶液:在实验的当天,要么溶解Thiolite 绿色 在DMSO或解冻的等分试样Thiolite 绿色 原液至室温。在pH值为20的20 mM Hepes缓冲液或您选择的缓冲液中,制备终浓度为100至250 µM的2X工作溶液,建议使用终浓度为50至100 µM的Thiolite Green 来测量硫醇溶液浓度。

 

2.在上清液中进行GSH分析:

2.1向GSH 标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入50 µL 2X Thiolite Green 工作溶液(来自步骤1.2),使GSH 测定总体积为100 µL /孔。

注意:对于384孔板,将25 µL样品和25 µL GSH反应混合物加到每个孔中。

2.2在避光的条件下,将反应在室温下孵育10至60分钟。

2.3用荧光板读数器在Ex / Em = 490/525 nm处监测荧光的增加。

2.4使用空白孔(仅使用测定缓冲液)中的荧光作为对照,并通过硫醇反应从这些孔的值中减去。

 

参考文献

Gas Chromatography/Mass Spectrometry-Based Metabolomic Profiling Reveals Alterations in Mouse Plasma and Liver in Response to Fava Beans
Authors: Man Xiao, Guankui Du, Guobing Zhong, Dongjing Yan, Huazong Zeng, Wangwei Cai
Journal: PloS one (2016): e0151103

Virus-like particles with removable cyclodextrins enable glutathione-triggered drug release in cells
Authors: Kenichi Niikura, Naotoshi Sugimura, Yusuke Musashi, Shintaro Mikuni, Yasutaka Matsuo, Shintaro Kobayashi, Keita Nagakawa, Shuko Takahara, Chie Takeuchi, Hirofumi Sawa
Journal: Molecular biosystems (2013): 501–507

说明书
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Amplite 硫醇定量试剂盒(荧光法)绿色荧光 货号5524-AAT Bioquest荧光染料

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Amplite 硫醇定量试剂盒(荧光法)绿色荧光

Amplite 硫醇定量试剂盒(荧光法)绿色荧光

Amplite 硫醇定量试剂盒(荧光法)绿色荧光    货号5524 货号 5524 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 2604
Ex (nm) 510 Em (nm) 525
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 硫醇定量试剂盒(荧光法)绿色荧光是美国AAT Bioquest生产的用于硫醇定量的试剂盒,在许多生物系统中,检测和定量游离的硫醇(例如游离半胱氨酸、谷胱甘肽和蛋白质中的半胱氨酸残基)是生物学流程和事件研究中一项非常必要的任务。检测生物样品中减少的(GSH)和氧化的谷胱甘肽是评估细胞和组织中氧化还原作用和解毒作用的重要指标,这与保护谷胱甘肽的抗氧化作用和游离的自由基所介导的细胞损伤也有密切的关系。目前可定量检测生物系统中硫醇的试剂和试剂盒很少,并且在为数不多的商业化硫醇检测试剂盒中存在灵敏度较低、操作较冗长等缺点。Amplite 硫醇荧光法定量分析试剂盒 *绿色荧光* 提供超强灵敏度的硫醇(无论是小分子还是蛋白质中的硫醇)定量检测方案。本试剂盒使用一种本身不具有荧光的染料,该染料与硫羟基反应后会产生强烈的绿色荧光。本试剂盒提供高灵敏度的,一步荧光测定法,该法能够检测低至100 ul 分析体积(10 nM浓度)中半胱氨酸或者GSH中1pmol的硫醇。这项检测方案快捷且稳定,可以方便的用于96或者384微孔板分析,并且容易进行自动化分析,其Ex(吸收最大峰)/Em(最大发射峰) = 490 nm/520 nm。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 硫醇定量试剂盒(荧光法)绿色荧光。 

点击查看光谱 

 

适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 490nm
发射: 525nm
截止: 515nm
推荐孔板: 纯黑色

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备GSH工作溶液(50μL)
2.添加GSH标准品或测试样品(50μL)
3.在室温下孵育10至60分钟
4.监测Ex / Em = 490/525 nm处的荧光增加(截止= 515 nm)

 

溶液配制

1.储备溶液配制

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1 GSH标准溶液(1 mM):
将200μLddH2 O加入到GSH标准品(组分C)的小瓶中以制备1mM(1nmol /μL)GSH标准溶液。

1.2 Thiolite Green原液(100X):
将100μLDMSO(组分D)加入到Thiolite Green(组分A)的小瓶中以制备100X Thiolite Green原液。

 

2.标准溶液配制
将30μL的1mM(1nmol /μL)GSH标准溶液加入到970μL的测定缓冲液(组分B)中以产生30μM(30pmol /μL)GSH标准溶液。 取30μM(30 pmol /μL)GSH标准溶液,进行1:3连续稀释,得到用分析缓冲液(组分B)连续稀释的GSH标准品(SD7-SD1)。 注意:稀释的GSH标准溶液不稳定。 在4小时内使用。

 

3.工作溶液配制

将50μL100XThiolite Green原液加入5 mL分析缓冲液(组分B)中,充分混合,制成GSH工作溶液。 注意:这种GSH工作溶液足以容纳一个96孔板。 在室温下不稳定,应在2小时内及时使用。 避免暴露在光线下。 注意:或者,可以通过按比例添加含有分析缓冲液(组分B)的100X Thiolite Green原液来制备GSH工作溶液。

 

操作步骤

表1.实心黑色96孔微孔板中GSH标准品和测试样品的布局。 SD = GSH标准品(SD1  –  SD7,0.014至10μM); BL =空白对照; TS =测试样品

BL BL TS TS
SD1 SD1
SD2 SD2
SD3 SD3
SD4 SD4
SD5 SD5
SD6 SD6
SD7 SD7

 

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
SD1-SD7 50ul 连续稀释液(0.014至10μM)
BL 50ul 分析缓冲液
TS 50ul 测试样本

1.根据表1和2中提供的布局制备GSH标准品(SD),空白对照品(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25μL试剂代替50μL。 注意:根据需要处理细胞或组织样本。

2.向GSH标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入50μLGSH工作溶液,使总测定体积为100μL/孔。 对于384孔板,在每个孔中加入25μLGSH工作溶液,总体积为50μL/孔。

3.在室温下孵育反应10至60分钟,避光。

4.用荧光酶标仪在Ex / Em = 490 / 525nm(截止= 515nm)下监测荧光增加。

 

 

参考文献

Improving Payload Capacity and Anti-Tumor Efficacy of Mesenchymal Stem Cells Using TAT Peptide Functionalized Polymeric Nanoparticles
Authors: Gopikrishna Moku, Buddhadev Layek, Lana Trautman, Samuel Putnam, Jayanth Panyam, Swayam Prabha
Journal: Cancers (2019): 491

Perlecan-targeted nanoparticles for drug delivery to triple-negative breast cancer
Authors: Vidhi Khanna, Stephen Kalscheuer, Ameya Kirtane, Wenqui Zhang, Jayanth Panyam
Journal: Future Drug Discovery (2019)

Activation of transcription factors in human bronchial epithelial cells exposed to aqueous extracts of mainstream cigarette smoke in vitro
Authors: Takashi Sekine, Tadashi Hirata, Toshiki Mine, Yasuo Fukano
Journal: Toxicology mechanisms and methods (2016): 22–31

说明书
Amplite 硫醇定量试剂盒(荧光法)绿色荧光.pdf

Amplite 硫醇快速定量试剂盒(荧光法)绿色荧光 货号5528-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Amplite 硫醇快速定量试剂盒(荧光法)绿色荧光

Amplite 硫醇快速定量试剂盒(荧光法)绿色荧光

Amplite 硫醇快速定量试剂盒(荧光法)绿色荧光    货号5528 货号 5528 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 2604
Ex (nm) 510 Em (nm) 524
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 硫醇快速定量试剂盒(荧光法)绿色荧光是美国AAT Bioquest生产的用于硫醇定量的试剂盒,具有马来酰亚胺基团的各种交联剂广泛用于将蛋白质与蛋白质或蛋白质交联至其他生物分子。马来酰亚胺交联技术的关键点是与单一蛋白质或抗体连接的马来酰亚胺的定量。马来酰亚胺可以在302nm下通过分光光度法直接测定。然而,620M-1cm-1的小消光系数使得该测定不敏感,并且该测定由于在相同波长下的蛋白质吸光度而进一步复杂化。 AAT Bioquest的Amplite 快速比色马来酰亚胺定量试剂盒使用我们专有的马来酰亚胺传感器Maleimide Blue ,在~780nm处具有最大吸光度,可快速准确地量化马来酰亚胺。该测定的原理是马来酰亚胺蓝 与马来酰亚胺连接的样品反应,并且所得产物通过单个旋转柱以除去过量的传感器。测量纯化产物的吸收光谱,并且可以从780nm和280nm(对于蛋白质)或260nm(对于寡核苷酸和核酸)的吸光度比计算马来酰亚胺与蛋白质的比率。这种Amplite 快速马来酰亚胺定量试剂盒可在传统的比色皿,NanoDrop 分光光度计或方便的96孔吸光板读数器中进行,带有UV透明板。该试剂盒已广泛用于从蛋白质,寡核苷酸和核酸样品中快速定量马来酰亚胺基团。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 硫醇快速定量试剂盒(荧光法)绿色荧光。

 

适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 490nm
发射: 525nm
截止: 515nm
推荐孔板: 纯黑色

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备GSH工作溶液(50μL)
2.添加GSH标准品或测试样品(50μL)
3.在室温下孵育10至60分钟
4.监测Ex / Em = 490/525 nm处的荧光增加(截止= 515 nm)

 

溶液配制

1.储备溶液配制

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1 GSH标准溶液(1 mM):
将200μLddH2 O加入到GSH标准品(组分C)的小瓶中以制备1mM(1nmol /μL)GSH标准溶液。

1.2 Thiolite Green原液(100X):
将100μLDMSO(组分D)加入到Thiolite Green(组分A)的小瓶中以制备100X Thiolite Green原液。

 

2.标准溶液配制
将30μL的1mM(1nmol /μL)GSH标准溶液加入到970μL的测定缓冲液(组分B)中以产生30μM(30pmol /μL)GSH标准溶液。 取30μM(30 pmol /μL)GSH标准溶液,进行1:3连续稀释,得到用分析缓冲液(组分B)连续稀释的GSH标准品(SD7-SD1)。 注意:稀释的GSH标准溶液不稳定。 在4小时内使用。

 

3.工作溶液配制

将50μL100XThiolite Green原液加入5 mL分析缓冲液(组分B)中,充分混合,制成GSH工作溶液。 注意:这种GSH工作溶液足以容纳一个96孔板。 在室温下不稳定,应在2小时内及时使用。 避免暴露在光线下。 注意:或者,可以通过按比例添加含有分析缓冲液(组分B)的100X Thiolite Green原液来制备GSH工作溶液。

 

操作步骤

表1.实心黑色96孔微孔板中GSH标准品和测试样品的布局。 SD = GSH标准品(SD1  –  SD7,0.014至10μM); BL =空白对照; TS =测试样品

BL BL TS TS
SD1 SD1
SD2 SD2
SD3 SD3    
SD4 SD4    
SD5 SD5    
SD6 SD6    
SD7 SD7    

 

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
SD1-SD7 50ul 连续稀释液 (0.014 to 10 µM)
BL 50ul 分析缓冲液
TS 50ul 测试样本

1.根据表1和2中提供的布局制备GSH标准品(SD),空白对照品(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25μL试剂代替50μL。 注意:根据需要处理细胞或组织样本。

2.向GSH标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入50μLGSH工作溶液,使总测定体积为100μL/孔。 对于384孔板,在每个孔中加入25μLGSH工作溶液,总体积为50μL/孔。

3.在室温下孵育反应10至60分钟,避光。

4.用荧光酶标仪在Ex / Em = 490 / 525nm(截止= 515nm)下监测荧光增加。

 

参考文献

Activation of transcription factors in human bronchial epithelial cells exposed to aqueous extracts of mainstream cigarette smoke in vitro
Authors: Takashi Sekine, Tadashi Hirata, Toshiki Mine, Yasuo Fukano
Journal: Toxicology mechanisms and methods (2016): 22–31

说明书
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