Cell Navigator 线粒体标记试剂盒 橙色荧光 405nm激发

	货号	22673	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	500 Assays	价格	2604
	Ex (nm)	425	Em (nm)	522
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Cell Navigator 线粒体标记试剂盒是一套荧光成像工具，用于标记细胞器细胞器，如膜，溶酶体，线粒体和细胞核等。活细胞隔室的选择性标记为研究细胞事件提供了一种强有力的方法。这个特定的试剂盒旨在标记蓝色荧光的活细胞线粒体。该试剂盒使用专有染料，可选择性累积在线粒体中，可能是线粒体膜电位梯度。线粒体指示剂是一种疏水性化合物，可以很容易地渗透完整的活细胞，并在进入细胞后被困在线粒体中。该荧光线粒体指示剂长时间保留在线粒体中，因为该指示剂携带细胞保留组。这一关键特征显着提高了染色效率。它可以很容易地适用于各种荧光平台，如微孔板分析，免疫细胞化学和流式细胞术。它适用于多种研究，包括细胞粘附，趋化性，多药耐药性，细胞活力，细胞凋亡和细胞毒性。该试剂盒为所有重要组分提供了优化的细胞标记方案。它适用于增殖和非增殖细胞，可用于悬浮细胞和贴壁细胞。Cell Navigator 线粒体标记试剂盒是美国AAT Bioquest研发的产品。

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产品说明书

样品分析

1.准备线粒体染色溶液：

1.1将所有组件温度调至室温。

1.2通过将20μLMitolite Orange（组分A）稀释到10mL活细胞染色缓冲液（组分B）中制备染料工作溶液

注1：对于一个96孔板，20μL的500X Mitolite Orange（组分A）就足够了。在≤-20ºC下等分并储存未使用的500X Mitolite Orange。避光，避免反复冻融循环。

注2：荧光线粒体指示剂的最佳浓度根据具体应用而变化。可以根据特定细胞类型和细胞或组织对探针的渗透性来修改染色条件。

2.准备和染色细胞：

2.1对于粘附细胞：在96孔黑色墙壁/透明底板上或在装有适当培养基的培养皿内的盖玻片上培养细胞。当细胞达到所需的汇合时，加入等体积（例如对于96孔板为100μL，对于384孔板为25μL）的染料加工溶液（来自步骤1.2）。将细胞在37ºC，5％CO₂培养箱中孵育30分钟至2小时。用Hanks和20mM Hepes缓冲液（HH缓冲液）或您选择的缓冲液（例如浓度为1：1的生长培养基缓冲液）替换染料上样溶液。

注意：如果细胞看起来没有充分染色，建议增加标记浓度或孵育时间以使染料积累。

2.2对于悬浮细胞：以1000rpm离心细胞5分钟以获得细胞沉淀并吸出上清液。在预热（37℃）生长培养基中轻轻重悬细胞沉淀，并加入等体积的染料加工溶液（来自步骤1.2）。将细胞在37ºC，5％CO₂培养箱中孵育30分钟至2小时。用Hanks和20mM Hepes缓冲液（HH缓冲液）或您选择的缓冲液（例如浓度为1：1的生长培养基缓冲液）替换染料上样溶液。

注1：如果细胞看起来没有充分染色，建议增加标记浓度或培养时间以使染料积累。

注2：悬浮细胞可以附着在用BD Cell-Tak®（BD Biosciences）处理过的盖玻片上，并作为粘附细胞染色（见步骤2.1）。

参考文献

Co-delivery of VP-16 and Bcl-2-targeted antisense on PEG-grafted oMWCNTs for synergistic in vitro anti-cancer effects in non-small and small cell lung cancer
Authors: Zbynek Heger, Hana Polanska, Sona Krizkova, Jan Balvan, Martina Raudenska, Simona Dostalova, Amitava Moulick, Michal Masarik, Vojtech Adam
Journal: Colloids and Surfaces B: Biointerfaces (2017): 131–140

Inhibition of heme oxygenase-1 enhances the chemosensitivity of laryngeal squamous cell cancer Hep-2 cells to cisplatin
Authors: Xin Lv, Dong-mei Song, Ying-hao Niu, Bao-shan Wang
Journal: Apoptosis (2016): 489–501

Effective two-photon excited photodynamic therapy of xenograft tumors sensitized by water-soluble bis (arylidene) cycloalkanone photosensitizers
Authors: Qianli Zou, Hongyou Zhao, Yuxia Zhao, Yanyan Fang, Defu Chen, Jie Ren, Xiaopu Wang, Ying Wang, Ying Gu, Feipeng Wu
Journal: Journal of medicinal chemistry (2015): 7949–7958

Melatonin promotes adipogenesis and mitochondrial biogenesis in 3T3-L1 preadipocytes
Authors: Hisashi Kato, Goki Tanaka, Shinya Masuda, Junetsu Ogasawara, Takuya Sakurai, Takako Kizaki, Hideki Ohno, Tetsuya Izawa
Journal: Journal of Pineal Research (2015): 267–275

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	货号	1120	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
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	Ex (nm)	553	Em (nm)	565
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

ReadiLink mFluor 570 蛋白标记试剂盒提供了一种以微观方式标记抗体的最便捷方法。该试剂盒仅需要两个简单的混合步骤而无需纯化步骤。 试剂盒中使用的iFluor 和mFluor 染料的琥珀酰亚胺酯（SE）显示出与蛋白质的脂族胺的良好反应性和选择性，并形成羧酰胺键，其与天然肽键相同且稳定。 iFluor 和mFluor-抗体缀合物可用于免疫荧光染色，荧光原位杂交，流式细胞术和其他生物学应用。 每个ReadiLink 抗体标记试剂盒都提供了进行两次偶联反应（2×50μg蛋白质）的所有必需成分。 每个试剂盒可用于标记50-100μg单克隆，多克隆抗体或其他蛋白质（> 10 kDa），只需两个简单的混合步骤。抗体标记试剂盒ReadiLink Rapid mFluor 570是美国AAT Bioquest研发的产品。

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产品说明书

标准操作规程（标记50μg蛋白质）

      将所有组分加热并在打开前将样品瓶短暂离心，并在开始结合前准备所需的溶液。 以下SOP是标记抗HDAC IgG抗体的实例。

1.准备蛋白质溶液（溶液A）：

为了标记50g蛋白质（假设目标蛋白质浓度为1mg / mL），将5L（总反应体积的10％）的反应缓冲液（组分B）与50L目标蛋白质溶液混合。

注1.如果您的蛋白质浓度不同，请相应调整蛋白质体积，使~50μg蛋白质可用于标记反应。

注2：为了标记100g蛋白质（假设目标蛋白质浓度为1mg / mL），将10μL（总反应体积的10％）反应缓冲液（组分B）与100μL目标蛋白质溶液混合。

注3：蛋白质应溶解于pH7.2-7.4的1X磷酸盐缓冲盐水（PBS）中;如果蛋白质溶解在甘氨酸缓冲液中，必须用1X PBS（pH 7.2-7.4）透析，或使用Amicon Ultra-0.5超滤管，Ultracel-10超滤膜，10 kDa（来自Millipore的cat＃UFC501008）去除用于蛋白质沉淀的游离胺或铵盐（如硫酸铵和乙酸铵）。

注4：不纯的抗体、稳定的牛血清蛋白（BSA）抗体或明胶不会被很好的标记。

注5：如果蛋白质浓度小于1 mg / mL，则结合效率会降低。为获得最佳标记效率，建议最终蛋白质浓度范围为1-2 mg / mL。

2.运行结合反应：

2.1将蛋白质溶液（溶液A）加入到一瓶标记染料（组分A）中，通过反复移液几次将其混合均匀，或将小瓶涡旋几秒钟。

注意：如果要标记100 µg蛋白质，请使用两个小瓶（组分A），将100 µg蛋白质分成2 x 50 µg蛋白质，并使每个50 µg蛋白质与一小瓶标记染料反应，然后合并两个小瓶，用于下一步。

2.2将缀合反应混合物在室温下保持30-60分钟。

注意：如果需要，可以旋转或摇动缀合反应混合物更长的时间。

3.停止共轭反应：

3.1加入5 µL TQ染色淬灭缓冲液（组分C）（对于50 µg蛋白质）或加入10 µL TQ染色淬灭缓冲液（组分C）（对于100 µg蛋白质）。加入的缓冲液是总反应体积的10％。

3.2在室温下孵育10分钟。

3.3标记的蛋白质（抗体）完成。

参考文献

Deep Sequencing Analysis of the Eha-Regulated Transcriptome of Edwardsiella tarda Following Acidification
Authors: D Gao, N Liu, Y Li, Y Zhang, G Liu
Journal: Metabolomics (Los Angel) (2017): 2153–0769

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