酶显色底物ADP-ribose-pNP 货号11700-AAT Bioquest荧光染料

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酶显色底物ADP-ribose-pNP

酶显色底物ADP-ribose-pNP

酶显色底物ADP-ribose-pNP    货号11700 货号 11700 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 2604
Ex (nm) 405 Em (nm)
分子量 724.37 溶剂 Water
产品详细介绍

简要概述

酶显色底物ADP-ribose-pNP是美国AAT Bioquest生产的用于过氧化物酶的试剂,ADP-核糖-pNP是用来评估多聚ADP-核糖聚合酶(PARP)活性的一种显色底物。在405nm处可检测释放的p-硝基酚吸光度。标准曲线的斜率通常用来转换产生的ADP-核糖-pNP比色底物的的吸光度。使用ADP-核糖-pNP作为显色底物,PARP-1具有最大Km和Vmax数值(分别为151 uM和1.30nmolmin-1mg-1),其次是Tankyrase-1(82uM和18pmolmin-1mg-l)和VPARP(46uM和2 pmolmin-1mg-l)。显色底物通常用来决定PARP-1,tankyrase-1和VPARP 的动力学参数,然后筛选PARP-1,tankyrase-1和VPARP小分子抑制剂。由于ADP-核糖-pNP连续实验分析比标准的非连续PARP试验更有优势,因此其可用于高通量筛选PARP-1,tankyrase-1和VPARP的活性以及相关抑制剂。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的酶显色底物ADP-ribose-pNP。 

 

适用仪器


光吸收酶标仪  
吸收: 405nm
推荐孔板: 白色孔板

产品说明书

样品实验方案 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1 ADP-核糖-pNP原液:
在H2O中制备5-10mM的储备溶液。 注意:应立即使用原液。

 

2.工作溶液

ADP-核糖-pNP工作溶液:
通过用测定缓冲液(50mM Tris,10mM MgCl 2,pH 8.0)稀释储备溶液来制备0.25mM测定溶液。

 

样品操作步骤

1.将0.01mL /孔的样品溶液加入0.09mL /孔测定溶液中,使96孔透明板中的最终体积为0.1mL。

2.使用吸光度酶标仪在405nm处监测平板。

 

参考文献

A colorimetric substrate for poly(ADP-ribose) polymerase-1, VPARP, and tankyrase-1
Authors: Nottbohm AC, Dothager RS, Putt KS, Hoyt MT, Hergenrother PJ.
Journal: Angew Chem Int Ed Engl (2007): 2066

Pharmacological identification of P2X1, P2X4 and P2X7 nucleotide receptors in the smooth muscles of human umbilical cord and chorionic blood vessels
Authors: Valdecantos P, Briones R, Moya P, Germain A, Huidobro-Toro JP.
Journal: Placenta (2003): 17

Poly(ADP-ribose) polymerase as a key player in excitotoxicity and post-ischemic brain damage
Authors: Meli E, Pangallo M, Baronti R, Chiarugi A, Cozzi A, Pellegrini-Giampietro DE, Moroni F.
Journal: Toxicol Lett (2003): 153

Interactions of nucleotide cofactors with the Escherichia coli replication factor DnaC protein
Authors: Galletto R, Rajendran S, Bujalowski W.
Journal: Biochemistry (2000): 12959

Kinetic mechanism of nucleotide cofactor binding to Escherichia coli replicative helicase DnaB protein. stopped-flow kinetic studies using fluorescent, ribose-, and base-modified nucleotide analogues
Authors: Bujalowski W, Jezewska MJ.
Journal: Biochemistry (2000): 2106

Effects of caffeine and adenine nucleotides on Ca2+ release by the sarcoplasmic reticulum in saponin-permeabilized frog skeletal muscle fibres
Authors: Duke AM, Steele DS.
Journal: J Physiol (1998): 43

Adenine nucleotides regulate ADP-ribosylation of membrane-bound actin and actin-binding to membranes
Authors: Schroeder P, Just I, Aktories K.
Journal: Eur J Cell Biol (1994): 3

Trimeric G-proteins of the trans-Golgi network are involved in the formation of constitutive secretory vesicles and immature secretory granules
Authors: Barr FA, Leyte A, Mollner S, Pfeuffer T, Tooze SA, Huttner WB.
Journal: FEBS Lett (1991): 239

Inhibition and labeling of the Ca2(+)-ATPase from sarcoplasmic reticulum by periodate oxidized ATP
Authors: Mignaco J, Scofano HM, Barrabin H.
Journal: Biochim Biophys Acta (1990): 305

说明书
酶显色底物ADP-ribose-pNP.pdf

酶显色底物ADP-ribose-pNP 货号11700-AAT Bioquest荧光染料

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酶显色底物ADP-ribose-pNP

酶显色底物ADP-ribose-pNP

酶显色底物ADP-ribose-pNP    货号11700 货号 11700 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 2604
Ex (nm) 405 Em (nm)
分子量 724.37 溶剂 Water
产品详细介绍

简要概述

酶显色底物ADP-ribose-pNP是美国AAT Bioquest生产的用于过氧化物酶的试剂,ADP-核糖-pNP是用来评估多聚ADP-核糖聚合酶(PARP)活性的一种显色底物。在405nm处可检测释放的p-硝基酚吸光度。标准曲线的斜率通常用来转换产生的ADP-核糖-pNP比色底物的的吸光度。使用ADP-核糖-pNP作为显色底物,PARP-1具有最大Km和Vmax数值(分别为151 uM和1.30nmolmin-1mg-1),其次是Tankyrase-1(82uM和18pmolmin-1mg-l)和VPARP(46uM和2 pmolmin-1mg-l)。显色底物通常用来决定PARP-1,tankyrase-1和VPARP 的动力学参数,然后筛选PARP-1,tankyrase-1和VPARP小分子抑制剂。由于ADP-核糖-pNP连续实验分析比标准的非连续PARP试验更有优势,因此其可用于高通量筛选PARP-1,tankyrase-1和VPARP的活性以及相关抑制剂。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的酶显色底物ADP-ribose-pNP。 

 

适用仪器


光吸收酶标仪  
吸收: 405nm
推荐孔板: 白色孔板

产品说明书

样品实验方案 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1 ADP-核糖-pNP原液:
在H2O中制备5-10mM的储备溶液。 注意:应立即使用原液。

 

2.工作溶液

ADP-核糖-pNP工作溶液:
通过用测定缓冲液(50mM Tris,10mM MgCl 2,pH 8.0)稀释储备溶液来制备0.25mM测定溶液。

 

样品操作步骤

1.将0.01mL /孔的样品溶液加入0.09mL /孔测定溶液中,使96孔透明板中的最终体积为0.1mL。

2.使用吸光度酶标仪在405nm处监测平板。

 

参考文献

A colorimetric substrate for poly(ADP-ribose) polymerase-1, VPARP, and tankyrase-1
Authors: Nottbohm AC, Dothager RS, Putt KS, Hoyt MT, Hergenrother PJ.
Journal: Angew Chem Int Ed Engl (2007): 2066

Pharmacological identification of P2X1, P2X4 and P2X7 nucleotide receptors in the smooth muscles of human umbilical cord and chorionic blood vessels
Authors: Valdecantos P, Briones R, Moya P, Germain A, Huidobro-Toro JP.
Journal: Placenta (2003): 17

Poly(ADP-ribose) polymerase as a key player in excitotoxicity and post-ischemic brain damage
Authors: Meli E, Pangallo M, Baronti R, Chiarugi A, Cozzi A, Pellegrini-Giampietro DE, Moroni F.
Journal: Toxicol Lett (2003): 153

Interactions of nucleotide cofactors with the Escherichia coli replication factor DnaC protein
Authors: Galletto R, Rajendran S, Bujalowski W.
Journal: Biochemistry (2000): 12959

Kinetic mechanism of nucleotide cofactor binding to Escherichia coli replicative helicase DnaB protein. stopped-flow kinetic studies using fluorescent, ribose-, and base-modified nucleotide analogues
Authors: Bujalowski W, Jezewska MJ.
Journal: Biochemistry (2000): 2106

Effects of caffeine and adenine nucleotides on Ca2+ release by the sarcoplasmic reticulum in saponin-permeabilized frog skeletal muscle fibres
Authors: Duke AM, Steele DS.
Journal: J Physiol (1998): 43

Adenine nucleotides regulate ADP-ribosylation of membrane-bound actin and actin-binding to membranes
Authors: Schroeder P, Just I, Aktories K.
Journal: Eur J Cell Biol (1994): 3

Trimeric G-proteins of the trans-Golgi network are involved in the formation of constitutive secretory vesicles and immature secretory granules
Authors: Barr FA, Leyte A, Mollner S, Pfeuffer T, Tooze SA, Huttner WB.
Journal: FEBS Lett (1991): 239

Inhibition and labeling of the Ca2(+)-ATPase from sarcoplasmic reticulum by periodate oxidized ATP
Authors: Mignaco J, Scofano HM, Barrabin H.
Journal: Biochim Biophys Acta (1990): 305

说明书
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胱天蛋白酶Caspase 3/7显色底物 Z-DEVD-pNA 货号13422-AAT Bioquest荧光染料

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胱天蛋白酶Caspase 3/7显色底物 Z-DEVD-pNA

胱天蛋白酶Caspase 3/7显色底物 Z-DEVD-pNA

胱天蛋白酶Caspase 3/7显色底物 Z-DEVD-pNA    货号13422 货号 13422 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 5 mg 价格 1272
Ex (nm) 408 Em (nm)
分子量 730.68 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

胱天蛋白酶Caspase 3/7显色底物 Z-DEVD-pNA是美国AAT Bioquest生产的荧光底物,一种含有苄氧羰酰基(Z)的Caspase 3显色底物,一种蛋白酶,当细胞暴露在细胞凋亡的条件下时具有快速催化活性;会切断多聚(ADP-ribose)聚合酶。这种七-氨基-4氟甲基香豆素衍生物比七-氨基-4甲基香豆素衍生物具有更好的膜渗透性。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的胱天蛋白酶Caspase 3/7显色底物 Z-DEVD-pNA。

产品说明书

样品实验方案

以下说明书仅提供指南,实际应根据您的具体需求进行修改。

1.使用AMC,AFC,pNA,R110和ProRed底物的一般溶液Caspase测定

1.1在DMSO中制备10mM储备溶液。

1.2制备2X半胱天冬酶底物(50μM)测定溶液,如下所示:

50 L基质原液

100L DTT(1M)

400L EDTA(100 mM)

10mL Tris缓冲液(20mM),pH = 7.4

1.3将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤1.2)混合,并在室温下孵育溶液至少1小时。

1.4使用荧光酶标仪检测荧光,或使用吸光度酶标仪检测吸光度。

 

2.细胞Caspase检测使用细胞渗透FMK半胱天冬酶探针

2.1在DMSO中制备2-5mM储备溶液。

2.2根据需要对细胞进行处理。

2.3通过用20mM Hepes缓冲液(HHBS)稀释Hanks中的DMSO储备溶液(来自步骤2.1),制备2X可渗透的半胱天冬酶底物(20μM)测定溶液。

2.4用2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤2.3)混合等体积的处理细胞,并将细胞在37℃,5%CO 2培养箱中孵育至少1小时。

2.5用HHBS洗涤细胞至少一次。

2.6用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

3.细胞Caspase检测使用细胞渗透性FMK Caspase探针(仅适用于#13470-13476)

3.1通过向小瓶中加入50μLDMSO制备250X储备溶液。

3.2根据需要对细胞进行处理。

3.3将250 X DMSO储备溶液(来自步骤3.1)以1:250的比例(例如2 uL至500 uL细胞)添加到细胞溶液中,并将细胞在37°C,5%CO 2培养箱中孵育1 小时。

3.4用HHBS洗涤细胞至少一次。

3.5用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

参考文献

pH-Assisted surface functionalization of selenium nanoparticles with curcumin to achieve enhanced cancer chemopreventive activity
Authors: Shaoxuan Yu, Yanru Wang, Wentao Zhang, Yuhuan Zhang, Wenxin Zhu, Yingnan Liu, Daohong Zhang, Jianlong Wang
Journal: RSC Advances (2016): 72213–72223

 

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产品名称 货号
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胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物(Z-DEVD)2-R110 绿 Cat#13430

说明书
胱天蛋白酶Caspase 3/7显色底物 Z-DEVD-pNA.pdf