标签归档：凋亡

Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 红色荧光 货号22816-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 红色荧光

Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 红色荧光

Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 红色荧光 货号22816 货号 22816 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 2604
Ex (nm) 532 Em (nm) 619
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于细胞凋亡检测的试剂盒，Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具，包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些高效的检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 蓝色荧光 是通过测量Caspase 8的活性而用于细胞凋亡检测的。Caspase 8 是一种Caspase蛋白，CASP8基因所编码。在神经元变性疾病中，例如亨廷顿综合症，caspase 8扮演着重要角色。Caspase 8已被证明具有底物选择性，其肽基序为Ile-Glu-Thr-Asp (IETD)。该试剂盒使用(Ac-IETD)2- ProRed 作为荧光指示器来检测caspas-8的活性。通过caspas-8的切割 ProRed 肽产生强蓝色荧光（eX/eM = 530/620 NM）。这种特性使得试剂盒能适合于DAPI滤光器。本试剂盒提供所有必需组分和最佳操作流程。该实验结果稳定，快速且适应高通量筛选。它不仅能够定量凋亡细胞中caspas-8的活性还能筛选caspas-8的抑制剂。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒。 

点击查看光谱

 

适用仪器

荧光酶标仪  
激发： 540nm
发射： 620nm
cutoff： 610nm
推荐孔板： 黑色透明
读取模式： 顶或底读模式

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物（100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板）制备细胞
2.加入等体积的Caspase 8工作溶液（100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板）
3.在室温下孵育1小时
4.在Ex / Em = 535/620 nm（截止= 610 nm）监测荧光强度（顶部或底部读取模式）

 

储存溶液配制

        除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1. Ac-IETD-ProRed 原液（200X）：
将65μLDMSO加入到Ac-IETD-ProRed （组分A）的小瓶中并充分混合以制备200X Ac-IETD-ProRed 储备溶液。避光。

 

工作溶液配制

将50μL的200X Ac-IETD-ProRed 储备溶液加入10mL的分析缓冲液（组分B）中并充分混合以制备Caspase 8工作溶液。 避光。 注意：Caspase 8工作液不稳定，请及时使用。有关细胞样品制备的指南，请点击查看。

 

操作步骤

1.通过将10μL/孔的10X测试化合物（96孔板）或5μL/孔的5X测试化合物（384孔板）加入PBS或所需缓冲液中来处理细胞。对于空白孔（没有细胞的培养基），加入相同量的化合物缓冲液。

2.将细胞板在37℃，5％CO2培养箱中孵育所需的一段时间（对于用星形孢菌素处理的Jurkat细胞3-4小时）以诱导细胞凋亡。

3.加入100μL/孔/ 96孔或25μL/孔/ 384孔板的Caspase 8工作溶液。

4.将板在室温下孵育至少1小时，避光。注意：如果需要，在室温下加入Caspase 8工作溶液10分钟前，向选定的样品中加入1μL的1 mM Ac-IETD-CHO caspase 8抑制剂，以确认对caspase 8样活性的抑制作用。

5.在Ex / Em = 535 / 620nm（截止= 610nm）下用荧光酶标仪（顶部或底部读取模式）监测荧光强度。注意：有时，如果使用底部读取模式，底部读数可提供更好的信号与背景比，离心细胞板（特别是非粘附细胞）在800 rpm下2分钟。

 

数据分析

Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 红色荧光 货号22816

图1.使用Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒检测Jurkat细胞中的Caspase 8活性 红色荧光 。 在Costar黑壁/透明底96孔板中以相同的一天以200,000个细胞/90μL/孔接种Jurkat细胞。 用或不用1μM星形孢菌素处理细胞5小时。 加入半胱天冬酶8工作溶液（100μL/孔）并在室温下温育1小时。 使用FlexStation荧光酶标仪（Molecular Devices）在Ex / Em = 540 / 620nm（截止值= 610nm）下测量荧光强度。

 

参考文献

Angiopoietins Modulate Survival, Migration, and the Components of the Ang-Tie2 Pathway of Chronic Lymphocytic Leukaemia (CLL) Cells In Vitro
Authors: Luis Mario Aguirre Palma, Hanna Flamme, Iris Gerke, Karl-Anton Kreuzer
Journal: Cancer Microenvironment (2016): 13–26

Hypoxia regulates TRAIL sensitivity of colorectal cancer cells through mitochondrial autophagy.
Authors: Gertrud Knoll, Sebastian Bittner, Maria Kurz, Jonathan Jantsch, Martin Ehrenschwender
Journal: Oncotarget (2016)

microRNA-186 inhibits cell proliferation and induces apoptosis in human esophageal squamous cell carcinoma by targeting SKP2
Authors: Wei He, Jianfang Feng, Yan Zhang, Yuanyuan Wang, Wenqiao Zang, Guoqiang Zhao
Journal: Laboratory Investigation (2016): 317–324

Promotion of osteointegration under diabetic conditions by tantalum coating-based surface modification on 3-dimensional printed porous titanium implants
Authors: Lin Wang, Xiaofan Hu, Xiangyu Ma, Zhensheng Ma, Yang Zhang, Yizhao Lu, Xiang Li, Wei Lei, Yafei Feng
Journal: Colloids and Surfaces B: Biointerfaces (2016): 440–452

Role of delta-like ligand-4 in chemoresistance against docetaxel in MCF-7 cells
Authors: Q Wang, Y Shi, HJ Butler, J Xue, G Wang, P Duan, H Zheng
Journal: Human & Experimental Toxicology (2016): 0960327116650006

Glucose promotes cell proliferation, glucose uptake and invasion in endometrial cancer cells via AMPK/mTOR/S6 and MAPK signaling
Authors: Jianjun Han, Lu Zhang, Hui Guo, Weiya Z Wysham, Dario R Roque, Adam K Willson, Xiugui Sheng, Chunxiao Zhou, Victoria L Bae-Jump
Journal: Gynecologic oncology (2015): 668–675

IL-7 abrogates the immunosuppressive function of human double-negative T cells by activating Akt/mTOR signaling
Authors: Andrea Allgäuer, Elisabeth Schreiner, Fulvia Ferrazzi, Arif B Ekici, Armin Gerbitz, Andreas Mackensen, Simon Völkl
Journal: The Journal of Immunology (2015): 3139–3148

Insulin improves osteogenesis of titanium implants under diabetic conditions by inhibiting reactive oxygen species overproduction via the PI3K-Akt pathway
Authors: Lin Wang, Xiong Zhao, Bo-yuan Wei, Yi Liu, Xiang-yu Ma, Jian Wang, Peng-chong Cao, Yang Zhang, Ya-bo Yan, Wei Lei
Journal: Biochimie (2015): 85–93

LGL1 modulates proliferation, apoptosis, and migration of human fetal lung fibroblasts
Authors: Hui Zhang, Neil B Sweezey, Feige Kaplan
Journal: American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology (2015): L391–L402

t-BHQ Provides Protection against Lead Neurotoxicity via Nrf2/HO-1 Pathway
Authors: Fang Ye, Xiaoyi Li, Lili Li, Jing Yuan, Jun Chen
Journal: Oxidative medicine and cellular longevity (2015)

 

相关产品

产品名称 货号
Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 蓝色荧光 Cat#22812
Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 绿色荧光 Cat#22798
Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒 绿色荧光 Cat#22799

说明书
Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 红色荧光 .pdf

Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 深红色荧光 适合流式细胞检测 货号22827-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 深红色荧光 适合流式细胞检测

Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 深红色荧光 适合流式细胞检测

Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 深红色荧光 适合流式细胞检测 货号22827 货号 22827 存储条件 在2-8度冷藏保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 2604
Ex (nm) 656 Em (nm) 670
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

我们的Cell Meter 检测试剂盒是一套用于检测细胞生存力的工具，有多种参数可用于监测细胞活力。 该特定试剂盒旨在通过测量磷脂酰丝氨酸（PS）的转运来检测细胞凋亡。 在细胞凋亡中，PS转移到质膜的外部小叶。 磷脂酰丝氨酸在细胞表面的出现是细胞凋亡初始/中间阶段的普遍指标，可以在观察形态变化之前进行检测。 该试剂盒使用与PS特异性结合的荧光膜联蛋白V。 已经证明膜联蛋白V缀合物选择性结合PS。 使用带有Cy5滤波片的流式细胞仪优化了该特定的检测试剂盒，以检测细胞凋亡。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒。

点击查看光谱

 

适用仪器

流式细胞仪  
激发： 640nm激光
发射： 660/20nm滤波片
通道： APC通道

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 用测试化合物制备细胞（200 µL /样品）
  2. 添加膜联蛋白V-iFluor 647测定溶液
  3. 在室温下孵育30-60分钟
  4. 使用带有660/20 nm滤光片（APC通道）的流式细胞仪或带有Cy5滤光片组的荧光显微镜分析细胞

 

实验步骤

1.用膜联蛋白V-iFluor 647制备和孵育细胞：

1.1用测试化合物处理细胞一段时间（对于用星形孢菌素处理过的Jurkat细胞，需要4-6小时）以诱导细胞凋亡。

1.2离心细胞以获得1-5×105细胞/管。

1.3将细胞重悬于200 µL分析缓冲液（组分B）中。

1.4向细胞中加入2 µL Annexin V-iFluor 647（组分A）。

1.5避光保存，于室温下孵育30至60分钟。

1.6在使用流式细胞仪或荧光显微镜分析细胞之前，添加300 µL分析缓冲液（组分B）以增加体积。

1.7使用带有660/20 nm滤光片的流式细胞仪（APC通道）或带有Cy5滤光片组的荧光显微镜检测荧光强度。

2.通过使用流式细胞仪进行分析：

2.1使用带有660/20 nm滤光片（APC通道）的流式细胞仪定量膜联蛋白V-iFluor 647的结合物。

3.通过使用荧光显微镜进行分析：

3.1孵育后用移液管吸移细胞，用测定缓冲液冲洗1-2次，然后用测定缓冲液重悬细胞。

3.2将细胞添加到载玻片盖玻片的载玻片上。 注意：对于贴壁细胞，建议直接在盖玻片上生长细胞。 与Annexin V-iFluor 647一起孵育后，用测定缓冲液冲洗1-2次，然后将测定缓冲液加回到盖玻片上。 将玻片上的盖玻片倒置并可视化细胞。 与膜联蛋白V-iFluor 647孵育后，还可以将细胞固定在2％甲醛中，并在显微镜下观察。

3.3使用Cy5滤光片组，在荧光显微镜下用Annexin V-iFluor 647分析凋亡细胞。当碘化丙锭添加到细胞中时，通过使用TRITC通道测量细胞活力。质膜上的橙色染色表明膜联蛋白V-iFluor 647与细胞表面的PS结合。

 

参考文献

In situ polymerizable hydrogel incorporated with specific pathogen-free porcine platelet-rich plasma for the reconstruction of the corneal endothelium
Authors: Lin, Yung-Kai and Sharma, Ruchi and Ma, Hsu and Chen, Wen-Shyan and Yao, Chao-Ling
Journal: Journal of the Taiwan Institute of Chemical Engineers (2017)

Novel regulations of MEF2-A, MEF2-D, and CACNA1S in the functional incompetence of adipose-derived mesenchymal stem cells by induced indoxyl sulfate in chronic kidney disease
Authors: Do, Duyen Thi and Phan, Nam Nhut and Wang, Chih-Yang and Sun, Zhengda and Lin, Yen-Chang
Journal: Cytotechnology (2016): 2589–2604

Shear stress-induced alteration of epithelial organization in human renal tubular cells
Authors: Maggiorani, Damien and Dissard, Romain and Belloy, Marcy and Saulnier-Blache, Jean-Sébastien and Casemayou, Audrey and Ducasse, Laure and Grès, S and ra and Bellière, Julie and Caubet, Cécile and Basc and s, Jean-Loup and others
Journal: PloS one (2015): e0131416

Targeting a G-protein-coupled receptor overexpressed in endocrine tumors by magnetic nanoparticles to induce cell death
Authors: Sanchez, Claire and El Hajj Diab, Darine and Connord, Vincent and Clerc, Pascal and Meunier, Etienne and Pipy, Bernard and Payré, Bruno and Tan, Reasmey P and Gougeon, Michel and Carrey, Julian and others
Journal: Acs Nano (2014): 1350–1363

Glycogen synthase kinase-3 and Omi/HtrA2 induce annexin A2 cleavage followed by cell cycle inhibition and apoptosis
Authors: Wang CY, Lin YS, Su WC, Chen CL, Lin CF.
Journal: Mol Biol Cell (2009): 4153

Gold fluorescent annexin A5 as a novel apoptosis detection tool
Authors: Kurschus FC, Pal PP, Baumler P, Jenne DE, Wiltschi B, Budisa N.
Journal: Cytometry A (2009): 626

Detection of apoptosis induced by new type gosling viral enteritis virus in vitro through fluorescein annexin V-FITC/PI double labeling
Authors: Chen S, Cheng AC, Wang MS, Peng X.
Journal: World J Gastroenterol (2008): 2174

Evaluation of annexin V and Calcein-AM as markers of mononuclear cell apoptosis during human immunodeficiency virus infection
Authors: Palma PF, Baggio GL, Spada C, Silva RD, Ferreira SI, Treitinger A.
Journal: Braz J Infect Dis (2008): 108

Measurement of annexin V uptake and lactadherin labeling for the quantification of apoptosis in adherent Tca8113 and ACC-2 cells
Authors: Hu T, Shi J, Jiao X, Zhou J, Yin X.
Journal: Braz J Med Biol Res (2008): 750

Rhodamine B isothiocyanate doped silica-coated fluorescent nanoparticles (RBITC-DSFNPs)-based bioprobes conjugated to Annexin V for apoptosis detection and imaging
Authors: Shi H, He X, Wang K, Yuan Y, Deng K, Chen J, Tan W.
Journal: Nanomedicine (2007): 266

说明书
Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 深红色荧光 适合流式细胞检测 .pdf

Cell Meter 磷脂酰丝氨酸凋亡检测试剂盒 蓝色荧光,适合微孔板检测 货号22790-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Meter 磷脂酰丝氨酸凋亡检测试剂盒 蓝色荧光,适合微孔板检测

Cell Meter 磷脂酰丝氨酸凋亡检测试剂盒 蓝色荧光,适合微孔板检测

Cell Meter 磷脂酰丝氨酸凋亡检测试剂盒 蓝色荧光,适合微孔板检测 货号22790 货号 22790 存储条件 在2-8度冷藏保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 2604
Ex (nm) 405 Em (nm) 450
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

我们的Cell Meter™检测试剂盒是一套用于监测细胞活性的试剂盒。有多种参数可用于监测细胞活力。该特定试剂盒旨在通过测量磷脂酰丝氨酸（PS）的转运来监测细胞凋亡。在细胞凋亡中，PS转移到质膜的外部小叶。磷脂酰丝氨酸在细胞表面的出现是细胞凋亡的初始/中间阶段的通用指标，可以在观察形态变化之前进行检测。该特定试剂盒旨在通过测量磷脂酰丝氨酸（PS）的转运来监测细胞凋亡。该试剂盒使用我们专有的基于荧光小分子的Apopxin™PS探针，该探针以比膜联蛋白V（Kd <10 nM）高得多的亲和力特异性结合PS。与膜PS结合后具有蓝色荧光。它可以以酶标仪，显微镜和流式细胞仪的形式使用，而大多数其他商业凋亡检测试剂盒只能与显微镜或流式细胞仪平台一起使用。

 

适用仪器

荧光酶标仪  
激发： 405nm
发射： 450nm
cutoff： 420nm
推荐孔板： 黑色孔板
读取模式： 底读模式

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物制备细胞（100 µL /孔/ 96孔板或25 µL /孔/ 384孔板）
2.加入等量的Apopxin™Violet 450工作溶液
3.在室温下孵育1小时
4.观察Ex / Em = 405/450 nm（截止= 420 nm）的荧光强度（底部读取模式）或使用装有紫罗兰色滤光片的荧光显微镜

 

溶液配制

工作溶液配制

将10μL100X Apopxin™紫罗兰色450（组分A）添加到1 mL的测定缓冲液（组分B）中，并充分混合以制成Apopxin™紫罗兰色450工作溶液。 

 

操作步骤

1.通过向PBS或所需的缓冲液中加入10X /孔（96孔板）或2.5 µL /孔（384孔板）的10X测试化合物储备溶液来处理细胞。对于空白孔（不含细胞的培养基），添加相同量的化合物缓冲液。

2.将细胞板在5％CO2、37°C​​的培养箱中孵育所需的时间（对于用星形孢菌素处理的Jurkat细胞需要4-6小时）以诱导凋亡。注意：由于在405 nm激发时，从380至490 nm的宽发射光谱，某些化合物（例如喜树碱）可能会产生假阳性反应。

3.在每个孔中添加100 µL /孔（96孔板）或25 µL /孔（384孔板）的Apopxin™Violet 450工作溶液。

4.在避光条件下，于室温下孵育细胞板至少1小时。

5.以800 rpm的速度离心细胞板（特别是非粘附细胞）2分钟（制动）。

6.使用荧光酶标仪（底部读取模式）在Ex / Em = 405/450 nm（截止= 420 nm）或使用带有紫色滤光片的荧光显微镜对图像池进行荧光强度监测。

Cell Meter 磷脂酰丝氨酸凋亡检测试剂盒 蓝色荧光,适合微孔板检测 货号22790

图1.用Apopxin™Violet 450偶联物染色的HeLa细胞的荧光图像。 Jurkat细胞在37℃下不使用（左）或用1μM星形孢菌素（右）处理4小时。 使用带有紫色滤光片组的显微镜（激发＝ 405nm）测量荧光强度。

参考文献

Physiological effects of the herbicide glyphosate on the cyanobacterium Microcystis aeruginosa
Authors: Wu, Liang and Qiu, Zhihao and Zhou, Ya and Du, Yuping and Liu, Chaonan and Ye, Jing and Hu, Xiaojun
Journal: Aquatic Toxicology (2016): 72–79

Tumor-selective mitochondrial network collapse induced by atmospheric gas plasma-activated medium.
Authors: Saito, Kosuke and Asai, Tomohiko and Fujiwara, Kyoko and Sahara, Junki and Koguchi, Haruhisa and Fukuda, Noboru and Suzuki-Karasaki, Miki and Soma, Masayoshi and Suzuki-Karasaki, Yoshihiro
Journal: Oncotarget (2016)

Inhibition of malignant phenotypes of human osteosarcoma cells by a gene silencer, a pyrrole–imidazole polyamide, which targets an E-box motif
Authors: Taniguchi, Masashi and Fujiwara, Kyoko and Nakai, Yuji and Ozaki, Toshinori and Koshikawa, Nobuko and Toshio, Kojima and Kataba, Motoaki and Oguni, Asako and Matsuda, Hiroyuki and Yoshida, Yukihiro and others
Journal: FEBS open bio (2014): 328–334

Detection of apoptosis based on the interaction between annexin V and phosphatidylserine
Authors: Liu T, Zhu W, Yang X, Chen L, Yang R, Hua Z, Li G.
Journal: Anal Chem (2009): 2410

Evaluation of cell surface expression of phosphatidylserine in ovarian carcinoma effusions using the annexin-V/7-AAD assay: clinical relevance and comparison with other apoptosis parameters
Authors: Dong HP, Holth A, Kleinberg L, Ruud MG, Elstr and MB, Trope CG, Davidson B, Risberg B.
Journal: Am J Clin Pathol (2009): 756

Mobilization of lysosomal calcium regulates the externalization of phosphatidylserine during apoptosis
Authors: Mirnikjoo B, Balasubramanian K, Schroit AJ.
Journal: J Biol Chem (2009): 6918

Peptidic targeting of phosphatidylserine for the MRI detection of apoptosis in atherosclerotic plaques
Authors: Burtea C, Laurent S, Lancelot E, Ballet S, Murariu O, Rousseaux O, Port M, V and er Elst L, Corot C, Muller RN.
Journal: Mol Pharm (2009): 1903

Suicidal membrane repair regulates phosphatidylserine externalization during apoptosis
Authors: Mirnikjoo B, Balasubramanian K, Schroit AJ.
Journal: J Biol Chem (2009): 22512

Trivalent methylated arsenical-induced phosphatidylserine exposure and apoptosis in platelets may lead to increased thrombus formation
Authors: Bae ON, Lim KM, Noh JY, Chung SM, Kim SH, Chung JH.
Journal: Toxicol Appl Pharmacol (2009): 144

Discovery of a phosphatidylserine-recognizing peptide and its utility in molecular imaging of tumour apoptosis
Authors: Thapa N, Kim S, So IS, Lee BH, Kwon IC, Choi K, Kim IS.
Journal: J Cell Mol Med (2008): 1649

说明书
Cell Meter 磷脂酰丝氨酸凋亡检测试剂盒 蓝色荧光,适合微孔板检测 .pdf

Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 红色荧光 适合流式细胞检测 货号22826-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 红色荧光 适合流式细胞检测

Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 红色荧光 适合流式细胞检测

Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 红色荧光 适合流式细胞检测 货号22826 货号 22826 存储条件 在2-8度冷藏保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 2604
Ex (nm) 588 Em (nm) 604
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测细胞凋亡的试剂盒，我们的Cell Meter 检测试剂盒是一套用于检测细胞生存力的工具。有多种参数可用于检测细胞活力。该特定试剂盒旨在通过测量磷脂酰丝氨酸（PS）的转运来监测细胞凋亡。在凋亡中，PS转移到质膜的外部小叶。磷脂酰丝氨酸在细胞表面的出现是细胞凋亡初始/中间阶段的普遍指标，可以在观察到形态变化之前进行检测。该试剂盒使用与PS特异性结合的荧光膜联蛋白V。已经证明膜联蛋白V缀合物选择性结合PS，使用带有PE-Texas Red通道的流式细胞仪（红色荧光）优化了此特定的检测试剂盒，以检测细胞凋亡。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒。 

点击查看光谱

 

适用仪器

流式细胞仪  
激发： 561nm激光
发射： 610/20nm滤波片
通道： PE-Texas Red通道

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物（200μL/样品）制备细胞
2.添加Annexin V-iFluor 594检测溶液
3.在室温下孵育30-60分钟
4.使用具有Ex / Em = 590 / 620nm滤光片组的流式细胞仪或具有TRITC或Texas Red通道的荧光显微镜分析细胞

 

操作步骤

使用Annexin V-iFluor 594制备和孵育细胞：

1.用测试化合物处理细胞一段所需的时间（用星形孢菌素处理的Jurkat细胞4-6小时）以诱导细胞凋亡。

2.离心细胞，得到1-5×105个细胞/管。

3.将细胞重悬于200μL测定缓冲液（组分B）中。

4.将2μL膜联蛋白V-iFluor 594（组分A）加入细胞中。

5.在室温下孵育30至60分钟，避光。

6.在使用流式细胞仪或荧光显微镜分析细胞之前，添加300μL分析缓冲液（组分B）以增加体积。

7.使用具有Ex / Em = 590 / 620nm滤光器组的流式细胞仪或具有TRITC或Texas Red通道的荧光显微镜监测荧光强度。

 

使用流式细胞仪分析：

使用流式细胞仪在Ex / Em = 590 / 620nm处定量膜联蛋白V-iFluor 594结合。 注意：粘附细胞上的膜联蛋白V结合流式细胞术分析未经常检测，因为在细胞分离或收获期间可能发生特定的膜损伤。 然而，Casciola-Rosen等人先前报道了利用膜联蛋白V对贴壁细胞类型进行流式细胞术的方法。 

 

使用荧光显微镜分析：

1.孵育后移取细胞悬液，用测定缓冲液冲洗1-2次，然后用测定缓冲液重悬细胞。

2.将细胞添加到盖有玻璃盖玻片的载玻片上。 注意：对于粘附细胞，建议直接在盖玻片上生长细胞。 与Annexin V-iFluor 594孵育后，用测定缓冲液冲洗1-2次，并将测定缓冲液加回到盖玻片中。 在玻璃载玻片上翻转盖玻片并可视化细胞。 在与膜联蛋白V-iFluor 594孵育后，细胞也可以固定在2％甲醛中，并在显微镜下观察。

3.使用TRITC或Texas Red通道在荧光显微镜下用膜联蛋白V-iFluor 594分析凋亡细胞。 质膜上的橙色染色表明膜联蛋白V-iFluor 594与细胞表面上的PS结合。

 

数据分析

        在活的非凋亡细胞中，膜联蛋白V-iFluor 594检测非诱导细胞中的先天性细胞凋亡，其通常为所有细胞的2-6％。 在凋亡细胞中，膜联蛋白V-iFluor 594与磷脂酰丝氨酸结合，磷脂酰丝氨酸位于细胞膜的外部小叶上，导致染色强度增加。

Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 红色荧光 适合流式细胞检测 货号22826

图1.用细胞仪膜联蛋白V结合细胞凋亡检测试剂盒染色的Costar黑壁/透明底96孔板中Jurkat细胞的图像*红色荧光*。 （左）：未处理的对照细胞。 （右）：用1μM星形孢菌素处理细胞5小时。

 

参考文献

In situ polymerizable hydrogel incorporated with specific pathogen-free porcine platelet-rich plasma for the reconstruction of the corneal endothelium
Authors: Yung-Kai Lin, Ruchi Sharma, Hsu Ma, Wen-Shyan Chen, Chao-Ling Yao
Journal: Journal of the Taiwan Institute of Chemical Engineers (2017)

Novel regulations of MEF2-A, MEF2-D, and CACNA1S in the functional incompetence of adipose-derived mesenchymal stem cells by induced indoxyl sulfate in chronic kidney disease
Authors: Duyen Thi Do, Nam Nhut Phan, Chih-Yang Wang, Zhengda Sun, Yen-Chang Lin
Journal: Cytotechnology (2016): 2589–2604

Shear stress-induced alteration of epithelial organization in human renal tubular cells
Authors: Damien Maggiorani, Romain Dissard, Marcy Belloy, Jean-Sébastien Saulnier-Blache, Audrey Casemayou, Laure Ducasse, Sandra Grès, Julie Bellière, Cécile Caubet, Jean-Loup Bascands
Journal: PloS one (2015): e0131416

Targeting a G-protein-coupled receptor overexpressed in endocrine tumors by magnetic nanoparticles to induce cell death
Authors: Claire Sanchez, Darine El Hajj Diab, Vincent Connord, Pascal Clerc, Etienne Meunier, Bernard Pipy, Bruno Payré, Reasmey P Tan, Michel Gougeon, Julian Carrey
Journal: Acs Nano (2014): 1350–1363

 

相关产品

产品名称 货号
Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 绿色荧光 适合流式细胞检测 Cat#22824
Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 深红色荧光 适合流式细胞检测 Cat#22827
Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 橙色荧光 适合流式细胞检测 Cat#22825

说明书
Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 红色荧光 适合流式细胞检测 .pdf

Cell Meter PE-Annexin V细胞凋亡检测试剂盒 适合于流式细胞仪 货号22838-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Meter PE-Annexin V细胞凋亡检测试剂盒 适合于流式细胞仪

Cell Meter PE-Annexin V细胞凋亡检测试剂盒 适合于流式细胞仪

Cell Meter PE-Annexin V细胞凋亡检测试剂盒 适合于流式细胞仪 货号22838 货号 22838 存储条件 在2-8度冷藏保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 2604
Ex (nm) 566 Em (nm) 574
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter  PE-Annexin V细胞凋亡检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测细胞凋亡的试剂盒，膜联蛋白V可以与包括PE的荧光染料结合。该染料保留了其对磷脂酰丝氨酸（PS）的高亲和力，因此可用作流式细胞术分析正在经历细胞凋亡的细胞的敏感探针。由于PS的外化发生在细胞凋亡的早期阶段，PE膜联蛋白V染色可以比基于核变化（例如DNA片段化）的测定更早地鉴定细胞凋亡。 PE膜联蛋白V染色先于膜完整性的丧失，膜完整性伴随由凋亡或坏死过程导致的最新细胞死亡阶段。因此，用PE膜联蛋白V染色通常与碘化丙啶（PI）或7-氨基 – 放线菌素（7-AAD）等活体染料结合使用，使研究者能够鉴别早期凋亡细胞（7-AAD阴性，PE膜联蛋白V阳性）。具有完整膜的存活细胞排除7-AAD，而死亡和受损细胞的膜可透过7-AAD。例如，被认为存活的细胞既是PE膜联蛋白V也是7-AAD阴性的，而处于早期凋亡的细胞是PE膜联蛋白V阳性和7-AAD阴性，而处于晚期凋亡或已经死亡的细胞都是PE膜联蛋白V和7-AAD阳性。该测定法不区分经历凋亡性死亡的细胞与因坏死性通路而死亡的细胞，因为在任一情况下，死亡细胞都将用PE膜联蛋白V和7-AAD染色。然而，当随着时间测量细胞凋亡时，可以经常从PE膜联蛋白V和7-AAD阴性（可行的，或不可测量的细胞凋亡）追踪细胞至PE膜联蛋白V阳性和7-AAD阴性（早期凋亡，膜完整性存在），最后是PE膜联蛋白V和7-AAD阳性（末期凋亡和死亡）。细胞通过这三个阶段的运动表明细胞凋亡。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter  PE-Annexin V细胞凋亡检测试剂盒。 

点击查看光谱

 

适用仪器

流式细胞仪  
激发： 488或561nm激光
发射： 575/26nm滤波片
通道： PE通道

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物（200μL/样品）制备细胞
2.添加RPE-膜联蛋白V测定溶液
3.在室温下孵育20-60分钟
4.使用FL2通道（Ex / Em = 488/585 nm）用流式细胞仪分析细胞

 

储备溶液配制

        除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1. RPE-Annexin V原液（100X）：
将含有0.2％BSA的200μLPBS加入到RPE-膜联蛋白V（组分A）的小瓶中以制备100X RPE-膜联蛋白V储备溶液。 注意：将重构的100X RPE-Annexin V储备溶液储存在4°C。有关细胞样品制备的指南，点击查看。

 

操作步骤

1.用测试化合物处理细胞一段所需的时间（用星形孢菌素处理的Jurkat细胞4-6小时）以诱导细胞凋亡。注意：膜粘附细胞的膜联蛋白V流式细胞术分析未经常检测，因为在细胞分离或收获期间可能发生特定的膜损伤。然而，Casiola-Rosen等人先前报道了利用膜联蛋白V对贴壁细胞类型进行流式细胞术的方法。

2.离心细胞，得到1-5×105个细胞/管。

3.将细胞重悬于200μL测定缓冲液（组分B）中。

4.向细胞中加入2μL100XRPE-膜联蛋白V原液。

5.可选：为坏死细胞添加2μL100XNuclear Red DCS（成分C）。

6.在室温下孵育20至60分钟，避光。

7.可选：在使用流式细胞仪分析细胞之前，添加200至300μL的测定缓冲液（组分B）以增加体积。

8.使用具有FL2通道的流式细胞仪（Ex / Em = 488 / 585nm）监测RPE-膜联蛋白V的荧光强度。当将Nuclear Red DCS添加到细胞中时，使用FL4通道测量细胞活力。

 

数据分析

        在活的非凋亡细胞中，RPE-膜联蛋白V检测非诱导细胞中的先天性细胞凋亡，其通常为所有细胞的2-6％。 在凋亡细胞中，RPE-膜联蛋白V与磷脂酰丝氨酸结合，磷脂酰丝氨酸位于细胞膜的外叶上，因此导致染色强度增加。

Cell Meter PE-Annexin V细胞凋亡检测试剂盒 适合于流式细胞仪 货号22838

图1.使用Cell Meter RPE-膜联蛋白V结合细胞凋亡检测试剂盒检测RPE-膜联蛋白V对Jurkat细胞中磷脂酰丝氨酸的结合活性。 将Jurkat细胞在37℃，5％CO2培养箱中在没有（蓝色）或1μM星形孢菌素（红色）的情况下处理4-5小时，然后用RPE-膜联蛋白V染色30分钟。 使用FACSCalibur（Becton Dickinson）流式细胞仪使用FL2通道测量RPE-膜联蛋白V的荧光强度。

 

参考文献

Apoptosis of human Burkitt’s lymphoma cells induced by 2-N,N-diethylaminocarbonyloxymethyl-1-diphenylmethyl-4-(3,4,5-trimethoxybe nzoyl) piperazine hydrochloride (PMS-1077)
Authors: Wang WD, Xu XM, Chen Y, Jiang P, Dong CZ, Wang Q.
Journal: Arch Pharm Res (2009): 1727

Detection of apoptosis based on the interaction between annexin V and phosphatidylserine
Authors: Liu T, Zhu W, Yang X, Chen L, Yang R, Hua Z, Li G.
Journal: Anal Chem (2009): 2410

Dynamic analysis of apoptosis using cyanine SYTO probes: from classical to microfluidic cytometry
Authors: Wlodkowic D, Skommer J, Faley S, Darzynkiewicz Z, Cooper JM.
Journal: Exp Cell Res (2009): 1706

Eurycomanone induce apoptosis in HepG2 cells via up-regulation of p53
Authors: Zakaria Y, Rahmat A, Pihie AH, Abdullah NR, Houghton PJ.
Journal: Cancer Cell Int (2009): 16

Evaluation of cell surface expression of phosphatidylserine in ovarian carcinoma effusions using the annexin-V/7-AAD assay: clinical relevance and comparison with other apoptosis parameters
Authors: Dong HP, Holth A, Kleinberg L, Ruud MG, Elstrand MB, Trope CG, Davidson B, Risberg B.
Journal: Am J Clin Pathol (2009): 756

Glycogen synthase kinase-3 and Omi/HtrA2 induce annexin A2 cleavage followed by cell cycle inhibition and apoptosis
Authors: Wang CY, Lin YS, Su WC, Chen CL, Lin CF.
Journal: Mol Biol Cell (2009): 4153

Gold fluorescent annexin A5 as a novel apoptosis detection tool
Authors: Kurschus FC, Pal PP, Baumler P, Jenne DE, Wiltschi B, Budisa N.
Journal: Cytometry A (2009): 626

Induction of apoptosis in sonoporation and ultrasonic gene transfer
Authors: Miller DL, Dou C.
Journal: Ultrasound Med Biol (2009): 144

Mobilization of lysosomal calcium regulates the externalization of phosphatidylserine during apoptosis
Authors: Mirnikjoo B, Balasubramanian K, Schroit AJ.
Journal: J Biol Chem (2009): 6918

Peptidic targeting of phosphatidylserine for the MRI detection of apoptosis in atherosclerotic plaques
Authors: Burtea C, Laurent S, Lancelot E, Ballet S, Murariu O, Rousseaux O, Port M, Vander Elst L, Corot C, Muller RN.
Journal: Mol Pharm (2009): 1903

 

相关产品

产品名称 货号
Cell Meter APC-Annexin V细胞凋亡检测试剂盒 适合于流式细胞仪 Cat#22837
Cell Meter FITC-Annexin V细胞凋亡检测试剂盒 适合于流式细胞仪 Cat#22839

说明书
Cell Meter PE-Annexin V细胞凋亡检测试剂盒 适合于流式细胞仪 .pdf