Amplite 比色法乙酰胆碱酯酶检测试剂盒 货号11400-AAT Bioquest荧光染料

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Amplite 比色法乙酰胆碱酯酶检测试剂盒

Amplite 比色法乙酰胆碱酯酶检测试剂盒

Amplite 比色法乙酰胆碱酯酶检测试剂盒    货号11400 货号 11400 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 2604
Ex (nm) 410 Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 比色法乙酰胆碱酯酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于乙酰胆碱酯酶检测试剂盒,乙酰胆碱酯酶(AChE)是神经反应和功能最重要的酶之一。AChE将神经递质乙酰胆碱(ACh)降解为胆碱和乙酸。它主要见于中枢神经系统的神经肌肉接头和胆碱能神经突触,其活动用于终止突触传递。AChE抑制剂是批准用于阿尔茨海默病(AD)和重症肌无力的关键药物之一。

我们的Amplite 比色乙酰胆碱酯酶检测试剂盒为检测AChE活性提供了便利的方法。它使用DTNB来量化由血液,细胞提取物和其他溶液中的AChE水解乙酰硫代胆碱产生的硫代胆碱。DTNB加合物的吸收强度用于测量形成的硫代胆碱的量,其与AChE活性成比例。该试剂盒提供比色一步法检测,在100μL检测体积(1 mU / mL)内检测低至0.1 mU AChE,如图1所示。其信号可通过吸光度酶标仪在~410 nm处轻松读取。该试剂盒,可用于持续监控AChE活动。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 比色法乙酰胆碱酯酶检测试剂盒。 

 

适用仪器


光吸收酶标仪  
吸收: 410±5nm
推荐孔板: 透明底板

产品说明书

96孔板测定示例

概述

准备AChE反应混合物(50μL)

加入AChE标准品或AChE测试样品(50μL)

在室温下孵育10-30分钟监测410±5 nm的吸光度

注意:在开始实验之前,在室温下解冻所有试剂盒组分。

 

操作方法

1.准备库存解决方案:

1.120X DTNB储备溶液:将0.6mL测定缓冲液(组分B)加入到DTNB(组分A)的小瓶中以制备20X DTNB储备溶液。

注意:未使用的DTNB储备溶液应分为单次使用的等分试样。 储存在-20℃并避光。

1.220X乙酰硫代胆碱储备溶液:将0.6mL ddH 2 O加入乙酰硫代胆碱的小瓶中(组分C)。

注意:未使用的20X乙酰硫代胆碱原液应分成一次性等分试样,并在20℃下保存。

1.3乙酰胆碱酯酶储备液:将100μLDdH2O与0.1%BSA加入乙酰胆碱酯酶标准品(组分D)中,制成50单位/ mL乙酰胆碱酯酶储备液。

注意:未使用的乙酰胆碱酯酶原液应分成一次性等分试样并储存在-20℃。

 

2.制备乙酰硫代胆碱反应混合物:

根据说明书中表1制备乙酰硫代胆碱反应混合物并避光。

Components

Volume

Assay Buffer (Component B)

4.5 mL

20X DTNB Stock Solution (from Step 1.1)

250 mL

20X Acetylthiocholine Stock solution (from Step 1.2)

250 mL

Total volume

5 mL

 

3.准备连续稀释的乙酰胆碱酯酶标准品(0至1000 mU / mL):

3.1将20μL的50单位/ mL乙酰胆碱酯酶储备液(来自步骤1.3)加入到980L的测定缓冲液(组分B)中以产生1000mU / mL乙酰胆碱酯酶标准溶液。

注意:稀释的乙酰胆碱酯酶标准溶液不稳定,应在4小时内使用。

3.2取200μL1000mU / mL乙酰胆碱酯酶标准品进行1:3连续稀释,得到300,100,30,10,3,1和0 mU / mL连续稀释的乙酰胆碱酯酶标准品。

3.3如说明书中表2和3中所述,将含有乙酰胆碱酯酶标准品和含乙酰胆碱酯酶的测试样品的系列稀释液加入白色/透明底96孔微量培养板中。

注意:根据需要处理细胞或组织样本。

 

4.运行乙酰胆碱酯酶测定:

4.1将50μL乙酰硫代胆碱反应混合物(来自步骤2.1)加入乙酰胆碱酯酶标准品,空白对照和测试样品(见步骤3.3)的每个孔中,使总乙酰胆碱酯酶测定体积为100μL/孔。

注意:对于384孔板,每孔加入25μL样品和25μL乙酰硫代胆碱反应混合物。

4.2在室温下孵育反应10至30分钟,避光。

4.3使用吸光度酶标仪在410±5 nm处检测吸光度的增加。

 

参考文献

Insects in anthelminthics research: Lady beetle-derived harmonine affects survival, reproduction and stem cell proliferation of Schistosoma mansoni
Authors: Josina Kellershohn, Laura Thomas, Arnold Grünweller, Roland K Hartmann, Martin Hardt, Andreas Vilcinskas, Christoph G Grevelding, Simone Haeberlein
Journal: PLoS neglected tropical diseases (2019): e0007240

Environmentally relevant concentrations of di (2-ethylhexyl) phthalate exposure alter larval growth and locomotion in medaka fish via multiple pathways
Authors: Wen-Kai Yang, Li-Fen Chiang, Shi-Wei Tan, Pei-Jen Chen
Journal: Science of The Total Environment (2018): 512–522

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Journal: Journal of Gastroenterology (2017): 1–12

Protective Effect of α-Lipoic Acid against α-Cypermethrin-Induced Changes in Rat Cerebellum
Authors: H Elsawy, MA Al-Omair, A Sedky, L Al-Otaibi
Journal: Journal of Chemical Neuroanatomy (2017)

Spirulina maxima Extract Ameliorates Learning and Memory Impairments via Inhibiting GSK-3β Phosphorylation Induced by Intracerebroventricular Injection of Amyloid-β 1–42 in Mice
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Journal: International Journal of Molecular Sciences (2017): 2401

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说明书
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Amplite 荧光法乙酰胆碱检测试剂盒 红色荧光 货号11403-AAT Bioquest荧光染料

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Amplite 荧光法乙酰胆碱检测试剂盒 红色荧光

Amplite 荧光法乙酰胆碱检测试剂盒 红色荧光

Amplite 荧光法乙酰胆碱检测试剂盒 红色荧光     货号11403 货号 11403 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 2604
Ex (nm) 571 Em (nm) 584
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 荧光法乙酰胆碱检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测乙酰胆碱酯酶的试剂盒,胆碱是一种强有机碱,是卵磷脂的组成成分,也存在于神经鞘磷脂之中,是机体可变甲基的一个来源而作用于合成甲基的产物,同时又是乙酰胆碱的前体。乙酰胆碱(AcetylCholine,ACh)是一种神经递质,能特异性的作用于各类胆碱受体,在组织内迅速被胆碱酯酶破坏,其作用广泛,选择性不高。在神经细胞中,乙酰胆碱是由胆碱和乙酰辅酶A在胆碱乙酰移位酶(胆碱乙酰化酶)的催化作用下合成的。胆碱和乙酰胆碱在许多生物学过程中发挥重要的作用。Amplite乙酰胆碱检测试剂盒 *红色荧光* 为定量检测胆碱提供了一种最灵敏的方法。本试剂盒使用Amplite Red对氧化酶介导的酶偶联反应产物胆碱进行定量检测。Amplite Red的红色荧光强度与胆碱的量成比例关系。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 荧光法乙酰胆碱检测试剂盒。

点击查看光谱

 

适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 540nm
发射: 590nm
cutoff: 570nm
推荐孔板: 黑色孔板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备ACh工作溶液(50μL)
2.添加ACh标准品或ACh测试样品(50μL)
3.在室温下孵育10-30分钟
4.监测Ex / Em = 540/590 nm处的荧光强度(截止= 570 nm)

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1. Amplite 红色储备液(250X):
将40μLDMSO(组分E)加入到Amplite Red(组分A)的小瓶中以制备250X Amplite Red原液。

2.乙酰胆碱标准溶液(50 mM):
将200μLddH2O加入到乙酰胆碱标准品(组分C)的小瓶中以制备50mM乙酰胆碱标准溶液。

 

2.标准溶液

乙酰胆碱标准
将20μL50mM乙酰胆碱标准溶液加入到980μL测定缓冲液(组分D)中以产生1000μM乙酰胆碱标准溶液。 取1000μM乙酰胆碱标准品,在分析缓冲液(组分D)中进行1:10,得到100μM乙酰胆碱标准品(AS7)。 取100μM乙酰胆碱标准品(AS7)和1:3连续稀释液,用分析缓冲液(组分D)连续稀释乙酰胆碱标准品(AS6-AS1)。 注意:稀释的乙酰胆碱标准溶液不稳定,应在4小时内使用。

 

3.工作溶液

1.将5mL测定缓冲液(组分D)加入乙酰胆碱探针(组分B)瓶中并充分混合。

2.将20μL250XAmplite Red 储备溶液加入乙酰胆碱探针溶液瓶中,制成乙酰胆碱(ACh)工作溶液。 注意:应立即使用乙酰胆碱(ACh)工作溶液并避光。 测定背景将随着更长的储存时间而增加。

点击查看样品制备方案

 

样品分析

表1.实心黑色96孔微孔板中乙酰胆碱标准品和测试样品的布局。 AS =乙酰胆碱标准品(AS1-AS7,0.14至100μM); BL =空白对照; TS =测试样品。

BL BL TS TS
AS1 AS1
AS2 AS2
AS3 AS3    
AS4 AS4    
AS5 AS5    
AS6 AS6    
AS7 AS7    

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
AS1-AS7 50ul 连续稀释液(0.14至100μM)
BL 50ul 分析缓冲液
TS 50ul 测试样本

1.根据表1和2中提供的布局制备乙酰胆碱标准品(AS),空白对照(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25μL试剂代替50μL。 注意:根据需要处理细胞或组织样本。

2.向乙酰胆碱标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入50μL乙酰胆碱(ACh)工作溶液,使总乙酰胆碱测定体积为100μL/孔。 对于384孔板,在每个孔中加入25μL乙酰胆碱(ACh)工作溶液,总体积为50μL/孔。

3.在室温下孵育反应10至30分钟,避光。

4.用Ex / Em = 540 / 590nm(截止值= 570nm)的荧光酶标仪监测荧光增加。

 

参考文献

Effect of Royal Jelly on Mouse Isolated Ileum and Gastrointestinal Motility
Authors: Shino Miyauchi-Wakuda, Satomi Kagota, Kana Maruyama-Fumoto, Hirokazu Wakuda, Shizuo Yamada, Kazumasa Shinozuka
Journal: Journal of Medicinal Food (2019)

Fermented rice peptides attenuate scopolamine-induced memory impairment in mice by regulating neurotrophic signaling pathways in the hippocampus
Authors: Henry M Corpuz, Hiroshi Fujii, Soichiro Nakamura, Shigeru Katayama
Journal: Brain Research (2019): 146322

Royal jelly increases peripheral circulation by inducing vasorelaxation through nitric oxide production under healthy conditions
Authors: Yaoyue Liang, Satomi Kagota, Kana Maruyama, Yuri Oonishi, Shino Miyauchi-Wakuda, Yoshihiko Ito, Shizuo Yamada, Kazumasa Shinozuka
Journal: Biomedicine & Pharmacotherapy (2018): 1210–1219

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说明书
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Amplite 荧光法乙酰胆碱酯酶检测试剂盒 红色荧光 货号11402-AAT Bioquest荧光染料

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Amplite 荧光法乙酰胆碱酯酶检测试剂盒 红色荧光

Amplite 荧光法乙酰胆碱酯酶检测试剂盒 红色荧光

Amplite 荧光法乙酰胆碱酯酶检测试剂盒 红色荧光     货号11402 货号 11402 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
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Amplite 荧光法乙酰胆碱酯酶检测试剂盒 红色荧光 是美国AAT Bioquest生产的用于检测乙酰胆碱酯酶的试剂盒,乙酰胆碱酯酶(AChE)是神经反应和功能最重要的酶之一。AChE将神经递质乙酰胆碱(ACh)降解为胆碱和乙酸。它主要见于中枢神经系统的神经肌肉接头和胆碱能神经突触,其活动用于终止突触传递。AChE抑制剂是批准用于阿尔茨海默病(AD)和重症肌无力的关键药物之一。

我们的Amplite 比色乙酰胆碱酯酶检测试剂盒为检测AChE活性提供了便利的方法。它使用DTNB来量化由血液,细胞提取物和其他溶液中的AChE水解乙酰硫代胆碱产生的硫代胆碱。DTNB加合物的吸收强度用于测量形成的硫代胆碱的量,其与AChE活性成比例。该试剂盒提供比色一步法检测,在100μL检测体积(1 mU / mL)内检测低至0.1 mU AChE,如图1所示。其信号可通过吸光度酶标仪在~410 nm处轻松读取。该试剂盒,可用于持续监控AChE活动。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 荧光法乙酰胆碱酯酶检测试剂盒。

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荧光酶标仪  
激发: 540nm
发射: 590nm
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推荐孔板: 黑色孔板

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96孔板测定示例

概述

准备AChE反应混合物(50μL)

加入AChE标准品或AChE测试样品(50μL)

在室温下孵育10-30分钟监测410±5 nm的吸光度

注意:在开始实验之前,在室温下解冻所有试剂盒组分。

 

操作方法

1.准备库存解决方案:

1.120X DTNB储备溶液:将0.6mL测定缓冲液(组分B)加入到DTNB(组分A)的小瓶中以制备20X DTNB储备溶液。

注意:未使用的DTNB储备溶液应分为单次使用的等分试样。 储存在-20℃并避光。

1.220X乙酰硫代胆碱储备溶液:将0.6mL ddH 2 O加入乙酰硫代胆碱的小瓶中(组分C)。

注意:未使用的20X乙酰硫代胆碱原液应分成一次性等分试样,并在20℃下保存。

1.3乙酰胆碱酯酶储备液:将100μLDdH2O与0.1%BSA加入乙酰胆碱酯酶标准品(组分D)中,制成50单位/ mL乙酰胆碱酯酶储备液。

注意:未使用的乙酰胆碱酯酶原液应分成一次性等分试样并储存在-20℃。

 

2.制备乙酰硫代胆碱反应混合物:

根据说明书中表1制备乙酰硫代胆碱反应混合物并避光。

Components

Volume

Assay Buffer (Component B)

4.5 mL

20X DTNB Stock Solution (from Step 1.1)

250 mL

20X Acetylthiocholine Stock solution (from Step 1.2)

250 mL

Total volume

5 mL

 

3.准备连续稀释的乙酰胆碱酯酶标准品(0至1000 mU / mL):

3.1将20μL的50单位/ mL乙酰胆碱酯酶储备液(来自步骤1.3)加入到980L的测定缓冲液(组分B)中以产生1000mU / mL乙酰胆碱酯酶标准溶液。

注意:稀释的乙酰胆碱酯酶标准溶液不稳定,应在4小时内使用。

3.2取200μL1000mU / mL乙酰胆碱酯酶标准品进行1:3连续稀释,得到300,100,30,10,3,1和0 mU / mL连续稀释的乙酰胆碱酯酶标准品。

3.3如说明书中表2和3中所述,将含有乙酰胆碱酯酶标准品和含乙酰胆碱酯酶的测试样品的系列稀释液加入白色/透明底96孔微量培养板中。

注意:根据需要处理细胞或组织样本。

 

4.运行乙酰胆碱酯酶测定:

4.1将50μL乙酰硫代胆碱反应混合物(来自步骤2.1)加入乙酰胆碱酯酶标准品,空白对照和测试样品(见步骤3.3)的每个孔中,使总乙酰胆碱酯酶测定体积为100μL/孔。

注意:对于384孔板,每孔加入25μL样品和25μL乙酰硫代胆碱反应混合物。

4.2在室温下孵育反应10至30分钟,避光。

4.3使用吸光度酶标仪在410±5 nm处检测吸光度的增加。

 

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推荐孔板: 黑色孔板

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样品实验方案

简要概述

1.准备AChE工作溶液(50μL)
2.添加AChE标准品和/或AChE测试样品(50μL)
3.在室温下孵育10-30分钟
4.监测Ex / Em = 490 / 520nm处的荧光强度

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1 Thiolite Green原液(200X):
将50μLDMSO(组分E)加入到Thiolite Green(组分A)的小瓶中以制备200X Thiolite Green原液。

1.2 乙酰硫代胆碱原液(500X):
将0.6mL ddH2O加入乙酰硫代胆碱(组分C)的小瓶中。

1.3 乙酰胆碱酯酶标准储备液:
将100μL含0.1%BSA的ddH2O加入到乙酰胆碱酯酶标准品(组分D)的小瓶中,制成50U / mL乙酰胆碱酯酶标准溶液。

 

2.标准溶液

乙酰胆碱酯酶标准
将20μL的50U / mL乙酰胆碱酯酶标准溶液加入到980μL测定缓冲液(组分C)中以产生1000mU / mL乙酰胆碱酯酶标准溶液。 取1000 mU / mL乙酰胆碱酯酶标准溶液以1:10进行,得到100 mU / mL乙酰胆碱酯酶标准溶液(AS7)。然后进行1:3连续稀释以获得剩余的连续稀释的乙酰胆碱酯酶标准品(AS6-AS1)。 注意:稀释的乙酰胆碱酯酶标准溶液不稳定,应在4小时内使用。

 

3.工作溶液

将10μL乙酰硫代胆碱储备溶液(500X)和25μLThiolite Green储备溶液(200X)加入5mL测定缓冲液(组分B)中,使总体积为5.03mL乙酰胆碱酯酶(AChE)工作溶液。 注意:AChE不稳定,需要在30分钟内使用,避光。

 

样品分析

表1.实心黑色96孔微孔板中乙酰胆碱酯酶标准品和测试样品的布局。 AS =乙酰胆碱酯酶标准品(AS1-AS7,0.01至100mU / mL),BL =空白对照,TS =测试样品。

BL BL TS TS
AS1 AS1
AS2 AS2
AS3 AS3    
AS4 AS4    
AS5 AS5    
AS6 AS6    
AS7 AS7    

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
AS1-AS7 50ul 连续稀释(0.01至100 mU / mL)
BL 50ul 分析缓冲液(组分B)
TS 50ul 测试样本

1.根据表1和2中提供的布局制备乙酰胆碱酯酶标准品(AS),空白对照(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25μL试剂代替50μL。

2.向乙酰胆碱酯酶标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入50μLAChE工作溶液,使总乙酰胆碱酯酶测定体积为100μL/孔。 对于384孔板,在每个孔中加入25μLAChE工作溶液,总体积为50μL/孔。

3.在室温下孵育反应10至30分钟,避光。

4.用Ex / Em = 490 / 520nm的荧光酶标仪监测荧光增加。

 

参考文献

Linarin improves the dyskinesia recovery in Alzheimer’s disease zebrafish by inhibiting the acetylcholinesterase activity
Authors: Hongye Pan, Jinghui Zhang, Yangyang Wang, Keke Cui, Yueting Cao, Longhu Wang, Yongjiang Wu
Journal: Life Sciences (2019)

Use of high-throughput enzyme-based assay with xenobiotic metabolic capability to evaluate the inhibition of acetylcholinesterase activity by organophosphorous pesticides
Authors: Shuaizhang Li, Jinghua Zhao, Ruili Huang, Michael F Santillo, Keith A Houck, Menghang Xia
Journal: Toxicology in Vitro (2019)

Hepatic vagus nerve regulates Kupffer cell activation via α7 nicotinic acetylcholine receptor in nonalcoholic steatohepatitis
Authors: Takahiro Nishio, Kojiro Taura, Keiko Iwaisako, Yukinori Koyama, Kazutaka Tanabe, Gen Yamamoto, Yukihiro Okuda, Yoshinobu Ikeno, Kenji Yoshino, Yosuke Kasai
Journal: Journal of Gastroenterology (2017): 1–12

Protective Effect of α-Lipoic Acid against α-Cypermethrin-Induced Changes in Rat Cerebellum
Authors: H Elsawy, MA Al-Omair, A Sedky, L Al-Otaibi
Journal: Journal of Chemical Neuroanatomy (2017)

Spirulina maxima Extract Ameliorates Learning and Memory Impairments via Inhibiting GSK-3β Phosphorylation Induced by Intracerebroventricular Injection of Amyloid-β 1–42 in Mice
Authors: Eun-Jeong Koh, Kui-Jin Kim, Ji-Hyeon Song, Jia Choi, Hyeon Yong Lee, Do-Hyung Kang, Ho Jin Heo, Boo-Yong Lee
Journal: International Journal of Molecular Sciences (2017): 2401

Anethole restores delayed gastric emptying and impaired gastric accommodation in rodents
Authors: Teita Asano, Shuji Aida, Shintaro Suemasu, Tohru Mizushima
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2016): 125–130

Dietary and donepezil modulation of mTOR signaling and neuroinflammation in the brain
Authors: Kalavathi Dasuri, Le Zhang, Sun OK Fernandez Kim, Annadora J Bruce-Keller, Jeffrey N Keller
Journal: Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-Molecular Basis of Disease (2016): 274–283

Dissolved organic matter or salts change the bioavailability processes and toxicity of the nanoscale tetravalent lead corrosion product PbO2 to medaka fish
Authors: Chun-Wei Chiang, Ding-Quan Ng, Yi-Pin Lin, Pei-Jen Chen
Journal: Environmental Science & Technology (2016): 11292–11301

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Authors: Eeda Koti Reddy, C Remya, Ayyiliath M Sajith, KV Dileep, C Sadasivan, Shaik Anwar
Journal: RSC Advances (2016): 77431–77439

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Authors: Jin-Seok Lee, Sung-Shin Hong, Hyeong-Geug Kim, Hye-Won Lee, Won-Yong Kim, Sam-Keun Lee, Chang-Gue Son
Journal: PloS one (2016): e0159823

 

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