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Amplite 荧光法丙三醇检测试剂盒
货号 | 13833 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 | |
规格 | 200 Tests | 价格 | 4584 | |
Ex (nm) | 571 | Em (nm) | 585 | |
分子量 | 溶剂 | |||
产品详细介绍 |
简要概述
Amplite 荧光法丙三醇检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测丙三醇的试剂盒,甘油是合成肝脏和脂肪组织中甘油三酯和磷脂的前体。禁食时,储存在这些脂滴中的甘油三酯可被水解以产生游离甘油和脂肪酸。 释放到血流中的游离甘油的量与甘油三酯/脂肪酸循环速率成正比,甘油三酯/脂肪酸循环速率在代谢调节和热量产生中是重要的。 Amplite 荧光甘油测定试剂盒提供了一种灵敏的基于荧光的测定方法,用于测量生物样品中的甘油水平。 该测定基于甘油的酶偶联反应,其中产物过氧化氢可以在HRP偶联反应中使用我们的Amplite HRP底物检测。 荧光信号可以通过Ex / Em = 540 / 590nm处的荧光酶标仪进行测量。 使用此荧光甘油测定试剂盒,我们能够在100μL反应体积中检测到低至0.015 mg / L(〜0.16μM)的甘油。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 荧光法丙三醇检测试剂盒。
适用仪器
荧光酶标仪 | |
激发: | 540nm |
发射: | 590nm |
cutoff: | 570nm |
推荐孔板: | 黑色孔板 |
产品说明书
样品实验方案
简要概述
1.准备甘油工作溶液(50 µL)
2.加入甘油标准品或测试样品(50 µL)
3.在室温下孵育10-30分钟
4.监测Ex / Em = 540/590 nm(截止= 570 nm)的荧光增加
溶液制备
1.储备溶液
所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 Amplite HRP底物储备液(200X):
将50 µL DMSO(组分E)添加到Amplite HRP底物(组分A)的小瓶中,制成200X Amplite HRP底物原液,避光。
1.2 甘油标准溶液(1 mg / mL):
将1 mL ddH2O或1x PBS缓冲液添加到小瓶甘油标准溶液(组分D)中,制成1 mg / mL甘油标准溶液。
2.标准溶液
甘油标准
将10μL的1 mg / mL甘油标准溶液添加到990μL的1x PBS缓冲液中,以生成10μg/ mL的甘油标准溶液(GS7)。取10 µg / mL甘油标准溶液(GS7),并在1x PBS缓冲液中进行1:3系列稀释,以得到系列稀释的甘油标准液(GS6-GS1)。
3.工作溶液
3.1 将5 mL测定缓冲液(组分C)加入一瓶酶混合物(组分B)中,并混合均匀。
3.2 将25 µL 200X Amplite HRP底物原液添加到组分B + C的瓶子中,并充分混合以制成甘油工作液。 注意:这种甘油工作溶液足以用于一个96孔板。 它不稳定,请及时使用。
样品操作及实验分析
表1.黑色96孔微孔板中甘油标准品和测试样品的布局。 GS =甘油标准品(GS1-GS7,0.01至10 µg / mL),BL =空白对照,TS =测试样品。
BL | BL | TS | TS |
GS1 | GS1 | … | … |
GS2 | GS2 | … | … |
GS3 | GS3 | ||
GS4 | GS4 | ||
GS5 | GS5 | ||
GS6 | GS6 | ||
GS7 | GS7 |
表2.每个孔的试剂组成
孔 | 容积 | 试剂 |
GS1-GS7 | 50ul | 连续稀释(0.01至10 µg / mL) |
BL | 50ul | 1X PBS缓冲液 |
TS | 50ul | 测试样品 |
1.根据表1和2中提供的布局,准备甘油标准品(GS),空白对照(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25 µL试剂代替50 µL。
2.在甘油标准液,空白对照和测试样品的每个孔中加入50 µL甘油工作溶液,以使甘油总测定体积为100 µL /孔。 对于384孔板,请在每个孔中添加25 µL甘油工作溶液,总体积为50 µL /孔。
3.避光保存,室温下孵育反应10-30分钟。
4.使用荧光板读数器在Ex / Em = 540/590 nm(截止= 570 nm)处监视荧光的增加。
参考文献
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