|
品牌：Wako
CAS No.：9001-37-0 储存条件：-20℃ 纯度：– |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
|
074-02401 |
for Biochemistry | 20000 U | – |
|
– | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动，恕不另行通知，确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司客服。
产品描述相关资料下载相关产品浏览记录
来源：黑曲霉。
活性：150 – 250U/mg。
最佳pH值：5.6，最佳温度：30~40℃
|
品牌：Cosmo Bio
CAS No.： 储存条件：+4℃ 纯度：– |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
|
NBT-MTH-002 |
– | 1 mg | – | 咨询 | – | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动，恕不另行通知，确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司客服。
产品描述相关资料下载相关产品浏览记录 请联系客服
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
 |
货号 | 71573 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
| 规格 | 10 mg | 价格 | 15300 | |
| Ex (nm) | 433 | Em (nm) | 498 | |
| 分子量 | 688.79 | 溶剂 | DMSO | |
| 产品详细介绍 | ||||
简要概述
iFluor 430琥珀酰亚胺酯是美国AAT Bioquest生产的荧光标记染料，iFluor 染料是一系列优秀的荧光标记染料，可以覆盖整个可见光谱。所有iFluor 染料都具有优异的水溶性。它们的亲水性使有机溶剂的使用极小化。iFluor 染料也具有比经典荧光标记染料更好的标记性能，如FITC，TRITC，Texas Red ，Cy3 ，Cy5和Cy7。一些iFluor 染料在某些抗体上明显优于Alexa Fluor 标记染料。它们是用于标记蛋白质和核酸而不包含性能的极便宜的荧光染料（替代Alexa Fluor 染料）。每种iFluor染料的开发都与特定的Alexa Fluor 或其他标记染料（如DyLight 染料）的光谱特性相匹配。
琥珀酰亚胺基（NHS）酯被证明是用于胺修饰的极佳试剂，因为形成的酰胺键基本上与天然肽键相同并且稳定。这些试剂通常是稳定的并且与脂族胺显示出良好的反应性和选择性。当琥珀酰亚胺酯化合物用于缀合反应时，需要考虑的因素很少：1）溶剂：在大多数情况下，活性染料应溶于无水二甲基甲酰胺（DMF）或二甲基亚砜（DMSO）中。 2）反应pH：胺与琥珀酰亚胺酯的标记反应强烈依赖于pH。胺反应性试剂与非质子化脂族胺基团反应，包括蛋白质的末端胺和赖氨酸的β-氨基。因此，胺酰化反应通常在pH 7.5以上进行。通过琥珀酰亚胺酯进行的蛋白质修饰通常可以在pH 8.5-9.5下进行。 3）反应缓冲液：使用胺反应试剂时，必须避免使用含有游离胺（如Tris和甘氨酸）和硫醇化合物的缓冲液。广泛用于蛋白质沉淀的铵盐（例如硫酸铵和乙酸铵）也必须在进行染料缀合之前除去（例如通过透析）。 4）反应温度：大多数缀合在室温下进行。然而，特定标记反应可能需要升高或降低的温度。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的iFluor 430琥珀酰亚胺酯检测试剂盒。
点击查看光谱
点击查看实验方案
产品说明书
染色样本分析
操作步骤
1.准备蛋白质储备溶液（溶液A）：
将100μL反应缓冲液（如1 M碳酸钠溶液或1 M磷酸盐缓冲液，pH~9.0）与900μL目标蛋白溶液（如抗体，蛋白质浓度> 2 mg / ml，如果可能）混合至100μL给予1 mL蛋白质标记原液。
注1：蛋白质溶液（溶液A）的pH值应为8.5±0.5。如果蛋白质溶液的pH低于8.0，则使用1M碳酸氢钠溶液或1M pH 9.0磷酸盐缓冲液将pH调节至8.0-9.0的范围。
注2：蛋白质应溶解于pH7.2-7.4的1X磷酸盐缓冲盐水（PBS）中。如果蛋白质溶解在Tris或甘氨酸缓冲液中，则必须用pH7.2-7.4的1X PBS透析，以除去广泛用于蛋白质沉淀的游离胺或铵盐（例如硫酸铵和乙酸铵）。
注3：不纯抗体、牛血清白蛋白（BSA）或明胶稳定的抗体不会被很好地标记。叠氮化钠或硫柳汞的存在也可能干扰缀合反应。可以通过透析或旋转柱除去叠氮化钠或硫柳汞，以获得极佳标记结果。
注4：如果蛋白质浓度低于2 mg / mL，则结合效率会显着降低。为获得极佳标记效率，建议极终蛋白质浓度范围为2-10 mg / mL。
2.准备染料储备溶液（溶液B）：
将无水DMSO加入到iFluor 染料SE小瓶中以制备10-20mM储备溶液。 通过移液或涡旋混合均匀。
注意：在开始缀合前准备染料储备溶液（溶液B）。 及时使用。 染料储备溶液的长期储存可降低染料活性。 溶液B可在冰箱中保存两周，避光保存。 避免冻融循环。
3.确定极佳染料/蛋白质比例（可选）：
注意：每种蛋白质都需要不同的染料/蛋白质比例，这也取决于染料的性质。蛋白质的过度标记可能不利地影响其结合亲和力，而低染料/蛋白质比率的蛋白质缀合物会降低灵敏度。我们建议您通过使用连续不同量的标记染料溶液重复步骤4和5来实验确定极佳染料/蛋白质比率。通常，对于大多数染料 – 蛋白质缀合物，推荐使用4-6种染料/蛋白质。
3.1使用10：1摩尔比的溶液B（染料）/溶液A（蛋白质）作为起始点：将5μl染料储备溶液（溶液B，假设染料储备溶液为10 mM）加入到样品瓶中。蛋白质溶液（95μl溶液A）有效摇动。假设蛋白质浓度为10mg / mL并且蛋白质的分子量为~200KD，蛋白质的浓度为~0.05mM。
注意：蛋白质溶液中DMSO的浓度应<10％。
3.2运行缀合反应（参见下面的步骤4）。
3.3重复＃3.2，溶液B /溶液A的摩尔比为5：1;分别为15：1和20：1。
3.4使用预制的旋转柱纯化所需的缀合物。
3.5计算上述4种结合物的染料/蛋白质比（DOS）（见说明书）。
3.6运行上述4种结合物的功能测试，确定极佳的染料/蛋白质比例，以扩大标记反应。
4.运行结合反应：
4.1有效加入适量的染料储备溶液（溶液B）到蛋白质溶液（溶液A）的小瓶中晃动。
注意：溶液B /溶液的极佳摩尔比由步骤3.6确定。如果跳过步骤3，我们建议使用10：1溶液B（染料）/溶液A（蛋白质）的摩尔比。
4.2继续在室温下旋转或摇动反应混合物30-60分钟。
5.纯化缀合物
以下方案是使用Sephadex G-25柱纯化染料 – 蛋白质缀合物的实例。
5.1按照制造说明准备Sephadex G-25色谱柱。
5.2将反应混合物（直接从步骤4）加载到Sephadex G-25柱的顶部。
5.3样品在顶部树脂表面下方运行时立即加入PBS（pH 7.2-7.4）。
5.4向所需样品中加入更多PBS（pH 7.2-7.4）以完成色谱柱纯化。 合并含有所需染料 – 蛋白质缀合物的级分。
注1：立即使用时，染料 – 蛋白质偶联物需要用染色缓冲液稀释，并等分多次使用。
注2：对于长期储存，染料 – 蛋白质缀合物溶液需要浓缩或冷冻干燥
参考文献
Deep Sequencing Analysis of the Eha-Regulated Transcriptome of Edwardsiella tarda Following Acidification
Authors: D Gao, N Liu, Y Li, Y Zhang, G Liu
Journal: Metabolomics (Los Angel) (2017): 2153–0769
Suramin inhibits cullin-RING E3 ubiquitin ligases
Authors: Kenneth Wu, Robert A Chong, Qing Yu, Jin Bai, Donald E Spratt, Kevin Ching, Chan Lee, Haibin Miao, Inger Tappin, Jerard Hurwitz
Journal: Proceedings of the National Academy of Sciences (2016): E2011–E2018
Glycosaminoglycan mimicry by COAM reduces melanoma growth through chemokine induction and function
Authors: Helene Piccard, Nele Berghmans, Eva Korpos, Chris Dillen, Ilse Van Aelst, Sandra Li, Erik Martens, Sandra Liekens, Sam Noppen, Jo Van Damme
Journal: International Journal of Cancer (2012): E425–E436
相关产品
| 产品名称 | 货号 |
| iFluor 430马来酰亚胺 | Cat#1054 |
| iFluor 488琥珀酰亚胺酯 | Cat#1023 |
| iFluor 647琥珀酰亚胺酯 | Cat#1031 |
E809351-100g
原厂型号
品牌
单件重量
货期
无参数
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
 |
货号 | 50032 | 存储条件 | 在零下15度以下保存 |
| 规格 | 1 mg | 价格 | 6564 | |
| Ex (nm) | Em (nm) | |||
| 分子量 | 溶剂 | |||
| 产品详细介绍 | ||||
简要概述
产品基本信息
货号：50032
产品名称：磺乙酰胺-BSA缀合物
规格：1mg
储存条件：-15℃避光防潮
保质期：12个月
产品介绍
磺乙酰胺-BSA缀合物用于开发通常在ELISA分析中使用的抗磺乙酰胺抗体。 抗磺乙酰胺抗体也可以识别磺胺胍。 磺乙酰胺-BSA缀合物在每个BSA上具有多个磺乙酰胺分子，以使其免疫原性最大化。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的磺乙酰胺-BSA共轭物。
参考文献
A high-throughput, precipitating colorimetric sandwich ELISA microarray for shiga toxins
Authors: Gehring A, He X, Fratamico P, Lee J, Bagi L, Brewster J, Paoli G, He Y, Xie Y, Skinner C, Barnett C, Harris D.
Journal: Toxins (Basel) (2014): 1855
Development of antigen capture ELISA for the quantification of EIAV p26 protein
Authors: Hu Z, Chang H, Ge M, Lin Y, Wang X, Guo W.
Journal: Appl Microbiol Biotechnol (2014): 9073
Development of atom transfer radical polymer-modified gold nanoparticle-based enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)
Authors: Chen F, Hou S, Li Q, Fan H, Fan R, Xu Z, Zhala G, Mai X, Chen X, Liu Y.
Journal: Anal Chem (2014): 10021
Development of monoclonal antibody-based sandwich ELISA for detection of dextran
Authors: Wang SY, Li Z, Wang XJ, Lv S, Yang Y, Zeng LQ, Luo FH, Yan JH, Liang DF.
Journal: Monoclon Antib Immunodiagn Immunother (2014): 334
Effect of different combinations of antibodies and enzyme labels on ELISA of progesterone
Authors: Kumari GL, P and ey PK, Nathsharma SS, Sharma SK, Kochhar G.
Journal: J Immunoassay Immunochem (2014): 157
Long-term dry storage of an enzyme-based reagent system for ELISA in point-of-care devices
Authors: Ramach and ran S, Fu E, Lutz B, Yager P.
Journal: Analyst (2014): 1456
Ultrasensitive ELISA using enzyme-loaded nanospherical brushes as labels
Authors: Qu Z, Xu H, Xu P, Chen K, Mu R, Fu J, Gu H.
Journal: Anal Chem (2014): 9367
3-(10′-Phenothiazinyl)propionic acid is a potent primary enhancer of peroxidase-induced chemiluminescence and its application in sensitive ELISA of methylglyoxal-modified low density lipoprotein
Authors: Sakharov IY, Demiyanova AS, Gribas AV, Uskova NA, Efremov EE, Vdovenko MM.
Journal: Talanta (2013): 414
Development of an ELISA for the quantification of the C-terminal decapeptide prothymosin alpha(100-109) in sera of mice infected with bacteria
Authors: Samara P, Kalbacher H, Ioannou K, Radu DL, Livaniou E, Promponas VJ, Voelter W, Tsitsilonis O.
Journal: J Immunol Methods (2013): 54
ELISA for determination of total coagulation factor XII concentration in human plasma
Authors: Madsen DE, Sidelmann JJ, Overgaard K, Koch C, Gram JB.
Journal: J Immunol Methods (2013): 32
