钙离子荧光探针Fluo-4 AM *Ultrapure Grade* *CAS 273221-67-3*

	货号	20552	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	5×50 ug	价格	1272
	Ex (nm)	495	Em (nm)	528
	分子量	1096.95	溶剂	DMSO
	产品详细介绍

简要概述

钙离子荧光探针Fluo-4 AM是美国AAT Bioquest生产的荧光探针，钙通量测定是用于筛选G蛋白偶联受体（GPCR）药物的优选方法。 我们的Fluo-4®和Rhod-4 系列钙检测试剂是最亮的绿色和红色钙指示剂，而我们的Cal-520 和Cal-590 具有最高的细胞内钙检测信噪比。AAT Bioquest也提供其他高质量的钙离子探针，如Fluo-4，Fluo-3，Fura-2，Indo-1，Rhod-5N和Rhod-2 AM。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商，为您提供最优质的钙离子荧光探针。

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钙离子篇：时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

产品说明书

使用钙指示剂AM酯类

1.使用钙指示剂AM Esters加载细胞：

AM酯是非极性酯，它容易穿过活细胞膜，并且通过活细胞内的细胞酯酶快速水解。 AM酯广泛用于非侵入性地将各种极性荧光探针加载到活细胞中。 但是，使用AM酯时必须小心，因为它们易于水解，特别是在溶液中，所以它们应该用高质量的无水二甲基亚砜（DMSO）溶解。 DMSO储备溶液应在-20°C下干燥储存并避光。 在这些条件下，AM酯可以稳定数月。

以下是我们推荐的将AM酯加载到活细胞中的方案。 该方案仅提供指南，实际应根据您的具体需求进行修改。

a）在高质量无水DMSO中制备2至5 mM AM酯原液。

b）在实验当天，将钙指示剂溶解在DMSO中或将等份的指示剂储备溶液解冻至室温。使用0.04％Pluronic®F-127在缓冲液（如Hanks和Hepes缓冲液）中制备2至20μM的工作溶液。 对于大多数细胞系，我们建议钙指示剂的最终浓度为4-5 uM。细胞加载所需指标的确切浓度必须根据经验确定。为避免因过载和潜在染料毒性引起的任何伪影，建议使用较小浓度来达到最佳信号强度。

注意：非离子洗涤剂Pluronic®F-127有时用于增加钙指示剂AM酯的水溶性。

c）如果您的细胞（如CHO细胞）含有有机阴离子转运蛋白，可以将丙磺舒（2-5 mM）或磺吡酮（0.2-0.5 mM）添加到染料工作溶液中（最终浓度为1） 丙磺舒为-2.5 mM，磺吡酮为0.1-0.25 mM，以减少去酯化指标的泄漏。

d）将等体积的染料工作溶液（来自步骤b或c）加入细胞板中。

e）将染料加载板在温度37℃下孵育20分钟（特别是Fluo-8AM）至2小时，然后将板在室温下再孵育30分钟。

注意1：降低加载温度可能会减少指示符的划分。

注意2：孵育Cal-520 AM超过2小时可以为某些细胞系提供更好的信号强度。

f）用HHBS或您选择的缓冲液（含有阴离子转运蛋白抑制剂，如1mM丙磺舒）替换染料工作溶液，以去除多余的探针。

g）在所需的Ex / Em波长下进行实验。

试剂应用文献

14,15‐epoxyeicosatrienoic acid produced by cytochrome P450s enhances neurite outgrowth of PC12 and rat hippocampal neuronal cells
Authors: Oguro, Ami and Inoue, Takumi and Kudoh, Suguru N and Imaoka, Susumu
Journal: Pharmacology Research & Perspectives (2018): e00428

参考文献

14, 15-epoxyeicosatrienoic acid produced by cytochrome P450s enhances neurite outgrowth of PC 12 and rat hippocampal neuronal cells
Authors: Ami Oguro, Takumi Inoue, Suguru N Kudoh, Susumu Imaoka
Journal: Pharmacology Research & Perspectives (2018): e00428

Succinate, increased in metabolic syndrome, activates GPR91 receptor signaling in urothelial cells
Authors: Abubakr H Mossa, Monica Velasquez Flores, Philippe G Cammisotto, Lysanne Campeau
Journal: Cellular Signalling (2017)

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