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Cell Meter 细胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒 深红色荧光
货号 | 15296 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 | |
规格 | 100 Tests | 价格 | 6564 | |
Ex (nm) | 593 | Em (nm) | 655 | |
分子量 | 溶剂 | |||
产品详细介绍 |
简要概述
Cell Meter 细胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒是美国AAT Bioquest研发的检测NADP/NADPH的试剂盒,细胞内二氢烟酰胺腺嘌呤二核苷酸NADH及其磷酸酯NADPH的检测对于疾病诊断和药物发现是重要的。通常,氧化还原偶联NAD / NADH和NADP / NADPH在能量代谢,糖酵解,三羧酸循环和线粒体呼吸中起关键作用。细胞中NAD(P)H水平升高与活性氧(ROS)和DNA损伤的异常产生有关。然而,由于缺乏敏感的NAD(P)H探针,检测细胞内NAD具有挑战性。(P)H在生物系统中。Cell Meter 细胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒提供了一种监测远光谱活细胞中细胞内NAD(P)H水平的有效方法,可与其他应用如GFP表达细胞或MitoTracker的应用相结合。JJ1902 NAD(P)H探针是一种优秀的荧光探针,用于检测和成像细胞中的NADH / NADPH。该荧光探针结合NADH / NADPH,产生高灵敏度和特异性的强荧光信号。JJ1902 NAD(P)H探针可以很容易地加载到活细胞中,并且可以使用APC通道中的流式细胞仪方便地监测其荧光信号。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter 细胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒。
适用仪器
流式细胞仪 | |
激发: | 640nm激光 |
发射: | 660/20nm滤波片 |
通道: | APC通道 |
产品说明书
实验样品示例
概述
1.准备细胞(0.5 – 1×106细胞/ mL)
2.将含有测试化合物和JJ1902 NAD(P)H探针的细胞在37℃孵育20-30分钟
3.将细胞洗净并保持在测定缓冲液中
4.使用APC通道用流式细胞仪分析细胞
注意:在开始实验之前,在室温下解冻所有试剂盒组分。
操作方法
1.对于每个样品,将细胞制备在0.5 mL无血清培养基或您选择的缓冲液中,密度为1×105至1×106个细胞/ mL。
注意1:应对每个细胞系进行单独测评,以确定最佳细胞密度。 对于贴壁细胞,用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整,并用无血清培养基洗涤细胞一次。
注意2:JJ1902 NAD(P)H探针在血清存在的情况下也兼容。
2.将细胞与测试化合物在37℃孵育所需的一段时间以刺激细胞内NADH / NADPH。
注意:适当的孵育时间取决于单个细胞类型和使用的测试化合物。 优化每个实验的孵育时间。
3.将1μL JJ1902NAD(P)H探针(组分A)加入0.5 mL细胞悬浮液中。在37℃下孵育30-60分钟。
注意对于NADH / NADPH阳性对照处理:将Jurkat细胞与100μMNADH或NADPH在无血清培养基中孵育30分钟,并与JJ1902 NAD(P)H探针工作溶液在37℃下共温育30分钟。 详细信息请参见说明书中的图1。
4.用所需的缓冲液(如HHBS或DPBS)洗涤细胞一次。将细胞保存在分析缓冲液(组分B)中。
5.使用流式细胞仪监测APC通道的荧光强度。
参考文献
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Pyrroloquinoline Quinone, a Redox-active o-Quinone, Stimulates Mitochondrial Biogenesis by Activating SIRT1/PGC-1α Signaling Pathway
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Cell-Line Selectivity Improves the Predictive Power of Pharmacogenomic Analyses and Helps Identify NADPH as Biomarker for Ferroptosis Sensitivity
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产品名称 | 货号 |
Cell Meter 胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒 | Cat#15291 |