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红色荧光示踪探针 CytoTrace CFDA
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货号 | 22016 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
| 规格 | 1 mg | 价格 | 2604 | |
| Ex (nm) | 562 | Em (nm) | 576 | |
| 分子量 | 652.43 | 溶剂 | DMSO | |
| 产品详细介绍 | ||||
简要概述
CytoTrace 红色荧光探针保留了Cy3 / TRITC的光谱特性，因此可以使用荧光显微镜或流式细胞仪轻松检测其信号。它自由地穿过细胞膜，并在与细胞成分反应后转化为不渗透细胞的产物。细胞不渗透的反应产物经过数代传给子细胞，但没有转移到群体中的相邻细胞。装有CytoTrace Red探针的细胞通常可以发出荧光，并且至少可以存活24小时，这使该探针成为了出色的长期细胞示踪剂。染色图案可以用甲醛或戊二醛固定，用于信号放大和其他应用。它的光谱与GFP或FITC标记的抗体的光谱很好分离。
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产品说明书
操作步骤
该协议仅提供指南，应根据您的特定需求进行修改。
1.准备2-10 mMDMSO储备溶液
对于＃22014添加45微升DMSO成50 μ 克小瓶使2mM的储备溶液（1毫克/毫升，相当于1.8毫摩尔）;
对于＃22015添加36微升DMSO成50 μ 克小瓶制成10mM储备溶液（1毫克/毫升，相当于1.46毫摩尔）;
对于＃22016，添加153 uL ml DMSO以制成10 mM储备溶液（1 mg / ml相当于1.53 mM）；
对于＃22017，添加215μLDMSO以制成10 mM储备溶液（1 mg / ml相当于2.15 mM）;
对于＃22020，将4.2 mg溶于1 ml DMSO中制成10 mM储备溶液（1 mg / ml相当于〜2.4 mM）；
注意：储备溶液应及时使用；应将所有剩余的溶液等分并在< -20 o C下冷冻。避免重复冻融循环，并避光
2.准备染料工作液
在使用前，通过用Hanks和20 mM Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的pH 7缓冲液稀释步骤1中的DMSO储备溶液，准备好1至20 µM的染料工作溶液。
3.用流式细胞仪或荧光显微镜分析细胞：
3.1用测试化合物处理细胞所需的时间。
3.2离心细胞，每管得到2-10 x105细胞。
3.3将细胞重悬于500 µL 的染料工作溶液中（来自步骤2）。
3.4将细胞与染料溶液在室温或37° C下避光放置15至30分钟。
3.5从细胞中除去染料工作溶液，用HHBS或您选择的缓冲液洗涤细胞。将细胞重悬于500 µL预热的HHBS或培养基中，每管可得到2-10 x 10 5个细胞。
3.6用流式细胞仪（FL1通道） 或荧光显微镜监测Ex / Em = 490/520 nm处的荧光变化。
注意：对于细菌细胞染色：将母液在通过测试细菌过夜生长而预先调节的营养肉汤中以1：800的比例稀释时，染色是最有效的，但是也可以使用新鲜的营养肉汤或PBS。细菌悬浮液应用PBS稀释至105 – 10 7每毫升。将1 ml溶液加到.45 µm过滤器（25mm）上并真空过滤除去溶液，然后加入1ml染料溶液并在室温下孵育5-10分钟，即可对细菌染色。
参考文献
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