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TF3-DEVD-FMK
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货号 | 13474 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
| 规格 | 25 Tests | 价格 | 1272 | |
| Ex (nm) | 554 | Em (nm) | 578 | |
| 分子量 | 975.04 | 溶剂 | DMSO | |
| 产品详细介绍 | ||||
简要概述
TF3-DEVD-FMK是美国AAT Bioquest生产的用于Caspase的试剂，TF3-DEVD-FMK是5-TAMRA-DEVD-FMK（即5-羧基四甲基罗丹明-Asp-Glu-Val-Asp-氟甲基酮）的优良替代品，因为它可以在555 nm处更好地激发。 TF3染料具有与Cy3相同的光谱特性，并具有显著增强的光稳定性。TF3-DEVD-FMK在刺激的细胞中不可逆地与活性胱天蛋白酶3/7结合。 TF3-DEVD-FMK信号的荧光强度与活性半胱天冬酶3/7的数量成正比，可以通过荧光显微镜，流式细胞仪或荧光酶标仪轻松检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的TF3-DEVD-FMK。
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产品说明书
样品操作及分析
以下说明书仅提供指导，实际实验请根据您的特定需求进行修改。
使用AMC，AFC，pNA，R110和ProRed底物的常规胱天蛋白酶测定方案
1.在DMSO中准备10 mM的储备溶液。
2.准备2X半胱天冬酶底物（50 µM）分析溶液：50 µL底物原液，100 µL DTT（1M），400 µL EDTA（100 mM），10 mL Tris Buffer（20 mM），pH = 7.4。
3.将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液混合，并在室温下孵育至少1小时。
4.使用荧光酶标仪检测荧光或使用酶标仪检测吸光度。
使用细胞渗透性FMK Caspase探针进行细胞Caspase测定
1.在DMSO中准备2-5 mM的储备溶液。
2.根据需要处理细胞。
3.通过用20 mM Hepes缓冲液（HHBS）在Hanks中稀释DMSO储备溶液（来自步骤2.1），制备2X渗透性半胱天冬酶底物（20 µM）分析溶液。
4.将等体积的处理过的细胞与2X半胱天冬酶底物测定溶液混合（来自步骤2.3），并在37°C，5％CO2的培养箱中孵育细胞至少1小时。
5.用HHBS清洗细胞至少一次。
6.通过流式细胞仪，荧光显微镜或荧光酶标仪检测荧光强度。
使用细胞渗透性FMK Caspase探针进行细胞半胱天冬酶测定（仅适用于＃13470-13476）
1.通过向小瓶中加入50 µL DMSO制备250X储备液。
2.根据需要处理细胞。
3.以1：250的比例将250X DMSO储备溶液添加到细胞溶液中（例如2 µL至500 µL细胞），并将细胞在37°C，5％CO2的培养箱中孵育1小时。
4.用HHBS清洗细胞至少一次。
5.通过流式细胞仪，荧光显微镜或荧光酶标仪检测荧光强度。
参考文献
The Dietary Flavonoid Fisetin Causes Cell Cycle Arrest, Caspase-Dependent Apoptosis, and Enhanced Cytotoxicity of Chemotherapeutic Drugs in Triple-Negative Breast Cancer Cells
Authors: M. L. Smith
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Inhibition of Caspase-Like Activities Prevents the Appearance of Reactive Oxygen Species and Dark-Induced Apoptosis in the Unicellular Chlorophyte Dunaliella Tertiolecta(1)
Authors: M. Segovia
Journal: J Phycol (2009): 1116-26
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Lipopolysaccharide accelerates caspase-independent but cathepsin B-dependent death of human lung epithelial cells
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C-terminal region of Bfl-1 induces cell death that accompanies caspase activation when fused with GFP
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Selective caspase activation may contribute to neurological dysfunction after experimental spinal cord trauma
Authors: S. M. Knoblach
Journal: J Neurosci Res (2005): 369-80